自体树突状细胞来源的Exosome活化HBV携带者PBMCs的体外研究

目的探讨负载HBcAg的树突状细胞（DCs）来源的Exosomes（DEXs）体外活化自体外周血单个核细胞（PBMCs）的能力,并对慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染者与自然免疫获得者来源的DEXs的功能进行比较。方法培养PBMCs来源的DCs,分级离心法收获DEXs,电镜及Western blot分析DEXs结构及蛋白成分,MTS和ELISPOT法检测负载HBcAg的DEXs体外活化自体PBMCs增殖及产IFN-γ的能力。结果负载HBcAg的成熟DEXs体外刺激自体PBMCs增殖能力强于未成熟者（P〈0.01）,自然免疫者与慢性感染者间差异无统计学意义;成熟DEXs刺激PBMC产IFN-γ能力亦强于未成熟者[（182±7）vs（14±2）,P〈0.05],且自然免疫者刺激PBMCs产IFN-γ能力强于慢性感染者（68±12,P〈0.05）。慢性感染者mDCs联合mDEXs刺激PBMCs产IFN-γ能力强于单用mDCs[（326±3）vs（275±23）,P〈0.05],相当于自然免疫获得者联合组（396±15,P〉0.05）。结论 mDEXs可有效活化自体PBMCs,且自然免疫者mDEXs活化PBMCs能力强于慢性感染者,这一现象可能与慢性感染者体内T细胞活化过程存在缺陷有关。     

自体骨髓移植治疗晚期转移性乳腺癌

1例晚期转移性乳腺癌患者采用大剂量联合化疗与自体骨髓移植(ABMT)。患者58岁,肝、肺、骨骼、肾与淋巴结均有转移,且有不同程度的功能损害,用一般剂量的联合化疗无效,ABMT后肝脏和肺部转移灶明显缩小,全身情况明显改善。     

联合转染p53与血管生成抑素基因对人胃癌细胞系SG7901生长的影响

目的 探讨联合转染p53和血管生成抑素（AS）基因对人胃癌细胞系SG7901生长的影响。方法 用脂质体转染法分别将p53、AS基因、p53和AS基因转染人胃癌细胞系SG7901。以RT-PCR法检测转染后细胞目的基因的表达，通过细胞集落形成实验、MTT生长曲线、细胞周期检测观察其生物学特性变化。结果 p53或AS基因均能抑制转染细胞的生长，而联合转染两种基因的细胞生长抑制更明显。结论 p53和AS基因具有协同抑制恶性肿瘤细胞生长作用，提示联合多种基因可能有利于恶性肿瘤的基因治疗。     

以黄疸为主要表现的尼曼一匹克病一例

患者男,16岁,汉族,因"反复眼黄、皮肤黄3年,再发1个月"于2008年6月5日入院.3年前其家人发现其眼黄、皮肤黄,无其他任何不适.曾多次在当地县医院门诊查肝功能示总胆红素升高,以间接胆红素升高为主(波动于25～45 μmol/L),余正常.     

抗病毒治疗后慢性乙型肝炎患者外周血免疫细胞的改变与HBeAg血清学阴转的关系

目的 动态观察阿德福韦酯治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者外周血HBV特异性T淋巴细胞功能和非特异性免疫细胞的改变,探讨其与HBeAg血清学阴转的相关性;以进一步探讨抗病毒治疗的免疫机制. 方法 20例HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者予以阿德福韦酯治疗48周,酶联免疫斑点试验检测分泌干扰素γ的HBV特异性CD4+T淋巴细胞频数,流式细胞术检测调节性T淋巴细胞(Treg)数量和自然杀伤细胞活化受体NKG2D的表达.根据资料不同采用t检验或Mann-Whitney U检验进行统计学分析. 结果 治疗48周时有6例(占30％)患者出现HBeAg的阴转,分为HBeAg阴转组(n=6)和HBeAg未阴转组(n=14).伴随病毒载量的下降,HBeAg阴转组治疗后HBcAg特异性CD4+T淋巴细胞分泌IFN γ和细胞增殖的能力均较治疗前增强,同时也较HBeAg未阴转组增强,48周时(外周血单核细胞中的斑点形成细胞数)的(661.25±281.97)×10-6对比0周时的(280.75±104.33)×10-6,P=0.045,差异有统计学意义;而HBeAg未阴转组治疗前后无改变.同时Treg数量逐渐下降,4周后趋于稳态;而NKG2D在治疗后12周开始持续上升,48周较基线值显著增加(P=0.000).Treg和NKG2D的表达趋势在HBeAg阴转组和未阴转组间差异无统计学意义. 结论 阿德福韦酯抗病毒治疗过程,伴随病毒负荷下降,部分患者HBV特异性T淋巴细胞功能呈一过性增强,与HBeAg阴转密切相关;进一步证实HBV特异性T淋巴细胞功能的恢复是清除病毒,促进HBeAg血清学转换的重要因素.     

血管内皮生长因子与慢性粒细胞白血病的相关性

目的 探讨慢性粒细胞白血病(CML)中血管内皮生长因子(VEGF)等血管新生调节因子表达的状态及其在CML病程进展中的作用。方法 (1)CML患者骨髓和K562细胞VEGF及其受体的表达。采用RT-PCR方法检测CML骨髓细胞和K562细胞的VEGF、VEGFR-1(Fit-1)和VEGFR-2(KDR)mRNA的表达；免疫组织化学法检测K562细胞VEGF的蛋白表达；ELISA法检测K562、HL-60和人脐静脉     

肿瘤坏死因子α、γ干扰素和红细胞生成素与类风湿性关节炎贫血相关性研究

目的探讨类风湿性关节炎(RA)伴慢性病性贫血(ACD)的特征,及肿瘤坏死因子α(TNFα)、γ干扰素(IFN-γ)和红细胞生成素(Epo)在其发病中的作用.方法采用ELISA法检测RA患者血清TNFα、IFN-γ水平及RA伴ACD患者的血清Epo变化.测定RA患者的铁代谢指标.观察TNFα、IFN-γ对钴盐(CoCl2)诱导人肝癌细胞株(HepG2) Epo产生的影响及TNFα、IFN-γ和Epo对正常骨髓CFU-E和BFU-E的影响;以及RA自身血清、Epo对RA骨髓CFU-E的影响.结果与正常对照组比较,RA及伴ACD者血清中TNFα、IFN-γ均显著增高.TNFα、IFN-γ与血清铁、血红蛋白浓度呈负相关.RA伴ACD者的Epo水平高于正常对照组,但低于同等贫血程度的单纯缺铁性贫血组,提示RA伴ACD者体内Epo相对不足.TNFα、IFN-γ均能抑制钴盐(CoCl2)诱导的HepG2的Epo生成,且这种抑制作用是特异性的而非毒性所致.TNFα、IFN-γ抑制正常骨髓CFU-E和BFU-E集落形成,并呈剂量依赖性.RA自身血清能抑制其CFU-E形成,而在胎牛血清培养基中RA自身的CFU-E集落数与正常对照组相似.rhEpo能纠正TNFα、IFN-γ和RA自身血清对红系祖细胞的抑制.结论 RA患者血清中存在造血干细胞抑制物.TNFα、IFN-γ可能介导RA的ACD发病.rhEpo能有效治疗RA贫血.     

医用脂肪乳诱导的肝脂肪变性细胞模型的建立

最近,人来源的脂肪肝体外模型被用来研究肝细胞脂质蓄积的后果,选择遗传或环境诱导的肝脂肪变性的动物模型已是研究脂肪肝和肝脏慢性疾病的方法。这些模型通常是用肝细胞株、原代肝细胞给予饱和或不饱和脂肪酸制备,     

血管内皮生长因子对人慢性髓性白血病细胞系 K562细胞的抗凋亡作用

为了探讨血管内皮生长因子（VEGF）对人白血病细胞增殖的影响,用形态学、DNA断裂琼脂糖凝胶电泳、流式细胞仪（FCM）DNA倍体分析观察VEGF对As2O3诱导的K562细胞凋亡的影响;采用蛋白印迹法检测不同浓度的VEGF对K562细胞bcl-XL、Bax和caspase-3蛋白表达的影响;用RT-PCR方法检测上述条件下bcl-XL、Bax的mRNA变化.结果表明：VEGF能阻止K562细胞发生凋亡,与细胞周期分布改变无相关性（P＞0.05）;随着VEGF浓度的增加K562细胞bcl-XL的mRNA与蛋白表达上调,Bax的蛋白表达降低;激活pro-caspase-3→caspase-3被阻止或减少.结论：通过影响bcl-XL/Bax表达比率可能是VEGF抑制K562细胞凋亡的机制之一.