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人UGT1A3重组酶催化芹菜素葡醛酸结合反应 总被引:1,自引:1,他引:1
目的旨在了解人UGT1A3重组酶与芹菜素的有关代谢及其酶动力学参数,并阐述不同有机溶剂对酶动力学参数测定的影响。方法采用Bac-to-Bac系统表达人UGT1A3重组酶与芹菜素37℃共孵育,用HPLC法测定孵育液中剩余底物浓度,利用Lineweaver Burk法计算酶动力学参数,并进一步进行代谢物的确认。同时考察了用不同有机溶剂溶解底物对酶动力学参数测定的影响。结果采用Bac-to-Bac系统表达人UGT1A3重组酶,测得其催化芹菜素的Km为(28.88±2.47)μmol.L-1,Vmax为(224.19±21.11)nmol.m in-1.g-1,Vmax/Km为(7.75±0.29)mL.m in-1.g-1。不同有机溶剂对酶动力学参数测定无显著影响。结论芹菜素可被人UGT1A3重组酶催化,进行葡醛酸结合反应。 相似文献
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23.
24.
目的 建立美西律对映体在人血清白蛋白中的测定方法.方法 采用手性衍生化试剂2,3,4,6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖异硫氰酸酯(GITC)对美西律进行柱前手性衍生化.衍生产物以乙腈-0.01 mol·L-1 磷酸二氢钾(pH 4.5)缓冲液(1:1)为流动相,用C18色谱柱分离,以R-艾司洛尔为内标,流速为1.0 mL·min-1,检测波长为250 nm.结果 实验表明,R-美西律与S-美西律的分离度良好.日内、日间RSD均小于15%.美西律对映体在0.1~40.0 mg·L-1内呈线性关系,r=0.999 5.结论 该方法结果准确,重现性好,灵敏度高,可用于美西律对映体的蛋白结合研究. 相似文献
25.
目的:研究中国汉族人群S-美芬妥英4'-羟化代谢遗传多态性.方法:以美芬妥英为探针药物采用手性毛细管气相色谱法测定尿中S-/R-MP浓度比值, 对90名志愿者进行了表型分型测定,应用PCR技术对其中的26名志愿者进行了S-美芬妥英4'-羟化酶(CYP2C19)基因分析.结果:表型分析结果,11人属慢代谢者(PM),S/R比值0.95;基因分析结果,6人为野生型纯合子(wt/wt);10人为杂合子(wt/m1和wt/m2),9人为CYP2C19m1突变型纯合子(m1/m1),1人为两突变型杂合子(m1/m2).结论:表型分析与基因分析结果显示了很好的相关性,本实验测得慢代谢者的频发率为12.2%,与文献报道相符. 相似文献
26.
目的:考察佐米曲坦对大鼠肝细胞色素P450 CYP3A1/2的诱导是否由孕烷X受体(PXR)介导。方法:在构建的基于PXR的荧光素酶报告基因上,观察不同浓度佐米曲坦(10、50、100μmol.L^-1)对大鼠肝细胞色素P450 CYP3A1/2的诱导作用。以经典的诱导剂16α-氰基孕烯醇酮(PCN)作为阳性对照,空白溶剂(DMSO)作为阴性对照。结果:与阴性对照组相比,阳性对照组、佐米曲坦在100μmol.L^-1浓度时,对CYP3A1有明显的诱导作用,活性分别增加了1.93、1.96倍(P〈0.05);阳性对照组、佐米曲坦10μmol.L^-1、50μmol.L^-1浓度组对CYP3A2也有明显的诱导作用,其活性分别增加了2.51、2.10、1.63倍(P〈0.01、〈0.05)。结论:PXR通路是佐米曲坦诱导大鼠CYP3A1/2的一个重要途径。 相似文献
27.
本文测算了一组磺胺类药物的RP-HPLC和RP-TLC保留值(lgK、I和R_m),采用计算机进行回归分析,建立了反相色谱保留值与药代动力学参数(1g1/C,1g K_(AI)和1g1/a)的Hansch相关方程.结果表明,将反相色谱保留值引入药物代谢过程的定量构效关系研究是有益的. 相似文献
28.
冠状病毒(又称日冕病毒)可在动物身上引起疾病,也是人类呼吸道疾病的重要病原之一。现将冠状病毒所致人类呼吸道感染及其研究简述如下。【历史】早在本世纪三、四十年代,人们就从猪、牛、小鼠等动物体内分离到冠状病毒,发现其可致肝炎、禽类传染性支气管炎、脑炎和胃肠炎等疾病。直至六十年代中期,才首次 相似文献
29.
Caco-2细胞系及其在药物吸收、代谢中的应用 总被引:6,自引:0,他引:6
由于小肠的生理结构适用于药物吸收 ,所以口服给药是最广泛、最方便的给药途径之一 ,因此研究药物在肠道的吸收与代谢就显得十分必要。目前用于药物吸收的实验方法主要有 :在体肠回流法 ,肠襻法 ,分离肠粘膜法、外翻囊法等 [1 ]。由于这些方法存在采用动脉组织及其它一些局限性 ,近年来人们尝试使用人肠细胞培养系统来研究药物在肠道的吸收和代谢 ,以快速筛选口服药物。Caco-2细胞模型被认为是目前最好的体外吸收模型 ,可用于快速评估新药的细胞渗透性、阐明药物转运的途径、评价提高膜通透性的方法、确定被动扩散的药物最合适的理化性质和… 相似文献
30.
利用螺旋霉素产生菌螺旋链霉菌(Streptomyces spiramyceticus U-1941)中发现的PKSⅡ型基因,经测序和同源性比较证明在4174bp片段中含有PKSⅡ型KS(KSα)基因,该基因(pCG4-K,aspA)由1229bp组成编码432个氨基酸,与产二素链霉菌AlpA和淡青链霉菌TcmK同源性分别为74.4%和69.7%。将含aspA基因的重组质粒pCG4在四并菌素(tetracenomycin C)产生菌(S.glaucescens GLA4—26)tcmK基因缺陷型变异株中进行克隆,TLC分析表明转化子的发酵产物比对照株多一个明显的黄色斑点,该物质经分离、提纯后分析确定为一个含苯式结构的小分子化合物AS-5。 相似文献