烟雾暴露大鼠气道胰岛素样生长因子1及骨桥蛋白的表达变化

目的观察烟雾暴露与戒烟大鼠气道胰岛素样生长因子1(IGF-1)与骨桥蛋白(OPN)的表达变化,探讨烟雾暴露大鼠气道损伤的机制。方法将雄性SD大鼠40只随机分为5组:对照组(C组)、烟雾暴露1个月组(S1组)、烟雾暴露1个月及戒烟1个月组(Q1组)、烟雾暴露3个月组(S2组),烟雾暴露3个月及戒烟1个月组(Q2组),HE染色观察肺组织病理学改变;免疫组化染色检测IGF-1及OPN蛋白在气道的表达;RT-PCR检测肺组织IGF-1及OPN mRNA的表达。结果与C组比较,S1、S2组支气管上皮细胞IGF-1、OPN蛋白及mRNA表达均增强(P<0.05),Q1、Q2组支气管上皮细胞的IGF-1、OPN蛋白及mRNA表达低于各吸烟组(P<0.05),支气管IGF-1蛋白与OPN蛋白呈正相关(r=0.558,P<0.05)。结论 IGF-1、OPN参与烟雾暴露大鼠的气道重塑,早期戒烟有助于逆转气道重塑。     

高盐饮食上调跨膜蛋白16A致C57BL/6J小鼠脑动脉重构的机制

目的 探讨高盐上调跨膜蛋白16A(transmembrane protein 16A,TMEM16A)致小鼠脑动脉重构的机制。方法 40只C57BL/6J小鼠随机分为4组(10只/组,模型制备8周),空白对照组(正常饮水、摄食)、低盐组(2%高盐饲料)、中盐组(4%高盐饲料)和高盐组(8%高盐饲料)。HE染色观察脑动脉形态学变化;血管渗透性实验比较脑组织颜色及吸光度值;免疫荧光检测脑动脉TMEM16A的表达;PCR和Western blot检测脑动脉TMEM16A的mRNA和蛋白表达;离体肌张力检测脑动脉舒缩反应;膜片钳记录脑动脉平滑肌细胞钙激活氯通道(calcium-activated chloride channels, CaCC)电流。结果 与空白对照组相比,2%、4%和8%高盐饮食可浓度依赖性引起脑动脉管壁逐渐增厚、管腔狭窄;注射埃文斯兰后,4%和8%高盐组脑组织逐渐变蓝,且吸光度值明显增加;2%、4%和8%高盐组脑动脉对60 mmol·L^-1 KCl的收缩反应逐渐增强,对10^-5 mol·L^-1乙酰胆碱的舒张反...     

尼古丁上调Cx43致C57BL/6J小鼠肺动脉肌源性异常实验研究

目的探讨缝隙连接蛋白connexin 43(Cx43)在尼古丁致C57BL/6J小鼠肺动脉肌源性异常中的作用机制。方法将C57BL/6J小鼠随机分成4组,每组12只,分别为空白对照组(正常饮水、摄食)、0.003 mg/kg尼古丁组[腹腔注射尼古丁0.003 mg/(kg·d)]、0.03 mg/kg尼古丁组[腹腔注射尼古丁0.03 mg/(kg·d)]和0.3 mg/kg尼古丁组[腹腔注射尼古丁0.3 mg/(kg·d)]。干预时间为24周。利用微血管张力测定检测各组小鼠离体肺动脉对不同浓度梯度氯化钾KCl(20、28、39、55、77和108 mmol/L)和U46619(3×10^(-8)、10^(-7)、3×10^(-7)、10^(-6)、3×10^(-6) mol/L)的收缩反应,以及对不同浓度硝普钠SNP(10^(-8)、3×10^(-8)、10^(-7)、3×10^(-7)、10^(-6) mol/L)和吡那地尔Pina(10^(-8)、3×10^(-8)、10^(-7)、3×10^(-7)、10^(-6) mol/L)的舒张反应。HE特染观察各组小鼠肺动脉重构程度。免疫荧光检测各组小鼠肺动脉Cx43表达水平。RT-PCR和Western blot测定小鼠肺动脉Cx43的mRNA和蛋白表达水平。结果离体血管张力测定结果显示,与空白对照组相比较,分别使用0.003、0.03和0.3 mg/(kg·d)尼古丁干预C57BL/6J小鼠24周后,小鼠离体肺动脉对浓度梯度KCl和U46619的最大收缩反应均呈现不同程度的增强(P<0.05);同时小鼠离体肺动脉对浓度梯度SNP和Pina的最大舒张反应却呈现不同程度的减弱(P<0.05)。0.003、0.03和0.3 mg/(kg·d)尼古丁组肺动脉重构程度呈现浓度依赖性增加,且Cx43的免疫荧光蛋白表达均显著高于空白对照组。RT-PCR和Western blot实验结果显示,0.003、0.03和0.3 mg/kg尼古丁组肺动脉Cx43 mRNA和蛋白表达均显著高于空白对照组(P<0.05)。结论尼古丁可造成C57BL/6J小鼠肺动脉肌源性反应异常,其机制可能与上调Cx43表达有关。     

OSAHS合并高血压患者血内皮素、一氧化氮、肿瘤坏死因子-α和心钠素的临床研究

目的探讨阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（OSAHS）以及OSAHS合并高血压患者的内皮素（ET）、一氧化氮（NO）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和心钠素（ANP）水平及其临床意义。方法选择单纯OSAHS患者16例,OSAHS合并高血压患者17例和正常对照组12例,放射免疫法和硝酸还原酶法检测血ET、TNF-α、ANP和NO的含量。结果单纯OSAHS组和OSAHS合并高血压组血ET、ET／NO、TNF-α和ANP均明显高于对照组（P〈0．05或P〈0．01）,而NO低于对照组（P〈0．05）;OSAHS合并高血压组ET、ET／NO和TNF-α高于单纯0SAHS组（P〈0．05）,而NO低于单纯0SAHS组（P〈0．05）。结论OSAHS患者及OSAHS合并高血压患者均存在血管内皮损伤和内皮功能失调。     

microRNAs在急性肺栓塞中的研究进展

综述microRNAs在急性肺栓塞中的研究进展,提出急性肺栓塞是一种突发的具有高发病率及死亡率的静脉血栓栓塞症,起病急进展快,往往缺乏可靠的筛查方法,microRNAs是内源性小分子非编码单链RNAs,通过结合靶基因mRNAs 3′非翻译区抑制其翻译,作为血液中简便可靠的生物标志物已有广泛研究。     

蛋白激酶C对低氧诱导小鼠肺动脉平滑肌细胞增殖及蛋白表达的影响

目的:探讨经典型蛋白激酶C（PKC）对低氧诱导的小鼠远端肺动脉平滑肌细胞（PASMC）增殖及细胞外信号调节激酶1/2（ERK1/2）、丝氨酸苏氨酸蛋白激酶（Akt）表达的影响。方法:利用Dynal MPC-1磁分离器分离含铁粉的远端肺小动脉,原代培养并鉴定肺动脉平滑肌细胞。应用PKC激动剂（PMA）、PKCα抑制剂（s...     

慢性尼古丁干预抑制Kv1.5致小鼠肺动脉舒缩异常的机制研究

目的 研究慢性尼古丁干预抑制Kv1.5致C57BL/6J小鼠肺动脉舒缩异常的机制.方法 将40只4周龄的C57BL/6J小鼠随机分成4组,每组10只,分别为空白对照组(腹腔注射等量灭菌注射用水)、低浓度尼古丁组(腹腔注射尼古丁0.003 mg/kg·bw/d)、中浓度尼古丁组(腹腔注射尼古丁0.03 mg/kg·bw/...     

KLF4在低氧诱导肺动脉平滑肌细胞增殖及表型转化中的作用初步研究

目的：本实验通过观察低氧诱导大鼠原代肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cell,PASMC)增殖与分化标志改变过程中,krǖppel 样因子4(krǖppel-like factor 4, KLF4)表达的变化,并检测 KLF4过表达对该过程的影响,探讨 KLF4是否在其中担当一定作用。方法采用贴片法培养原代 PASMC,低氧(5%O 2)培养24 h、48 h、72 h 后,以正常氧浓度培养细胞为对照,采用实时荧光聚合酶链反应(real-time PCR)、Western blot 及免疫共沉淀方法,观察低氧24 h、48 h、72 h,PASMC 中 KLF4乙酰化水平及表达水平的变化。cck-8检测细胞增殖情况,碘化丙啶(PI)染色检测细胞周期,提取细胞总 RNA 和蛋白,采用 real-time PCR、Western blot 方法检测细胞中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达水平,综合分析低氧对细胞增殖的影响,同时采用 real-time PCR、 Western blot 方法检测 PASMC 分化标志物平滑肌肌动蛋白α(smooth muscleα-action,SMα-actin)的表达水平。通过转染 KLF4表达质粒,提高 PASMC 中 KLF4的表达水平,检测细胞周期、增殖活力及 PCNA、SM α-actin 的变化,观察低氧下 KLF4过表达对PASMC 增殖、分化的影响。结果低氧24 h,PASMC 中 KLF4表达水平均较常氧培养细胞明显增高,期间 SMα-actin 表达较常氧培养细胞明显减少,PASMC 增殖不明显。随后 KLF4表达水平逐渐降低,至72 h 降低至正常水平,而 SMα-actin 逐渐增高,同时 PASMC 增殖活力明显增强,S 期细胞逐渐增多。KLF4过表达后,低氧刺激 PASMC 增殖活力明显降低,SMα-actin 表达水平也降低,细胞阻滞于 G1期。结论低氧诱导 PASMC 发生去分化与增殖不同步;KLF4参与调节低氧诱导的PASMC 表型转化与增殖过程,该作用涉及 KLF4乙酰化水平改变。     

中药在防治肺动脉高压中的作用及其研究进展

肺动脉高压是以持续和显著的肺动脉压力升高并最终导致右心衰竭和死亡为主要特征的难治性临床病理生理综合征。目前治疗肺动脉高压的药物只能通过单一机制而不能通过多途径、多靶点来发挥作用,且价格昂贵。近年来,中药治疗肺动脉高压及肺源性心脏病的实验研究已经取得了很大的进展。与一些西药相比,中药温和持久、不良反应少且价格低廉,因此具有潜在的优势和开发的价值。     

慢性低氧性肺动脉高压大鼠肺动脉内PTEN蛋白表达的变化

目的 通过观察慢性低氧性肺动脉高压大鼠肺动脉内人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因（PTEN）蛋白表达水平的变化,初步探讨PTEN在慢性低氧性肺动脉高压的发生、发展过程中所起的作用.方法 将6周龄健康雄性SD大鼠,随机分为正常对照组、低氧1d、3d、7d、14d和21d组,除对照组外,其他各组先建立慢性低氧肺动脉高压大鼠模型,然后检测各组大鼠右心室收缩压（right ventricle systolic pressure,RVSP）和右心室肥厚指数（right ventricle hypertrophy index,RVHI）,采用HE染色观察肺动脉病理学改变,采用Western blot技术检测肺动脉内PTEN蛋白的表达水平.结果 ①与正常对照组（23.76±0.82）mmHg相比,低氧暴露1d、3d、7d、14 d、21d后RVSP均明显上升（P＜0.05）;RVHI低氧3d、7d、14 d、21d组均较正常对照组（100％）明显上升（P＜0.05）;低氧暴露3d、7d和21d组肺动脉中膜明显增厚、管腔明显变小.②PTEN和p-PTEN在正常对照组和低氧各组均有表达.低氧各组肺动脉内PTEN蛋白的表达较对照组下降,但差异无统计学意义（P＞0.05）;而p-PTEN蛋白与PTEN总蛋白表达量的比值随低氧时间的延长有上升趋势,且在慢性低氧21d组（1.71±0.25）较正常对照组（1.00）明显增高（P＜0.05）.结论 PTEN蛋白表达的降低和p-PTEN蛋白表达的增高可能参与了大鼠慢性低氧性肺动脉高压的发生和发展过程.