螺旋链霉菌U-1941中PKSII型基因在淡青链霉菌tcmK变异株中的克隆(I)

利用螺旋霉素产生菌螺旋链霉菌(S trep tomy ces sp iramy ceticus U-1941)中发现的PK S II型基因,经测序和同源性比较证明在4174bp片段中含有PK S II型K S(K Sα)基因,该基因(pCG 4-K,aspA)由1229bp组成编码432个氨基酸,与产二素链霉菌A lpA和淡青链霉菌T cmK同源性分别为74.4%和69.7%。将含aspA基因的重组质粒pCG 4在四并菌素(tetracenom yc in C)产生菌(S.g laucescens GLA 4-26)tcmK基因缺陷型变异株中进行克隆,TLC分析表明转化子的发酵产物比对照株多一个明显的黄色斑点,该物质经分离、提纯后分析确定为一个含苯式结构的小分子化合物A S-5。     

尿苷二磷酸葡醛酸转移酶的代谢类型及影响因素

尿苷二磷酸葡醛酸转移酶 (UGT)是一类Ⅱ相代谢酶 ,能催化葡醛酸与其相应底物结合。该过程是机体的重要排泄途径之一。目前 ,有 15种人类UGT被确证有活性 ,而且对它们的底物选择性方面有了进一步认识 ,但UGT的酶学研究相对于细胞色素P4 5 0还比较落后 ,有待于进一步提高。     

BAP-SRC-1融合蛋白的表达及其在药物代谢酶调控研究中的应用

 目的获得活性表达的细菌碱性磷酸酶(bacterial alkaline phosphatase,BAP)基因和人甾体受体辅活化因子-1(steroid recep- tor coactivator-1,SRC-1)的融合蛋白,应用于辅活化因子与核受体的结合研究。方法从Escherichia coli JM83基因组和人肝总RNA中分别扩增获得BAP基因和SRC-1的186个氨基酸对应的基因序列(简称SRC186)。用重组技术,构建BAP-SRC186- pET28a融合基因表达载体,在Escherichia coli Rosetta(DE3)中,以IPTG低温诱导表达。以对硝基苯磷酸盐(p-nitrophenyl-phos- phate,PNPP)为底物进行活性测定。活性表达的BAP-SRC186融合蛋白被应用于辅活化因子与核受体的结合研究。结果获得可溶性融合蛋白BAP-SRC186。该融合蛋白的BAP比活为(0.176±0.013 4)μmol·min^-1·mg(pro)^-1 在利福平存在的情况下,BAP-SRC186能与孕烷X受体配体结合域(pregnane X receptor ligand binding domain,PXRLBD)发生利福平剂量依赖性的相互作用,作用强度通过BAP的显色反应可方便地检测结论BAP融合蛋白与核受体的结合研究为药物代谢酶调控的体外研究开辟了新的思路。     

谷胱甘肽硫-转移酶与疾病和化疗

 目的综述谷胱甘肽硫-转移酶(GSTs)的多态性与疾病发病的相关性以及GSTs基因突变对化疗效果的影响。方法对近年来此领域有代表性的文献进行整理、归纳。结果GSTs的多态性对疾病的发生,特别是恶性肿瘤的发生有较大的相关性;GSTs表达水平的升高可影响化疗效果,是引起化疗耐药的又一途径,利用GSTs逆转剂逆转化疗耐药是一种可考虑的方法。结论GSTs作为某些疾病早期发现的蛋白标记、用逆转剂逆转GSTs引起的化疗药物耐药以及实现化疗药物给药个体化尚需进行大量的多因素分析。     

喘息康对支气管哮喘豚鼠肺泡灌洗液IFN-γ、IL-5水平及肺组织MMP-9、TIMP-1的影响

目的：研究喘息康对哮喘豚鼠模型肺泡灌洗液（BALF）中IFN-γ、IL-5及肺组织中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）与其抑制剂（TIMP-1）的影响,探讨其治疗支气管哮喘的作用机制。方法：将40只豚鼠随机分组为正常对照组（A组）、哮喘模型组（B组）、喘息康中药组（C组）、地塞米松西药组（D组）,每组10只。采用卵白蛋白（OVA）腹腔注射致敏和雾化激发的方法建立豚鼠支气管哮喘模型,然后以不同的方法对哮喘豚鼠模型进行干预。采用ELISA方法检测每只豚鼠BALF中IFN-γ、IL-5和肺组织中MMP-9、TIMP-1的变化。结果：哮喘模型组与正常对照组相比,前者BALF中IFN-γ水平显著降低（P〈0.01）,而IL-5则显著升高（P〈0.01）,肺组织中MMP-9、TIMP-1含量及比值显著升高（P〈0.05～0.01）;喘息康中药组和地塞米松西药组与模型组相比,BALF中IFN-γ水平高于哮喘模型组（P〈0.01）,而IL-5则显著降低（P〈0.01）,肺组织中MMP-9、TIMP-1含量及比值显著降低（P〈0.05～0.01）。结论：喘息康可以通过促进哮喘豚鼠体内IFN-γ分泌和抑制IL-5表达,而降低支气管高反应性（BHR）;并可通过降低肺组织MMP-9和TIMP-1含量,调节二者比值,抑制支气管哮喘豚鼠气道重塑。     

手性药物的研究策略

近年来,药物手性的临床意义已引起了人们的注意.手性药物的开发已成为国际热点.世界正在开发的1200种新药有三分之一是手性药物.目前,使用的药物中有很大一部分为手性分子,但手性药物有的以外消旋体形式上市,有些以单一对映体上市.天然和半合成的手性药物绝大多数以单个对映体给药;相反,合成的手性药物中仅12%左右是以单个对映体给药[1].在临床应用中由于没有对手性药物各对映体的药效学或药动学行为的差异进行研究,常常将消旋体药物当作单一化合物来处理,由此得出的结论与疗效或不良反应的发生有时不一致,甚至会错误地指导临床用药.     

植物药与西药的药动学相互作用

 目的促进国内植物药与西药药动学相互作用研究,为中药现代化和临床合理用药服务。方法通过检索近3年文献,总结研究方法、相互作用机制和特点。结果研究方法主要包括整体动物试验、人体探药试验和体外试验。相互作用机制主要基于药物代谢酶和P-糖蛋白水平。植物药剂量、用药时间、方剂组成的加减、生药的不同提取方法和产地、西药同类药品的选用均可能影响相互作用的发生。体外试验结果可能不能代表体内真实情况。西药对植物药药动学影响报道较少。结论应警惕植物药与西药可能发生药动学相互作用,并加强这方面的研究。体外高通量代谢筛选和鸡尾酒体内探药试验值得大力提倡。     

N+-葡萄糖醛酸缀合反应的物种差异

目的综述N -葡萄糖醛酸缀合反应的物种差异.方法根据底物的结构分类,将脂肪叔胺、哌啶、哌嗪、吡啶、咪唑和三嗪的N -葡萄糖醛酸缀合反应在各物种间进行比较,并运用分子生物学的方法对此类反应物种差异的可能遗传学基础进行解释.结果 N -葡萄糖醛酸缀合反应具有明显的物种差异性,常被认为是高等灵长类所独有,但也有个别此类反应在低等实验动物中进行的报道.结论物种差异的研究对动物实验数据的正确挖掘解释十分重要.