抑制性消减杂交技术筛选XTP4蛋白反式调节基因

目的 筛选、克隆乙型肝炎病毒(HBV)X蛋白(HBxAg）反式激活基因XTP4转染肝癌细胞后的反式调节基因,探索XTP4基因表达对肝细胞基因表达谱的影响。方法 常规的分子生物学技术构建真核表达载体peDNA3．1(-)-XTP4,应用抑制性消减杂交(SSH)技术对重组表达质粒peDNA3.1(-)-XTP4转染的HepG2细胞和空载体转染的相同细胞差异表达的mRNA进行研究,将富集的二次PCR产物与T／A载体连接,并转化大肠杆菌进行文库扩增,随机挑取克隆PCR扩增后进行测序及同源性分析。结果 消减文库扩增后得到21个阳性克隆,PCR分析显示其中16个克隆含有200～1000bp的插入片段。对插入片段进行测序及生物信息学分析,结果共获得9种蛋白编码基因。这些差异表达的基因与肝细胞纤维化形成、肿瘤发生、线粒体氧化还原代谢、细胞生长调节密切相关。结论 应用SSH技术成功筛选了XTP4对肝癌细胞的反式调节基因,为进一步阐明HBxAg对肝细胞蛋白的反式调节作用提供了理论依据。     

百赛诺序贯治疗防止拉米夫定停药后病情反复的疗效观察

目的探讨百赛诺序贯治疗防止拉米夫定停药后病情反复的疗效。方法选择门诊服用拉米夫定治疗1年以上,并因各种原因准备停用拉米夫定的慢性乙型肝炎患者共60例,分治疗组及对照组各30例,2组患者拉米夫定均采用减量停药法,治疗组在拉米夫定减量同时加用百赛诺50mg,3/d,口服,对照组给一般保肝药治疗。结果治疗6个月时,治疗组ALT复常率58.8%,明显高于对照组(0%),P<0.05。ALT上升率治疗组明显低于对照组(13.3%与50.0%),P<0.01。总体效果,治疗组稳定或好于入组前状态者(85.33%),显著高于对照组(43.33%),P<0.01。结论百赛诺组在稳定肝功能、防止拉米夫定停药后病情复发方面有较好的作用。     

拉米夫定单独或联合应用治疗慢性乙型肝炎近期疗效观察

观察拉米夫定单独及联合应用治疗慢性乙型肝炎的疗效。随机选择慢性乙型肝炎病人 10 1例 ,其中单独服用拉米夫定组 57例 ( 10 0ｍｇ/ｄ) ,拉米夫定联合其它抗病毒药或免疫增强剂治疗 4 4例 (包括左旋咪唑涂布剂 2 0例 ,α干扰素 9例 ,抗乙型肝炎转移因子 9例 ,博尔泰力注射液 3例 ,泛昔洛韦 2例 ,日达仙 1例 )。结果表明 ,治疗后 12周ＡＬＴ复常率拉米夫定单独治疗组明显高于联合治疗组 (Ｐ <0 .0 0 1) ,但 2 4周、36周及 52周则无显著差异。ＨＢＶＤＮＡ阴转率 12周各为 68.4 %及 79.6% ,52周为71.4 %及 88.9% ,两组未见统计学差异。ＨＢｅ…     

丙型肝炎病毒基因分型的临床应用

丙型肝炎病毒（HCV）感染是输血后肝炎的主要病因之一，50％～70％的急性感染病人将转为慢性肝炎，其中20％的病人将导致肝硬化。目前已知HCV是单股正链RNA病毒，由于HCV复制时所依赖的多聚酶缺乏校对功能，加上为适应环境和逃避宿主免疫监视作用而易于发生突变，形成众多的基因分型。本文仅就有关HCV基因分型与临床应用的研究进展作一综述。一、HCV基因分型现状目前对HCV基因分型的方法多种多样，包括核昔酸序列分析、型特异性引物法、型特异性探针杂交法、限制性片段长度多态性分析和DNA免疫酶学试验等。各种方法在特异性和敏感…     

慢性HBV C基因启动子变异的检测

目的 了解慢性乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）Ｃ基因启动子变异的情况以及对病毒血清学的影响。方法 应用错配聚合酶链反应特异性扩增含有ＨＢＶ Ｃ基因启动子的片段,扩增产物用限制性内切酶Ｂｃｌ Ｉ酶切,琼脂糖凝胶电泳后,观察酶切后的限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）图谱,分析Ｃ基因启动子区段的核苷酸（ｎｔ）１７６２由碱基Ａ→Ｔ和（ｎｔ）１７６４碱基由Ｇ→Ａ的变异,并经直接测序分析证实ＲＦＬＰ结果。结果 １１０例慢     

单链构相多态性分析丙型肝炎病毒1b型准种及变异研究

目的 研究丙型肝炎病毒准种及其变异情况；同时探索准种变异规律，是否干扰素对准种具有选择作用。方法 选取５例慢性丙型肝炎患者阳性血清，ＰＣＲ法分别扩增５′Ｃ非编码区（５′ＮＣＲ）、高变区（ＨＶＲ１）、非结构蛋白５Ａ（ＮＳ５Ａ）部分片断，单链构相多态性（ＳＳＣＰ）法测定其准种数量，同时动态观察２３例丙型肝炎患者１ｂ型ＮＳ５Ａ准种变化情况，探讨是否具有对干扰素敏感性不同的准种及干扰素对准种是否具有选择作     

UBI疗法在病毒性肝炎患者中的应用

UBI(紫外线照射充氧血液回输)疗法可用于治疗多种疾病,我们于1992年将此疗法引入对病毒性肝炎治疗的综合方案之中,并做了系统观察,此前未见国内外有此类报告。本文总结了231例(急性23、慢性93、肝硬变115)762次的治疗情况,发现:1.UBI疗法对肝炎病情的好转有帮助。主要表现在症状消     

47例庚型肝炎病毒感染的临床分析

４７例庚型肝炎病毒感染的临床分析朱传琳金波杜宁姚家李力程云张建宗陈菊梅自１９９５年发现庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）以来，引起国际医学界广泛关注并开展大量研究，在病原学、流行病学、分子生物学及临床方面取得较大进展。我们对１９９６年６月份以来，３０２医院住院...     

慢性病毒性肝炎临床与病理的诊断标准

慢性病毒性肝炎在我国常见。1995年第5次全国传染病与寄生虫病学术会议修订的慢性病毒性肝炎的诊断标准(“95标准”)应用以来,解决了临床上的一些问题,但临床诊断与病理诊断仍存在较大差距,特别是对于慢性肝炎重度的漏诊率较高。我们拟从慢性病毒性肝炎的临床与病理相关性分析入手,研究973例慢性病毒性肝炎患者血清生化指标、症状与体征等多种因素与肝组织病理损伤程度的关系。 1 材料和方法 1.1 材料男816例(占83.9％),女157例(占16.1％);年龄0.5～66(平均25±13)岁。病原学诊断:乙型肝炎813例,丙型肝炎109例,乙丙重叠感染7例,病原不明44例。