shRNA干扰AKT基因对Jeko-1细胞增殖、凋亡及Notch1信号通路的影响

目的:探讨RNA干扰沉默AKT基因对套细胞淋巴瘤Jeko-1细胞株的增殖、凋亡及Notch1信号通路的影响。方法:设计针对AKT基因短发夹RNA,将其连入pGPU6/GFP/Neo质粒中,构建AKT shRNA真核表达载体,经脂质体转染入Jeko-1细胞,应用RQ-PCR及Western blot鉴定其干扰效果,MTT法绘制细胞生长曲线,流式细胞术检测细胞凋亡的变化,Western blot检测凋亡相关蛋白信号及通路相关蛋白p-AKT、Notch1、HES1的变化。结果:AKT shRNA转染Jeko-1细胞后,AKT的mRNA和蛋白表达均明显下降,有统计学意义(P0.05);转染组细胞增殖率明显低于Neg-shRNA组和空白对照组(P0.05),AKT shRNA传染48 h后,凋亡率为(37.72±4.39)%,而NegshRNA组和空白对照组分别为(2.62±1.53)%、(1.57±0.42)%,差异有统计学意义(P0.01);凋亡相关蛋白BCL-2表达下降,而BAX、caspase-3、caspase-9表达上升;PI3K/AKT信号通路相关蛋白p-AKT磷酸化水平下降、Notch1信号通路相关蛋白Notch1、HES1表达下调。结论:干扰沉默AKT基因可抑制套细胞淋巴瘤Jeko-1细胞增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能是特异性抑制PI3K/AKT信号通路也能下调Notch1信号通路的活性。     

关节镜下前交叉韧带重建术的研究进展

前交叉韧带是膝关节重要的稳定结构,损伤后可引起许多继发性的关节疾病。目前,关节镜下重建术已成为治疗ACL损伤的主流方法。随内固定技术的不断改进,越来越多学者开始采用自体腘绳肌腱作为移植物,运用更符合生物力学、解剖学要求的方法重建前交叉韧带,取得了满意的临床效果。本文就近几年有关ACL重建在移植物的选择、固定技术的改进、术后疗效的评估以及重建失败的原因与翻修等方面的新进展作一综述。     

中老年男性人群代谢综合征和良性前列腺增生的相关性分析

目的 探讨中老年男性人群代谢综合征与良性前列腺增生（BPH）的相关性。方法 选择2008年5月至2013年7月于本院体检中心体检的中老年男性（≥50岁）共151例,检查一般项目包括年龄、身高、体质量、血压、既往史、国际前列腺症状评分表（IPSS）评分等。实验室检查包括空腹血糖、血脂、前列腺特异性抗原（PSA）等。影像学检查包括经直肠超声,并以此测量前列腺的体积;同时测量尿流率（Q M ax ）。利用以上指标比较代谢综合征组和非代谢综合征组BPH患病率;同时比较代谢综合征组内各因素与BPH的相关性。结果 依据检查结果分为代谢综合征组（37例）和非代谢综合征组（114例）。代谢综合征组及非代谢综合征组BPH的发病率分别为32．4％（12／37）和12．3％（14／114）。两组之间相比IPSS、前列腺体积和血清PSA差异有统计学意义（ P ＜0．05）,QMax差异无统计学意义（ P＝0．071）。肥胖、高脂血症和糖尿病是BPH的危险因素（OR值分别为1．72、3．31和2．07,P值分别为0．042、0．029和0．046）。结论 代谢综合征检查者的BPH患病率较高,主要影响BPH患者的IPSS、前列腺体积和PSA。肥胖、高脂血症、糖尿病是BPH的危险因素。     

床旁支气管镜在重症患者吸痰中的应用

目的探讨便携式床旁纤维支气管镜(纤支镜)在重症患者吸痰治疗中的应用效果。方法对我科2011年3月—2012年3月应用床旁纤支镜吸痰及灌洗治疗的58例重症患者的临床资料进行回顾性分析。结果本组33例为脑出血、颅脑损伤或外伤后并发肺部感染;10例为慢性阻塞性肺疾病急性发作、肺源性心脏病、肺性脑病合并肺部感染;8例为重症肺炎;7例为吸入性肺炎。气管切开13例,气管插管21例,行无创呼吸机辅助通气9例,均予床旁纤支镜吸痰,并配合抗感染、营养支持等治疗。58例呼吸困难或脉搏氧饱和度均很快改善,其中50例肺部感染、肺不张治愈,8例因肺部广泛耐药菌感染或颅内病变加重,最终死亡。结论床旁便携式纤支镜能有效改善因咳痰、痰液黏稠不易咳出所致肺部感染、肺不张及急性痰液阻塞窒息,显著提高抢救成功率。     

分子印迹固相萃取-高效液相色谱法测定尿液中甲基苯丙胺和苯丙胺

目的:建立快速、准确的尿液中甲基苯丙胺(MA)及其代谢产物苯丙胺(AMP)的分子印迹固相萃取(MISPE)高效液相色谱测定方法。方法:尿液与10 mmol/L醋酸铵缓冲液(pH 8.0)混合后离心分离(8000 rpm),采用预先活化过的分子印迹固相萃取柱净化,以醋酸/乙腈溶液洗脱,在XBridge RP18色谱柱上,以甲醇-乙腈-水溶液(15∶30∶55,V/V/V)为流动相,采用210 nm波长进行检测。结果:MA和AMP的加标回收率在88.5%～97.0%范围,其相对标准偏差均小于5.0%,在0.05 mg/L～15.0 mg/L范围呈现良好的线性,其回归系数大于0.999,检出限(LODs)分别为0.005 mg/L和0.01 mg/L。结论:本方法回收率高,净化效果显著,稳定性好,杂质干扰少,可满足临床吸毒病人尿液中MA和AMP的检测要求。     

脑脊液髓鞘碱性蛋白抗体检测对格林-巴利综合征的临床价值

目的探讨格林-巴利综合征（GBS）中枢神经髓鞘的免疫性损伤。方法GBS患者20例，神经系统其它疾病组（OND）20例，非神经系统疾病手术者33例。以酶联免疫吸附法检测73份脑脊液（CSF）中髓鞘碱性蛋白IgG（MBP－IgG）。结果GBS患者、OND患者和非神经系统疾病手术者CSF中MBP－IgG阳性率分别为55％、30％和9.1％。GBS患者CSF中MBP-IgG阳性率与发病天数有关。结论部分GBS有中枢神经髓鞘的免疫性损害，证实GBS是自身免疫性脱髓鞘病。     

重镇通络法治疗耳鸣的体会

我们自1987～1989年间试用重镇通络法为主治疗耳鸣43例,收效甚佳,现小结如下: 一般资料: 42例患者中、男性13例、女性3例、病程最长者十余年,最短者数天,其中因内耳性眩晕所致者12例,神经性耳鸣19例,高血压所致者10例,情绪波动所致者2例。     

妊娠中期非瘢痕性子宫破裂1例

1病例介绍 蒋某，女，24岁，已婚，住院号：0183772。因停经27^＋wk，性交后下腹疼痛5h于2006年1月31日入院，患者末次月经2005年7月8日，量中，无血块及痛经。停经48d在省妇保院检查B超提示：宫内早孕。因阴道少量出血，早孕期间曾行安胎治疗，停经13^＋wk时我院B超示：宫内中孕，大小与孕周相符，一直定期在我院门诊产检，孕20wk自觉胎动，2006年1月15日上午曾有性生活，之后感下腹剧痛，卧床休息30min后缓解，无阴道出血，未检查。同月30日上午，再次性生活后，又感下腹阵发性疼痛，无阴道出血，22：00时许下腹疼痛加剧，但无肛门坠胀，无头昏等不适，并自觉胎动消失，