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高效液相色谱法测定口服银杏制剂后兔血中槲皮素和山萘酚浓度 总被引:1,自引:1,他引:1
目的:建立分离、测定兔血浆中槲皮素和山萘酚浓度的高效液相色谱方法.方法:用外标法,血样用盐酸水解,乙醚提取,提取液30℃水浴氮气吹干,残留物用流动相溶解进样.采用YWG C18柱(250 mn×4.6 m,5μm),以0.01 mol·L-1磷酸盐缓冲液(pH2)-四氢呋喃-甲醇-异丙醇(60:15:10:15)为流动相,流速0.5 mL·min-1,紫外检测波长380 nm.结果:槲皮素和山萘酚在16.66~156.8μg·L-1范围内线性关系良好,r分别为0.991 2和0.994 1,槲皮素和山萘酚的回收率分别为101.8%和103.2%,日内及日间精密度小于8.4%和10.7%.测得血浆中槲皮素和山萘酚的定量限和检测限分别为16.7,4.2μg·L-1.结论:本法简便,准确,可用于兔血样中槲皮素和山萘酚浓度测定. 相似文献
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323.
基于SFV RNA复制子核酸疫苗pIRSFV-HN的构建及其体内外抑瘤作用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:构建基于塞姆利基森林病毒(Semliki forest virus,SFV)RNA复制子和新城疫病毒HN基因的核酸疫苗pIRSFV-HN,并探讨其体内外的抑瘤作用。方法:基于SFV RNA复制子和新城疫病毒HN基因构建核酸疫苗pIRSFV-HN,pIRSFV-HN转染人结肠癌细胞HCT-116,以Western blotting检测转染后HCT-116细胞HN的表达水平,以AO/EB双荧光染色检测肿瘤细胞的凋亡,以MTT法检测疫苗对HCT-116细胞增殖的抑制。构建C57BL/6小鼠右后肢皮下荷H22腹水瘤细胞模型,瘤体内注射pIRSFV-HN(共3次),检测该小鼠血清IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ水平和特异性CTL活性。结果:成功构建基于SFV RNA复制子和新城疫病毒HN基因的核酸疫苗pIRSFV-HN。结肠癌细胞HCT-116被疫苗转染后可有效表达HN蛋白,对照细胞则无表达;转染后HCT-116细胞出现凋亡的征象;该细胞的增殖受到明显抑制,最大抑制率达55.34%。移植瘤体内注射疫苗后,荷瘤小鼠血清IL-2、IFN-1水平显著升高(P〈0.05),其CTL活性也显著升高(P〈0.01)。结论:基于SFV RNA复制子和新城疫病毒HN基因的核酸疫苗pIRSFV-HN在体外可有效地抑制肿瘤细胞;在体内可促使免疫趋向Th1优势,提高其抑瘤免疫水平。 相似文献
324.