体外诱导负载TGF-β1基因的兔关节滑膜细胞向软骨细胞分化

目的 探讨体外诱导负载TGF-β1基因的兔关节滑膜细胞向透明软骨细胞分化的可行性,为组织工程学修复关节软骨损伤提供体外实验依据.方法 体外培养扩增B型滑膜细胞并纯化,构建pcDNA3.1-TGF-β1,用Lipofectamine 2000法转染,转染pcDNA3.1-TGF-β1组为实验组,转染pcDNA3.1(+)空质粒组为对照组,未转染组为空白组.转染后48 h行G418筛选,RT-PCR检测TGF-β1的瞬时表达,同时取阳性细胞爬片,行抗TGF-β1免疫组织化学染色;G418维持筛选,每2 d取部分细胞计数,连续12 d,绘制生长曲线,转染后3周,每周取部分细胞爬片行抗TGF-β1和抗Ⅱ型胶原免疫组织化学染色.图像分析采用Image-Pro Plus V6.0软件分析处理,实验数据采用SPSS 13.0行统计学处理,组间两两比较采用方差分析.结果 实验组转染后转染率为18%,转染后生长曲线显示细胞早期生长活性下降,细胞数量在转染后第4天降低到3.6×104/ml,第3天RT-PCR检测到TGF-β1阳性片段,抗TGF-β1免疫组织化学染色见细胞内阳性颗粒,对照组及空白组均为阴性;细胞转染后第3周,实验组抗TGF-β1及抗Ⅱ型胶原免疫组织化学染色仍见细胞内阳性颗粒,对照组及空白组为阴性;图像分析结果表明,转染后第7天实验组抗TGF-β1的PU值为(19.04±1.26),对照组及空白组PU值分别为(4.07±0.65)和(3.23±0.56),差异有统计学意义(P<0.05);转染后14 d实验组抗Ⅱ型胶原的PU值为(13.74±1.27),对照组及空白组PU值分别为(4.62±0.56)和(3.93±0.38),差异有统计学意义(P<0.05).结论 脂质体法重组pcDNA3.1-TGF-β1基因可成功转染兔关节滑膜细胞,转染后细胞成功表达TGF-β1,并分泌Ⅱ型胶原蛋白,表现出透明软骨细胞样生理特征,滑膜细胞有望成为一种良好的软骨组织工程的种子细胞.     

射频紧缩治疗犬前交叉韧带的组织学变化

背景:射频紧缩已广泛用于临床,前交叉韧带松弛为射频紧缩治疗的适应证,但紧缩治疗后前交叉韧带的组织学变化尚不清楚.目的:观察前交叉韧带不同部位进行射频紧缩后的组织学变化,以确定前交叉韧带射频紧缩的最佳部位.设计、时间及地点:随机分组动物实验,组织形态学观察,于2005-01/2006-07在中山大学附属第二医院医学研究中心完成.材料:成年健康家犬29只,体质量(16.5±2.2)kg,年龄(4.1±0.7)年,X射线片确定动物骨骺已经闭合.方法:随机选取1只家犬解剖股动脉和股静脉,将股动脉近端结扎,远端插管,以Krebs平衡液以50 mL/(min·kg)流量灌流15 min,结扎股静脉近端,远端插管.将墨汁灌注液由远端注入,直至下肢皮肤变成黑色,观察家犬前交叉韧带的血液供应.24只犬采用抽签法随机分为射频紧缩中间部组、射频紧缩两端组.紧缩方式:射频探头从一个端开始以2.5 mm/s速度开始向另一端移动,无遗漏,不重叠,射频紧缩中间部组紧缩韧带中间1/3,射频紧缩两端组紧缩两端各1/3,术后6,12周进行组织形态学观察.另外4只家犬取前交叉韧带8条,2条用于即时射频紧缩后的组织学观察,另外6条作为空白对照组不进行紧缩.主要观察指标:MASSON染色、苏木精-伊红染色观察前交叉韧带内部纤维的变化特点、细胞计数及血管密度.结果:分布在前交叉韧带的血管形成树状分支,前交叉韧带胫骨端和股骨端的血管分布明显丰富于前交叉韧带中端的血管分布,两端的血管网有一部分交通支经过中部相连.MASSON染色显示射频处理部位重新修复组织均为胶原纤维组织,以射频紧缩韧带两端组更明显.术后12周,两组细胞密度均较6周时降低(P.<0.05),射频紧缩两端组细胞密度始终高于射频紧缩中间部组(P<0.05);两组滑膜下血管密度均较6周时降低(P<0.05).术后6周射频紧缩两端组滑膜下血管密度高于射频紧缩中间部组(P<0.05).结论:射频处理后前交叉韧带的再血管化模式是由滑膜向韧带射频渗透区域进行的,韧带两端组织的修复优于韧带的中间部分,提示射频紧缩的最佳部位为韧带两端.     

2010年西双版纳州7～18岁傣族学生形态发育现状分析

目的了解西双版纳7~18岁傣族学生形态发育的现状,为儿童青少年发育研究提供科学基础资料。方法利用2010年全国学生体质健康调研资料,分析2010年西双版纳7~18岁傣族学生形态发育现状。结果傣族学生随着年龄的增大,形态指标身高、体质量、胸围发育均有不同程度的增长,生长发育的突增期提前。年平均增长值:身高男生4.21 cm、女生3.40 cm;体质量男生3.01 kg、女生2.40 kg;胸围男生2.32 cm,女生1.90 cm。生长发育突增期:身高、体质量、胸围女生均为11岁、男生身高13岁、体质量胸围14岁。身体匀称度表现出中短躯干型、下肢较长、体质量较轻、胸廓相对较窄的体型。结论傣族学生生长发育低于全国平均水平,除受遗传因素影响外,还受自然环境、营养、卫生和运动等社会环境因素的制约,建议将生长发育干预列为学校卫生工作的重点,开展以提高生长发育水平为核心的健康教育活动,加强营养知识的宣传和普及,倡导科学合理的膳食结构、健康积极的生活方式,采取以科学锻炼为中心的干预措施,提高傣族学生的生长发育水平。     

后腹腔镜手术治疗泌尿外科疾病

目的：探讨后腹腔镜手术在泌尿外科的应用。方法：回顾性分析2002-01～2008-12后腹腔镜手术治疗173例泌尿系疾病患者的临床资料。结果：169例手术成功,4例转开放。手术时间0.5～4.5h,平均1.5h。术中及术后均未输血,无明显术后并发症。术后住院时间2～18d,平均5.6d。结论：腹腔镜手术治疗泌尿系疾病具有手术安全、创伤小、术后恢复快、住院时间短等优点。     

公立医院治理的制度选择

随着16个公立医院改革国家联系试点城市的确定,新一轮医疗体制改革进入深水区。公立医院管理体制改革的核心是完善公立医院治理机制。完善治理机制有助于理顺政府与公立医院的关系,能从治理的角度解决医院发展的动力问题,是公立医院改革试点成功的关键。     

我国公立医院主要改革模式评价

用Preker—Harding模型对上海、无锡、潍坊、浙江东阳和成都武侯五个有代表性的公立医院治理模式进行分析,判断各个模型下公立医院的自主化程度,并通过分析决策权、剩余索取权、市场风险程度、问责和社会功能五个维度是否匹配衡量其合理性,为我国公立医院治理结构改革提供借鉴。     

利用液相色谱串联质谱技术检测卵巢上皮性癌血清标记物的研究

目的:通过差异蛋白组学方法探寻卵巢上皮性癌血清标记物,以提高其早期诊断率。方法:收集20例卵巢上皮性癌和20例卵巢良性肿瘤患者外周血血清,等容积混合去除高丰度蛋白后,用液相色谱串联质谱技术(LC-MS/MS)检测、鉴定两组血清的差异蛋白,用DeCyder软件分析后得到有临床应用意义的显著表达差异的蛋白。结果:LC-MS/MS共筛选出94个具有显著差异的蛋白,与良性卵巢肿瘤相比,在卵巢上皮性癌中,N-乙酰胞壁酸-L-丙氨酸酰胺酶(PGRPL)、铜蓝蛋白、补体9(C9)等蛋白表达上调,Isoform1 of Mirror-image polydactyly gene 1 protein(MIPOL1)、载脂蛋白A-Ⅳ(APOA-Ⅳ)等蛋白表达下调。结论:经鉴定,PGRPL、铜蓝蛋白和C93种蛋白质可能在卵巢上皮性癌发病中发挥作用,有望作为新的血清标记物。     

一例闭锁综合征患者的护理

闭锁综合征是临床上少见的一种特殊意识状态。其主要临床表现为患者不语、不动(肢体瘫痪)、不主动进食、面无表情,仅可用眼球活动和睁闭眼示意,刺激瘫肢可出现去大脑痉挛。1990年我院收治了一例闭锁综合征的患者,经治疗后病情稳定。现将护理体会介绍如下。病例介绍患者女,60岁,因头痛、头昏反复发作10年,加     

赖氨匹林和阿斯匹林镇痛作用的比较

目的观察赖氨匹林和阿斯匹林的镇痛作用。方法小鼠扭体法及热板法。结果赖氨匹林ｉｇ给药２种剂量（９０．４及１８０．８ｍｇ·ｋｇ－１）对小鼠热板法中的痛反应潜伏期均有延长作用，可显著提高小鼠痛阈。赖氨匹林ｉｇ给药３种剂量（４５．２，９０．４及１８０．８ｍｇ·ｋｇ－１）均可明显减少小鼠扭体反应次数。赖氨匹林ｉｃｖ给药也具有明显的镇痛作用。结论赖氨匹林有较好的镇痛作用。