大肠癌组织中Skp2、P27kip1蛋白的表达及其临床意义

 目的 了解Skp2和P27kip1蛋白在大肠癌组织中的表达并探讨其与临床病理特征的关系.方法 采用免疫组化法检测正常大肠黏膜、大肠腺瘤性息肉及大肠癌组织中Skp2、P27kip1蛋白表达情况,分析与临床病理参数的关系.结果 从正常大肠黏膜、大肠腺瘤性息肉、大肠癌中,Skp2表达逐渐增强,P27kip1表达逐渐减弱;随肿瘤细胞分化程度降低、浸润程度加深、病理分期延迟及伴有淋巴结的转移,P27kip1表达率降低,Skp2表达率升高(P＜0.05);二者的表达均与大肠癌患者的年龄、性别无关(P＞0.05).大肠癌组织中Skp2与P27kip1表达呈显著负相关性(r=-0.747,P＜0.01).结论 大肠癌中Skp2和P27kip1分别扮演了原癌基因和抑癌基因蛋白的作用;过表达的Skp2可能通过泛素-蛋白酶体途径,对细胞周期蛋白激酶抑制剂P27kip1的降解而共同参与大肠癌的发生和发展;检测二者的表达可为判断大肠癌恶性进程和预后提供重要参考.     

转染maspin cDNA在胃癌细胞中的表达及其对uPA和uPAR表达的影响

目的 研究转染maspin cDNA在胃癌细胞中的表达及其对uPA和uPAR表达的影响,探讨maspin基因抑制胃癌浸润转移的机制.方法 构建 maspin/PCR2.1表达载体,转染胃癌细胞株MKN28和SGC7901,用RT-PCR和Western blot检测maspin基因,uPA和uPAR表达的变化.结果 经酶切证实,得到正向插入的真核表达质粒maspin/PCR2.1.成功转染到MKN28和SGC7901细胞中并表达,uPA和uPAR的mRNA和蛋白表达均降低.结论 成功构建了maspin/PCR2.1表达载体,maspin基因可在靶细胞表达,并能抑制uPA和uPAR的表达.     

MASPIN真核表达载体的构建及其对胃癌细胞株SGC7901增殖的影响

目的 构建MASPIN真核表达载体,分析MASPIN过表达对胃腺癌细胞株SGC7901的影响.方法 PCR扩增MASPIN基因全长,用载体PCR2.1构建重组质粒,转染至胃癌细胞株SGC7901.RT-PCR、Western blot检测MASPIN基因表达变化,MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪(FCM)分析细胞周期,观察过表达MASPIN对SGC7901细胞株的影响.结果 成功构建MASPIN/PCR2.1表达载体并转染至胃癌细胞株SGC7901,转染上调了SGC7901细胞株MASPIN在mRNA、蛋白水平的表达.转染MASPIN的SGC7901细胞增殖率随时间而减慢,第24、48、72小时的细胞增殖率分别为93.07%、81.97%、66.5%,明显低于转染空载体组(95.98%、95.79%、95.59%,P<0.05).与转染空载体组相比,过表达MASPIN的SGC7901细胞株在G0/G1期所占比例明显提高(70.3% vs 55.6%),S期细胞减少(19.8% vs 34.9%,P<0.05).结论 成功构建MASPIN/PCR2.1表达载体,过表达MASPIN 可抑制SGC7901细胞株的增殖.     

多药耐药相关蛋白和肺耐药蛋白在胃癌组织中的表达

目的　探讨多药耐药相关蛋白 (MRP)和肺耐药蛋白 (LRP)在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法　应用免疫组化S -P法检测 90例胃癌组织和 3 0例正常胃黏膜中MRP和LRP的表达情况。结果　 90例胃癌组织中的MRP、LRP阳性表达率分别为 92 .2 %和 93 .3 % ,均高于正常胃黏膜的阳性表达率 (P <0 .0 5 ) ,在高中分化腺癌中的阳性表达率高于低分化腺癌和黏液癌 (P <0 .0 5 ) ,不同浸润程度及是否有淋巴结转移者的阳性表达率相互比较无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论　MRP、LRP在胃癌组织中均呈高表达 ,均在胃癌原发性多药耐药中起重要作用     

Skp2、c-Myc和P27kip1蛋白在大肠癌组织中的表达及相关性研究

目的：探讨Skp2、c-Myc和P27^kip1蛋白在大肠癌组织中表达的意义以及相关性。方法：采用免疫组化SP法检测20例正常大肠粘膜、20例大肠腺瘤性息肉及60例大肠癌组织中skp2、c-Myc和P27^kip1蛋白表达情况，并分析与临床病理参数之间的关系，以及Skp2与c-Myc和P27^kip1蛋白表达的相关性分析。结果：Skp2、c-Myc和P27^kip1蛋白在大肠癌组织中阳性表达率分别为71．67％、66．67％和21．67％。随肿瘤细胞分化程度降低、浸润深度加深、病理分期延迟及伴有淋巴结的转移，P27^kip1阳性表达率逐渐降低，Skp2阳性表达率逐渐升高。c-Myc过表达与浸润深度加深、病理分期延迟及伴有淋巴结的转移有关。三者的阳性表达率均与大肠癌患者的年龄和性别无关。大肠癌组织中Skp2与P27^kip1蛋白表达呈负相关，Skp2与c-Myc蛋白表达呈正相关。结论：从正常大肠粘膜-大肠腺瘤性息肉-大肠癌过程中，Skp2、c-Myc和P27^kip1蛋白表达发生相应变化，均参与大肠癌的发生和发展，其蛋白的检测可为判断大肠癌恶性进程和预后提供重要参考，同时也为大肠癌的靶向治疗提供理论依据。     

大肠腺瘤MUC5AC、bc1-2和P53蛋白的表达及其意义

目的 :研究MUC5AC、bc1 2和P5 3蛋白在人大肠腺瘤中的表达及其与大肠腺瘤癌变的关系。方法 :应用免疫组化SP法检测MUC5AC、bc1 2和P5 3蛋白在人大肠腺瘤中的表达情况。结果 :①MUC5AC、bc1 2和P5 3在直径较大的腺瘤和绒毛状腺瘤中表达较高 ,阳性率分别为 6 8 4 %、6 8 4 %、34 2 %和 6 6 7%、6 8 8%、4 1 6 %。②轻、中度不典型增生的大肠腺瘤中MUC5AC的阳性率分别为 73 7%和 76 9% ,均显著高于重度不典型增生性腺瘤 ,后者阳性率为 2 6 7% (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ;bc1 2在轻、中度不典型增生腺瘤的阳性率也高于重度不典型增生的腺瘤 ,阳性率分别为 6 8 4 %、73 1%和 4 6 7% ;但P5 3在轻、中度不典型增生腺瘤的阳性率低于重度不典型增生腺瘤 ,阳性率分别为 2 6 3%、38 5 %和 4 0 0 %。③大肠腺癌MUC5AC、bc1 2的阳性率下降为 18 2 %和 18 2 % ,而P5 3阳性率上升至 6 3 6 %。结论 :大肠腺瘤瘤细胞出现胃粘膜上皮分化而表达MUC5AC。MUC5AC、bc1 2异常表达是大肠腺瘤癌变的早期事件 ,P5 3基因突变可能降低bc1 2的表达从而在大肠癌进展过程中发挥重要作用     

三种粘蛋白在胃癌组织中表达及其临床意义

目的 研究粘蛋白（MUC1，MUC2，MUC5AC）在胃癌组织中表达及它们与临床病理学行为之间的关系。方法 应用免疫组化S－P法检测94例原发性的胃癌组织标本中MUC1，MUC2，MUC5AC在胃癌组织中的表达。结果 1.MUC1的阳性表达率为82％，不同组织学之间的表达有明显差异（P＜0.05)，在中高分化管状腺癌中表达最强，表达程度与病人年龄、淋巴结有无转移及肿瘤大小密切相关（P＜0.05)；2.MUC2表达的阳性率为84%，不同组织学类型肿瘤组织中的表达有显著性差异（P＜0.05)，在粘液腺癌中表达最强100％（7／7）；3.MUC5的阳性率为40％（38／94）,除性别之间存在差异外，与其它的临床资料无关。4.相关分析发现MUC1的表达与MUC2的表达呈正相关。结论 1、MUC1在不同的组织学类型的胃癌中表达不同，在中高分化腺癌中最高，并与淋巴结转移、肿瘤大小有关；2.MUC2在不同的组织学类型的胃癌中表达不同，粘液腺癌中表达最强，可作为研究粘液腺癌的较好指标；3.MUC5AC在胃癌组织中的表达下降，可作为研究胃癌发生、进展的较好指标。4.MUC1和MUC2之间可能有协同作用。     

高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ在不同分化胃癌细胞和组织中的差异表达及意义

目的: 分析高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ(GMⅡ)在不同分化人胃癌细胞系和胃癌组织中的差异表达,以探讨GMⅡ在胃癌发生发展中的作用。方法: 收集38例胃腺癌及30例癌旁正常胃黏膜组织,体外培养3株不同分化胃癌细胞系(高分化MKN-28、中分化SGC-7901、低分化BGC-823)和永生化正常胃黏膜上皮细胞系(GES-1),分别应用RT-PCR、免疫组化和Western Blotting检测GMⅡmRNA和蛋白的表达。结果: GMⅡ阳性表达定位于胞浆,其在正常胃粘膜组织及高、中、低分化胃癌组织中的阳性表达率分别为53% (16/30)、 63%(5/8)、83%(15/18)和100%(12/12),各组间差异显著(P<0.05)。细胞爬片显示GMⅡ在正常胃黏膜上皮细胞系和高、中、低分化胃癌细胞系中的表达逐渐增强。与正常胃黏膜上皮细胞系GES-1相比,3种胃癌细胞系MKN-28、SGC-7901、BGC-823中GMⅡmRNA及蛋白表达水平显著增加(P<0.05),且GMⅡ在低分化胃癌细胞系BGC-823中表达最高,而在高分化胃癌细胞系MKN-28中表达最低。与正常胃黏膜组织相比,高、中、低分化胃癌组织中GMⅡmRNA及蛋白表达水平亦显著增加(P<0.05),且GMⅡ表达水平在高分化胃癌组织中最低,而在低分化胃癌组织中最高。结论: GMⅡ参与了胃癌的发生和发展, 其表达水平与胃癌低分化程度更密切相关。