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81.
目的观察SR-B1介导HDL诱导内皮细胞PGI2生成的信号激活途径。方法分别转染pcDNA3.1(-)-hSR-B1重组表达质粒或SR-B1 siRNA48 h后,30 mg/L HDL孵育24 h;30 mg/L apoA1与ECV304内皮细胞共孵育24 h;分别用25μmol/L PI3K特异性抑制剂LY294002或50μmol/L eNOS特异性抑制剂L-NAME预处理3 h后,30 mg/L HDL孵育24 h。空白组作为阴性对照,30 mg/L HDL处理组为阳性对照,RT-PCR和/(或)Western blot检测PGIS、COX-2、CREB及磷酸化CREB的表达;免疫细胞化学法检测内皮细胞中COX-2蛋白的表达;ELISA法检测培养液中6-keto-PGF1α的生成。结果不管是mRNA水平还是蛋白水平,在过表达SR-B1后,HDL均不能显著上调COX-2的表达,然而,有趣地是siRNA沉默SR-B1后,可见HDL诱导内皮细胞COX-2的表达明显减少,且免疫细胞化学检测能得到相似的结果。30 mg/L apoA1孵育内皮细胞24 h后,COX-2表达亦出现增加。但是,不管是HDL单独处理还... 相似文献
82.
目的研究HDL通过1-磷酸鞘鞍醇受体途径上调COX-2表达的细胞内信号机制。方法培养人脐静脉内皮细胞,HDL不同时间和浓度处理,qPCR和WB检测COX-2、CREB和Sphk2表达情况。人脐静脉内皮细胞转染SiRNASphk2后,qPCR和WB检测HDL对COX-2表达情况。人脐静脉内皮细胞用采用JTE(抑制S1P2)、PTX(抑制Gi/o)、SB203580(抑制p38MAPK)、Stau-rosporine(抑制PKC)及U0126(抑制ERK1/2)抑制剂处理后,qPCR和WB检测HDL对COX-2的表达情况。免疫共沉淀检测p-CREB和Sphk2结合情况,用激光共聚焦进行定位观察。结果 HDL呈时间和剂量上调COX-2、SphK2表达及CREB磷酸化,转染SphK2siRNA后COX-2表达水平下调;采用JTE(抑制S1P2),SB203580(抑制P38MAPK),Staurosporine(抑制PKC),U0126(抑制ERK1/2)抑制剂处理后,HDL对COX-2的上调作用明显抑制;免疫共沉淀和激光共聚焦显示p-CREB和SphK2结合。结论 HDL通过S1P2-G i/o-PKC(P38MA... 相似文献
83.
84.
85.
目的 建立猪动脉粥样硬化(AS)模型,探讨该模型中LOX-1表达的变化.方法 将10头广西巴马小型猪分别喂正常(CD)和高脂、高糖、高胆同醇(HFSCD)饲料,每月末测定血脂水半.第5个月末处死动物,采用苏丹Ⅳ检测动脉粥样斑块病变;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Westem Blot印迹分别检测主动脉组织中LOX-1的mRNA和蛋白质表达.结果 与CD组比较,HFSCD组血浆甘油三酯、高密度脂蛋白胆同醇(HDI-C)和总胆同醇水平异常升高;动脉有明显的脂质条纹及斑块;动脉粥样硬化小型猪主动脉组织的LOX-1的mRNA及蛋白质的表达均上=调(P<0.05).结论 高脂、高糖、高胆同醇饲料喂养小型猪可建立As动物模型;AS小型猪主动脉组织的LOX-1表达上调. 相似文献
86.
流行病学调查显示,动脉粥样硬化性疾病(动脉粥样硬化病变引发的重要器官血液供应障碍导致的器官功能紊乱)严重威胁着人类的健康,在发达国家被称为“头号杀手”,是世界范围的主要死亡原因。 相似文献
87.
高密度脂蛋白2和高密度脂蛋白3对THP-1巨噬细胞脂质蓄积及过氧化体增殖物激活型受体γ和CD36表达的影响 总被引:4,自引:1,他引:4
为探讨高密度脂蛋白2和高密度脂蛋白3对THP-1巨噬细胞过氧化体增殖物激活型受体γ和CD36表达及脂质蓄积的影响。取新鲜抗凝血浆,用超速离心术进行密度梯度离心,收集低密度脂蛋白、高密度脂蛋白2和3。将氧化型低密度脂蛋白分别与高密度脂蛋白2和3共孵育THP-1巨噬细胞,用油红O染色及高效液相分析法观测细胞内脂质蓄积程度;用逆转录聚合酶链反应检测CD36和过氧化体增殖物激活型受体γ mRNA的表达:用Westem blotting检测CD36和过氧化体增殖物激活型受体γ蛋白的表达。结果发现,与单独用氧化型低密度脂蛋白和THP-1孵育相比,用高密度脂蛋白2、高密度脂蛋白3分别与氧化型低密度脂蛋白共孵育THP-1可使细胞内脂质蓄积明显减少,过氧化体增殖物激活型受体γ mRNA及蛋白表达上调,CD36 mRNA及蛋白表达下调。而高密度脂蛋白3比高密度脂蛋白2作用更明显。结果提示,高密度脂蛋白2和3对氧化型低密度脂蛋白诱导THP-1细胞脂质蓄积有显著抑制作用,而高密度脂蛋白3的作用更强。其机制与高密度脂蛋白可以增强过氧化体增殖物激活型受体γ mRNA和蛋白表达上调及过氧化体增殖物激活型受体γ磷酸化,进而抑制过氧化体增殖物激活型受体γ的应答基因CD36 mRNA及蛋白表达有关。 相似文献
88.
三磷酸腺苷结合盒转运体A1在泡沫细胞胆固醇流出中的作用 总被引:14,自引:5,他引:14
以THB-1细胞源泡沫细胞为研究对象,观察三磷酸腺苷结合盒转运体A1在单核-巨噬细胞源泡沫细胞胆固醇流出中的作用。实验采用流式细胞术检测的方法,来判断三磷酸腺苷结合盒转运体A1激动荆22(R)-羟基胆固醇和抑制剂4,4-二异硫氰酸二丙乙烯2,2-二磺酸(4,4’-diisothiocyanostilbene-2,2’-disulfonic acid,DIDS)对THP-1细胞源泡沫细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1表达的影响。实验结果发现,22(R)-羟基胆固醇作用THP-l细胞源泡沫细胞不同时间后,能明显增加细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1的蛋白表达,流式细胞术检测三磷酸腺苷结合盒转运体A1表达的平均荧光强度从0h的31.1增加到24h的45.2;而DIDS作用THP-1细胞源泡沫细胞不同时间后,能明显降低细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1的蛋白表达,平均荧光强度从0h的29.4降低到24h的10.4。胆固醇流出实验发现,22(R)-羟基胆固醇作用THP-1细胞源泡沫细胞不同时问后,能明显增加细胞胆固醇流出:而DIDS作用THP-1细胞源泡沫细胞不同时间后,能明显降低细胞胆固醇流出。这些结果表明,三磷酸腺苷结合盒转运体A1在THP-1细胞源泡沫细胞胆固醇流出中起着重要的作用。 相似文献
89.
90.
目的 对1959—2020年米易县麻风病流行特点及其畸残影响因素进行分析,为下一步指导麻风病防治提供依据。方法 收集1959—2020年米易县麻风病病例防治专项资料、统计年报表、麻风病个人档案资料、《米易县麻风志》、《米易县康复院志》、《米易年鉴》和全国麻风病防治管理信息系统(LEPMIS)的信息,使用SPSS 23.0软件对病例的一般情况和治疗分型、诊断分型、性别、年龄及职业等有关因素进行卡方检验和多因素Logistic回归分析。结果 1959—2020年米易县共报告麻风病病例620例,年均发病率以1959—1968年最高,达23.25/10万;多菌型病例占51.13%,诊断分型多为TT型(39.52%)和LL型(37.10%);2级畸残率为34.19%;男性445例(71.77%);职业以农民(91.77%)为主,汉族(85.97%)多于彝族,文盲或半文盲占72.26%。卡方检验结果显示畸残的影响因素包括延迟期长短(χ^(2)=33.958,P<0.001)、发病年龄(χ^(2)=123.157,P<0.001)、确诊时反应程度(χ^(2)=99.856,P<0.001),将上述变量引入二元Logistic回归,结果提示畸残的影响因素包括诊断延迟2年以上(OR=2.217,95%CI:1.482~3.318)、确诊时有麻风反应(OR=4.477,95%CI:1.310~15.303)以及不明是否有反应(OR=33.32,95%CI:14.289~77.702)。结论 导致麻风病患者发生畸残的因素较为复杂,主要因素有延迟期长短和确诊时反应程度等。米易县麻风病防治工作取得了显著成效,但今后一段时期的工作重点仍需坚持早发现、早诊断、早治疗的防治策略,积极开展线索调查和走访入户工作,加强对皮肤科和乡村医生的培训,开展可疑症状监测和健康教育。 相似文献