Maspin、P53、Skp2蛋白在结直肠肿瘤中的表达及其意义

目的:研究maspin、p53及skp2蛋白在结直肠肿瘤组织中的表达及临床病理意义.方法:采用免疫组织化学法检测maspin、p53及skp2在50例结直肠腺癌,20例结直肠腺瘤、20例正常结直肠粘膜组织中的表达.结果:maspin蛋白在结直肠腺瘤和正常结直肠粘膜组织中的表达均高于结直肠腺癌(p<0.05);无淋巴结转移组maspin表达率高于淋巴结转移组(p<0.05);Dukes C,D期结直肠癌组织maspin表达率低于Dukes A、B期(p<0.05).在结直肠腺癌及腺瘤中maspin与p53的表达均呈负相关(P<0.01),然而在skp2与maspin、skp2与p53之间没有发现相关性(P>O.05).结论 :maspin的表达可能受p53基因的调控.联合检测maspin、p53及skp2在结直肠肿瘤中表达水平,对判定结直肠癌恶性程度及预后可能具有重要参考价值.     

皮肤老化过程中角质形成细胞的比较蛋白质组分析与鉴定

目的 筛选出表皮角质形成细胞中与皮肤老化相关的蛋白.方法 从角质形成细胞(KC)中提取蛋白质,并进行2-DE分离,采用MALDI-TOF质谱分析及数据库查询;并在蛋白质水平进行Western-blotting验证.结果 成功鉴定了21个差异表达蛋白,发现P21既随年龄增长高表达,也在同一年龄段曝光组高表达;而annexin A2的表达降低;在同一年龄段热休克蛋白质(HSP)27和HSP70、丝裂源激活的蛋白酶(MAPK)、Keratin,trpeⅡ cyloskeletal 80(K2C80)在曝光部位高表达,而actin cytoplasmic 1(ACTB)在非曝光部位高表达.并与蛋白质水平进行的验证结果一致.结论 所鉴定的蛋白质与皮肤自然老化和(或)光老化关系密切,但其确切功能有待进一步研究.     

孕鼠肝内胆汁淤积症对母鼠和胎鼠心脏的影响

目的探讨孕鼠肝内胆汁淤积症对母鼠和胎鼠心脏的影响。方法应用雌、孕激素建立妊娠肝内胆汁淤积大鼠模型,光镜和电镜观察母鼠和胎鼠心脏的病理改变。结果（1）胆淤组和对照组比较,孕鼠血清丙氨酸转氨酶（ALT）、门冬氨酸转氨酶（AST）、总胆汁酸（TBA）的差异有显著性（P〈0．01）。（2）胆淤组孕鼠肝脏光镜下见部分肝细胞有颗粒样变性和空泡变性,电镜下见肝组织中毛细胆管扩张,毛细胆管及肝细胞内见高电子致密物沉积。（3）胆淤组孕鼠胎盘光镜下见部分滋养细胞颗粒样变性和空泡变性。（4）胆淤组孕鼠心脏光镜下见心肌组织中局灶性心肌细胞颗粒样变性。（5）胆淤组胎鼠心脏光镜下见心肌组织中心肌细胞广泛空泡变性;电镜下见胎鼠心肌细胞内高电子致密物沉积,部分肌丝断裂,肌节模糊,细胞内线粒体水肿,脱髓鞘样改变。结论孕鼠肝内胆汁淤积症时高胆汁酸血症对母鼠和胎鼠心肌细胞均有明显的毒性作用,尤其以胎鼠心肌细胞病变更为严重。     

MUC2反义核酸对胃癌细胞蛋白水解酶表达的影响

目的 探讨MUC2反义脱氧寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)抑制人胃癌细胞株SGC7901黏蛋白MUC2的表达及其对癌细胞蛋白水解酶表达的影响.方法 采用脂质体作为载体,将载体与MUC2基因的串联重复区互补,经硫代磷酸修饰的反义寡核苷酸(ASODN)导入MUC2蛋白高表达的胃癌细胞株SGC7901,采用RT-PCR、流式细胞仪、免疫组织化学等方法检测MUC2 ASODN对胃癌细胞凋亡和蛋白水解酶的表达.结果 RT-PCR结果显示,SGC7901细胞转染MUC2 ASODN 48 h后,MUC2的mRNA表达与对照组相比明显降低(P＜0.01).流式细胞仪分析MUC2 ASODN处理SGC7901细胞48 h后,G0/G1期细胞百分比下降,S期细胞百分比明显增加,且能诱导细胞凋亡,凋亡细胞占4.38%,与对照组比较(P＜0.01).免疫组化S-P法检测转染MUC2 ASODN胃癌细胞、组织蛋白酶D、MMP-2表达显著下降(P＜0.05).结论 MUC2可促进癌细胞产生蛋白水解酶,使用人工合成MUC2 ASODN在体外能有效抑制胃癌细胞株SGC7901蛋白水解酶的表达,并能诱导凋亡.