应用流式细胞仪和荧光原位杂交技术检测小鼠体内诱导的IL-1mRNA

文章介绍流式细胞仪(FC)和荧光原位杂交技术(FISH)联合运用,作为定量检测选择细胞群中特异性细胞因子mRNA水平的敏感方法.为了检测小鼠体内诱导的IL-1αmRNA,首先于BALB/C小鼠腹膜内注入20μgLPS,3小时后收集脾细胞和硫基乙醇诱导的腹腔渗出细胞.每组细胞标记大鼠抗小鼠巨噬细胞抗体(MAC)或IA~d.RNA-RNA FISH测定,将悬浮细胞与生物素化的有意义IL-1α探针,反义IL-1α和反义IL-2探针共同孵育37℃17小时.杂交细胞用RNA酶处理,异硫氰酸荧光素     

死亡受体DR5在急性非淋巴细胞白血病细胞中的表达及其临床意义

目的：探讨死亡受体DR5在急性非淋巴细胞白血病（ANLL）细胞中的表达及其临床意义。方法：培养Jurkat,NB4细胞和抽取ANLL患者的骨髓细胞，分离出单个核细胞，用免疫组织化学染色的方法测定DR5的阳性表达率，所选病例进行诱导化疗后，研究DR5的阳性表达率与诱导化疗结果的关系。结果：DR5的阳性表达率在Jurkat细胞中为98％，阳性物质主要分布在胞质及胞膜中；而在NB4细胞中则为81％。不同ANLL患者的DR5阳性细胞的百分率存在较大的差异，其中最高达94％，最低为45％。ANLL患者的DR5阳性表达率与诱导化疗后骨作片的原始和幼稚细胞比例呈负相关，与诱导化疗后的缓解率呈正相关；DR5的阳性表达率与ANLL分型无明显相关。结论：该结果对ANLL诱导化疗后的疗效判定有一定的参考价值。     

反义寡聚脱氧核苷酸对白血病K562细胞株生物特性的影响

目的：探讨反义核酸对白血病Ｋ５６２细胞株的影响。方法：用人工合成的ｂｃｒ３／ａｂ１２反义寡聚脱氧核苷酸（ＡＳＯ－ｂ）及无义寡聚脱氧核苷酸（Ｎ－ＯＤＮ）处理人急性红白血病细胞株Ｋ５６２细胞系，以观察Ｋ５６２细胞的生长及其ｂｃｒ３／ａｂ１２癌基因的表达。结果：ＡＳＯ－ｂ能抑制体外培养的Ｋ５６２细胞的生长（抑制率为５３．８３±１０．７８，Ｐ＜０．０５），集落形成（４０μＭ的ＡＳＯ－ｂ的抑制率为８８．９，Ｐ＜０．０５），ＤＮＡ及Ｐ２１０蛋白的合成（１２ｈ抑制率分别为７９．６８±１３．５３，６０．３３，Ｐ＜０．０５）；而对照组对Ｋ５６２细胞则无明显的影响。结论：提示ｂｃｒ３／ａｂ１２癌基因是维持Ｋ５６２细胞恶性生长表型的主要因素，也为慢性髓系白血病的治疗指出了新的方向。     

PAIg检测诊断ITP的局限性

０　引言　血小板相关抗体（ＰＡＩｇ）是原发性血小板减少性紫癜（ＩＴＰ）的诊断、疗效及预后估计的有效指标．用ＥＬＩＳＡ法定量测定６７例血小板减少患者的ＰＡＩｇ,结果发现其中有２２例非ＩＴＰ患者的ＰＡＩｇ增高,说明ＰＡＩｇ用于诊断ＩＴＰ存在一定的局限性,在无其它临床指标的前提下,不能单凭ＰＡＩｇ的增高而诊断为ＩＴＰ．１　材料和方法１．１　材料　ＰＡＩｇＡ,ＰＡＩｇＧ,ＰＡＩｇ试剂盒,福建太阳生物技术公司提供;酶标仪,华东电子管厂制造;血小板制备盒,福建太阳生物技术公司提供;缺铁性贫血８例,溶血性贫血…     

慢性粒细胞白血病异基因造血干细胞移植34例疗效及生活质量随访

目的：观察异基因造血干细胞移植治疗慢性粒细胞白血病的疗效并进行生活质量评估。 方法：选择2002-03／2007-03在解放军第四军医大学西京医院血液科接受异基因造血干细胞移植18～50岁慢性粒细胞白血病患者34例，其中HLA相合的同胞供者29例，非血缘志愿供者5例。所有患者及其家属对治疗以及研究均知情并签署同意书，医院伦理委员会知情并批准。预处理方案采用改良的马利兰联合环磷酰胺或环磷酰胺联合全身放疗方案。采用标准的环孢素联合短期氨甲喋呤方案预防移植物抗宿主病；无关供者移植加用抗人胸腺细胞球蛋白。所有患者均接受WHOQOL—BREF问卷调查其移植前后的生活质量。 结果：所有患者均获得植入。①移植物抗宿主病出现情况：14.7％（5／34）患者出现急性移植物抗宿主病，41．2％（14，34）患者出现慢性移植物抗宿主病。②移植其他并发症：合并重症肝静脉闭塞病1例；并发纯红细胞性再生障碍性贫血3例，甲状腺功能低下2例，女性雌激素水平低下9例，经积极治疗，大部分获得缓解。③长期生存情况：随访3～60个月，现存活25例（73．5％），其中在慢性期移植者，生存率达82．1％（23／28）。26．4％（9／34）患者在移植后1～50个月时死亡，4例死于白血病复发，5例死于移植并发症。（9生活质量评分：与患者移植前比较，各项指标均有显著的提高（P〈0．05）。 结论：异基因造血干细胞移植是治疗慢性粒细胞白血病的有效方法，尤其在慢性期移植效果较好。移植后长期存活患者的生活质量良好，慢性移植物抗宿主病及女性卵巢功能低下是影响患者生活质量的主要因素。     

改良Mckissock法巨乳缩小术

目的:探讨重度乳房肥大下垂的理想术式。方法:应用改进的Mckissock术式行乳房缩小术。结果:17例(32只)重度乳房肥大下垂术后外观挺拔,无乳头乳晕坏死发生和其他并发症。结论:改进的Mckissock法乳房缩小整形术手术方法简便,术后乳房外观良好,并发症少,值得推广。     

骨髓成纤维样基质细胞系对急性髓细胞白血病细胞系增殖与分化影响的研究

目的：以急性髓细胞白血病（acute myeloid leukaemia,AML）细胞系为研究对象,观察正常人骨髓成纤维样细胞系（human bone marrow fibro—blastoid stromal cell line,HFCL）对急性单核细胞白血病细胞系U937、急性粒细胞白血病敏感细胞HL-60和多药耐药细胞HL-60／VCR增殖和分化的影响。方法：建立U937、HL-60和HL-60／VCR细胞与HFCL细胞的共培养模型,实验分对照组、直接接触组和transwell组。采用台盼蓝拒染法测定生长曲线;硝基四氮唑蓝（NBT）确定细胞分化;流式细胞仪检测细胞周期和CD11b、CD13、CD14和CD33细胞表面抗原进一步鉴定细胞分化;west-ernblot检测增殖细胞核抗原（PCNA）和P-糖蛋白（P-gP）的表达。结果：与HFCL细胞共培养96h后,U937、HL-60和HL-60／VCR细胞的生长受抑,且与HFCL细胞直接接触组的抑制作用大于用tr-answell组,P〈0．01。同时发现AML细胞系与HFCL细胞共培养后,G0／G1期细胞比例均增高,而S期细胞均减少,P〈0．01;尤其是直接接触组CD11b和CD14表达也均增高（P〈0．01）,CD13和CD33变化不大,NBT阳性细胞轻度增高,且差异有统计学意义。Western blot检测结果显示,3种AML细胞系PCNA表达下调;以直接接触组为甚。提示介导着白血病细胞和骨髓基质细胞间的相互作用的整合素p1（VLA-4）和p2（LFA-1）,在HFCL细胞对AML细胞生长作用影响中起着不可忽视的作用。结论：HFCL对3种具有代表性的AML细胞系U937、HL-60和HL-60／VCR有增殖抑制和诱导分化作用,除了能抑制AML细胞的生长,抑制PCNA的表达,出现G0／G1期阻滞外,还能诱导其部分向单核细胞分化。     

Xbp-1基因沉默对硼替佐米诱导人多发性骨髓瘤细胞凋亡的影响

本研究旨在探讨xbp-1基因沉默对硼替佐米诱导骨髓瘤细胞株NCI-H929(H929)凋亡的影响。通过小发夹RNA(shRNA)干扰xbp-1基因表达,采用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测靶细胞凋亡率,采用Wes-ternblot检测XBP-1蛋白水平。结果表明:通过慢病毒载体PLL3.7介导的xbp-1 shRNA表达,能有效抑制H929细胞XBP-1蛋白表达,xbp-1 shRNA表达细胞的凋亡率显著高于对照组[(10.13±0.61)%vs(2.5±0.2)%,p0.05];经硼替佐米处理后,xbp-1基因功能缺陷的H929细胞的凋亡率显著高于空载体组[(45.07±1)%vs(2.73±0.25)%,p0.05]。结论:xbp-1基因沉默能够显著增强硼替佐米对多发性骨髓瘤细胞的促凋亡活性。     

高白细胞白血病6例治疗体会

我院自 2 0 0 0年 1～ 6月共收治 6例高白细胞白血病 ,现回顾分析如下。资料和方法1　一般资料　 6例患者的血象、骨髓细胞学及骨髓组织学特征等均符合 1 986年天津白血病治疗研讨会标准 [1]。其中男 5例 ,女 1例。中位年龄 3 9( 2 1～ 66)岁。急性淋巴细胞白血病 2例 ,急性非淋巴细胞白血病 4例。外周血白细胞计数中位数 2 1 3 ( 1 1 4～ 3 84)× 1 0 9/L,外周血幼稚细胞54 %～ 84% ,6例患者均有不同程度的高粘滞综合征表现。2　方　法　 6例患者在化疗前均采用羟基脲 4.0～ 6.0 g/d,分 2～ 3次服用 ,连续 3～ 5d,同时加用别嘌呤醇 0 .1 ,…