成纤维细胞生长因子和胰岛素对小鼠软骨细胞增殖的影响

目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和胰岛素对小鼠原代软骨细胞的影响。方法: 在低血清培养基培养条件下进行小鼠原代软骨细胞培养, 采用WST1比色法和荧光染色法观察bFGF和胰岛素对软骨细胞增殖的影响。结果:原代软骨细胞在0.4%胎牛血清培养基培养条件下, 不同浓度的bFGF和胰岛素对软骨细胞的增殖有剂量相关性。形态学观察表明, bFGF和胰岛素不仅促进细胞增殖, 而且可使细胞分泌基质增多。结论:bFGF和胰岛素均能促进软骨细胞的增殖。     

鼻息肉组织中检测CD3和CD69的表达

目的　研究鼻息肉组织中T淋巴细胞表面标记CD3和早期活化标记CD69的表达,探讨人鼻息肉组织中T淋巴细胞的浸润和活化状况。方法　采用流式细胞术检测 21例鼻息肉患者鼻息肉组织、外周血中T淋巴细胞CD3、CD69的表达,并与健康人下鼻甲黏膜及外周血进行比较。结果鼻息肉组织中有大量T淋巴细胞浸润[ (39.65±2.08)% ];鼻息肉组织及患者外周血T淋巴细胞均表达CD69分子,其水平分别占T淋巴细胞总量的 (36.96±2.50)%和 (4.66±0.18)%,在用多克隆刺激剂短期(5h)刺激后,两者CD69的表达均增加[分别为(59.88±2.59)%、(92.76±0.55)% ];而在健康人下鼻甲黏膜中几乎未见T淋巴细胞,健康人外周血T淋巴细胞在刺激前CD69的表达较低[ (1.82±0.25)% ],但在刺激后几乎全部活化 [ (98.54±0 28)% ]。结论　鼻息肉组织中有大量T淋巴细胞浸润且高度表达CD69分子,提示鼻息肉组织中T淋巴细胞处于异常免疫活化状态。     

指纹图谱结合网络药理学及实验验证的黄连膏治疗特应性皮炎质量标志物（Q-marker）预测

目的：建立黄连膏的指纹图谱,结合网络药理学和实验验证分析其治疗特应性皮炎（Atopic dermatitis,AD的机制,预测其潜在的质量标志物（Q-Marker）,为其质量控制和临床应用提供依据。方法：建立黄连膏的HPLC指纹图谱,对共有峰进行指认和归属,应用网络药理学筛选和分析黄连膏相关成分的作用靶点和通路,预测其抗AD潜在的Q-Marker;建立1-氯-2,4-二硝基苯（DNCB）诱导的AD小鼠模型,对预测结果进行验证。结果：指纹图谱共标定23个共有峰,并指认出5个色谱峰;将5个成分经网络药理学分析,筛选出EGFR、IL-10、PTGS2、VCAM1、STAT3、ICAM1等作用靶点,癌症的途径、脂质与动脉粥样硬化、TNF信号通路、细胞凋亡等关键信号通路,以“Q-Marker五原则”为核心,结合指纹图谱及网络药理学分析结果,初步预测小檗碱、姜黄素、藁本内酯、芝麻素、芝麻酚为黄连膏潜在的Q-Marker。动物实验验证,黄连膏能有效改善AD模型小鼠皮损(p<0.001),减少抓挠次数(p<0.001）,降低血清炎症因子IL-6,IFN-γ,TNF-α水平(p<0.0...     

基于声卡声音信号分析仪的设计

本文介绍声卡的声音信号分析仪的设计实现方案,重点介绍利用NI公司的LabVIEW软件平台来实现声卡声音信号的采集、分析和回放的方法.     

圆偏振光与线偏振光对心肌细胞外基质组织学分析的一致性研究：Bland-Altman分析

【目的】研究圆偏振光和线偏振光结合苦味酸天狼猩红染色，对心肌细胞外基质组织学分析结果的一致性。【方法】对心肌梗死大鼠的心脏组织进行苦味酸天狼猩红染色后，固定其它光学参数，在同一视野分别使用圆偏振光和线偏振光获取图像（共随机获取40个视野）并进行图像分析，计算红色、绿色胶原纤维的面积、胶原容积分数以及胶原平均灰度等反映梗死心脏组织修复过程的组织学指标；采用Bland—Altman分析以及Pearson相关分析，对两种光学体系下测得的上述指标的一致性进行分析。【结果】通过Pearson相关分析显示两种光学系统中测得的红色纤维面积（r^2=0．9684，P〈0．01）、绿色纤维面积（r^2=0．8183，P〈0．01）、胶原容积分数（r^2=0．9595，P〈0．01）和胶原平均灰度（r^2=0．6188，P〈0．01）均有很高的相关性。然而Bland—Altman分析显示，至少30％以上的红色胶原纤维、50％绿色胶原纤维成分和30％的总细胞外基质成分在线偏振光中无法显示，并且线偏振光系统检测的偏倚随着均数的增加而增大。【结论】线偏振光结合天狼猩红染色在检测细胞外基质的沉积量、平均灰度方面，敏感性显著低于圆偏振光。在细胞外基质的相关研究中，应该尽量避免使用线偏振光。     

心肌梗死大鼠心室组织Smads蛋白表达及卡托普利的干预作用

[目的]研究心肌梗死（myocardial infarction,MI）大鼠心室组织不同区域中Smads蛋白的表达水平及血管紧张素转化酶抑制剂（angiotensin coveroting enzyme inhibitor,ACE I）对Smads表达的影响。[方法]采用大鼠心肌梗死模型,随机分为卡托普利（captopril,Cap）组、MI对照组（分为14 d和21 d两组）和假手术组（sham）。对大鼠梗死区、室间隔和右心室中Smad蛋白的表达水平行免疫组化分析。[结果]4组大鼠梗死区Smad2/3和Smad4的表达以Cap组最低,21 dMI对照组最高,Smad7的表达呈现Cap组最低而14 dMI对照组最高的趋势;非梗死区Smad2/3和Smad4的表达Cap组最低,MI对照组最高,而Smad7的表达Cap组最低,14 dMI对照组最高;与14 dMI对照组比较,21 dMI对照组Smad2/3、Smad4在梗死区和非梗死区的表达均增高,而Smad7在两个区域的表达均降低（P〈0.05）。[结论]MI后早期,R-Smads和Co-Smads表达增高能够促进梗死区的修复,但持续增高最终会导致心肌纤维化。ACEI减轻梗死后心肌纤维化的作用在一定程度上与Smad2/3和Smad4的下调有关。     

不同病程尖锐湿疣患者外周血Th细胞亚群的研究

目的 从辅助性T细胞(Th)极化情况,探讨不同病程尖锐湿疣患者的细胞免疫状态。方法 取肝素抗凝血,用密度梯度离心法分离出血浆和外周血单一核细胞(PBMC)进行细胞培养和免疫荧光染色:PHA和自身血浆刺激PBMC诱导T细胞极化,72h后收获细胞,分别标记抗CD4-PE与抗CCR5-FITC和抗CD4-FITC与抗CCR3-PE,最后利用流式细胞仪对标记细胞进行分析。结果 尖锐湿疣患者中,短病程组与长病程组Th1/Th2极化细胞百分率分别为(25.82±2.22)%/(14.80±1.14)%与(12.20±1.37)%/(13.74±0.99)%,两组极化细胞百分率分别与正常对照组比较差异均有显著性(P<0.05),短病程组Th1/Th2的比值为1.75±0.17,而长病程组为0.89±0.11。结论 短病程尖锐湿疣患者机体呈现Th1型反应,而长病程者则以Th2型反应为主,存在Th1型反应向Th2型反应切换的现象。     

移植活化富血小板血浆上清液促进实验性大鼠心肌梗死后组织修复

目的检测移植活化富血小板血浆上清液对心肌梗死后组织修复过程的影响。方法105只雄性Wistar大鼠随机分为富血小板组、贫血小板组和假手术组。经腹主动脉取血后采用二次离心法和凝血酶激活制作活化富血小板血浆上清液和活化贫血小板血浆上清液。采用酶联免疫吸附试验测定活化富血小板血浆上清液和活化贫血小板血浆上清液中血管内皮生长因子的浓度。建立急性心肌梗死模型即刻,于梗死周边注射活化富血小板血浆上清液(富血小板组)和活化贫血小板血浆上清液(贫血小板组)。心肌梗死后7d和28d处死动物,取出心脏行离体心脏压力-容积曲线测定、天狼猩红染色和荧光检测。结果富血小板组心肌梗死后28d离体心脏压力-容积曲线较贫血小板组左移;梗死周边区注射活化富血小板血浆上清液可在一定程度上减小梗死面积、增加梗死游离壁厚度并缓解非梗死区肥厚,同时促使心肌梗死区小动脉和毛细血管的新生。结论移植活化富血小板血浆上清液可加速心肌梗死后愈合并改善心室重塑。     

人工合成相关寡肽抑制poly I:C诱发性流产的作用

探讨寡肽蛋-苏-精-缬(MTRV)是否具有抗多聚次黄苷酸-胞苷酸(poly I:C)诱发的小鼠胚胎吸收的作用及其免疫机制。给予异基因妊娠BALB/c×C57BL/6小鼠腹腔注射poly I:C建立胚胎吸收模型;在孕期多个时点腹腔注射MTRV,观察其对胚胎吸收率的影响,并采用四色流式细胞术检测妊娠9.5 d和13.5 d外周血和胎盘各种免疫活性细胞的百分率。结果显示,寡肽MTRV不能显著改变poly I:C所引起的小鼠胎盘多种免疫活性细胞相对数量的增多,但是对poly I:C增高CD45+IL-12+细胞百分率的作用具有显著抑制,并能显著降低poly I:C所引起的孕13.5d胚胎吸收率的增高。寡肽MTRV可调节母-胎界面局部免疫活性细胞的功能状态,从而抑制poly I:C诱发的小鼠胚胎吸收。     

趋化因子对调节性NK细胞归巢的诱导作用

调节性T细胞和调节性NK细胞都可能在维持妊娠方面发挥关键作用。研究显示,同种异基因妊娠非肥胖型糖尿病(NOD)小鼠胚胎丢失率显著增高,而注射抗唾液酸神经节苷脂清除其残存的NK细胞,可使胚胎丢失率进一步增高。相反,过继性输注来源于正常小鼠的CD49b+CD25+NK细胞可显著降低胚胎丢失率。检测了CXCL12的特异性受体CXCR4在NK细胞表面的表达模式,并采用体外和体内迁移实验研究了NK细胞的迁移规律。由于以往研究证实小鼠胎盘滋养层细胞表达CXCL12,研究结果提示:孕期动员子宫外表达CXCR4的CD49b+CD25+NK细胞向妊娠子宫内迁移,可能对于调节母胎免疫耐受具有重要意义。