荧光定量PCR检测细胞代谢综合征相关基因表达的优化

目的优化MRSG mRNA表达的Taqman荧光定量PCR检测反应体系并进行系统评价。方法设计荧光PCR适用的引物和探针,从模板、引物、探针、镁离子浓度等方面优化荧光定量PCR检测反应体系,评价优化系统的特异性和稳定性。结果确定系统的模板取样量为2μl,引物浓度为0.4μmol/L,探针浓度为0.2μmol/L,Mg~（2＋）浓度为4mM,建立了稳定的MRSG mRNA表达的Taqman荧光PCR检测方法。结论优化后的MRSG mRNA荧光PCR检测方法特异性和稳定性较好。     

花椒挥发油在体外对低密度脂蛋白氧化的影响

目的探讨花椒挥发油能否对抗脂蛋白的氧化。方法采用Cu^2＋介导正常人低密度脂蛋白（LDL）的氧化反应,应用硫代巴比妥酸法测定LDL氧化过程中硫代巴比妥酸反应物质（TBARS）的变化,采用琼脂糖凝胶电泳测定氧化型低密度脂蛋白的相对电泳迁移率（REM）的变化。结果40mg／mL的花椒挥发油对Cu^2＋介导LDL氧化修饰时TBARS与REM的差异有统计学意义（P〈0．01）。未加花椒挥发油的对照组LDL氧化反应延滞期为1h,在2～4h后TBARS值进入快速增长期,于24h达到高峰并趋于稳定;而在花椒挥发油组（40mg／mL组）,LDL的氧化反应延滞期延长到4h左右,快速增长期延长到6～8h;但TBARS最大值无明显降低。结论花椒挥发油能够在体外对抗Cu^2＋介导LDL的氧化修饰。     

内源性高甘油三酯血症存在胰岛素抵抗

为探讨内源性高甘油三酯血症是否存在胰岛素抵抗，本文对５３例内源性高甘油三酯血症患者及３３例年龄及性别相匹配的正常人的耐糖试验、胰岛素分泌试验、空腹血脂及血浆载脂蛋白进行了分析。结果发现，内源性高甘油三酯血症患者口服１００ｇ葡萄糖后血糖及血浆胰岛素水平明显增加，服糖后２ｈ血糖大于７．２２ｍｍｏｌ／Ｌ，服糖后３ｈ血浆胰岛素仍未恢复至空腹水平；且血浆胰岛素面积和葡萄糖面积、血浆胰岛素面积与葡萄糖面积的百分比及胰岛素抵抗指数均明显高于正常对照组，说明内源性高甘油三酯血症患者存在胰岛素抵抗，出现高胰岛素血症及葡萄糖耐量降低。     

组织脂质的分离及分类测定

脂质的分离及分类测定,是研究脂代谢、阐明脂代谢紊乱相关疾病的发病机理和脂代谢调节药物作用机理的重要手段。尽管目前出现了不少先进的分离、分析技术和相关仪器,但脂质的分离和分类测定采用最多的仍然是较传统的薄层层析法。该方法具有简单、快捷、花费少、灵敏度高等优点,应用十分广泛。同时,由于高效液相色谱法和棒状薄层层析拥有自己的特点和优势,近年来也越来越多地应用于组织脂质的分离和分类测定。     

高胆固醇饲养对家兔肝细胞膜高密度脂蛋白受体的影响

为探讨高胆固醇喂养对兔肝细胞膜高密度脂蛋白受体的影响,用高胆固醇饲料喂养家兔６个月后剖杀,取肝脏用蔗糖密度梯度超速离心法分离肝细胞膜,用密度梯度超速离心法分离普通饲料喂养的家兔血浆不含载脂蛋白Ｅ的高密度脂蛋白３,用氯化单碘法对兔高密度脂蛋３进行＾１２５Ｉ标记,以＾１２５Ｉ标记的兔高密度脂蛋白３与体,对肝细胞膜高密度脂蛋白受体进行研究。结果发现,高胆固醇饲料和普通饲料喂养的家兔肝细胞膜高密度脂蛋白     

中国人Ⅱa型高脂蛋白血症载脂蛋白E基因多态性的研究

为探讨中国人Ⅱa型高脂蛋白血症患者载脂蛋白E基因多态性及其与血脂和载脂蛋白水平的关系,采用聚合酶链反应－限制片长多态性法,分别对87例Ⅱa型高脂蛋白血症患者及230例血脂正常者的载脂蛋白E基因型、空腹血脂及载脂蛋白AⅠ、AⅡ、B100、CⅡ、CⅢ和E进行了全面分析。结果发现,Ⅱa型高脂蛋白血症患者的血清甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、非高密度脂蛋白胆固醇,以及载脂蛋白B100、CⅡ、CⅢ和E水平较对照组显著升高（P＜0．01）;;血清载脂蛋白E／CⅢ比值显著降低（P＜0．05）;Ⅱa型高脂蛋白血症组与对照组载脂蛋白E基因型及等位基因频率分布均以E3／3和ε3最高,Ⅱa型高脂蛋白血症组的ε4等位基因有增高的趋势,而ε2等位基因有降低的趋势（P＞0．05）。携带ε2等位基因组血清载脂蛋白E水平较E3／3基因型组显著升高,而携带ε4等位基因组血清载脂蛋白E水平较E3／3基因型及携带ε2乘位降低基因组显著（P＜0．001）。此结果提示,ε2及ε4等位基因与Ⅱa型高脂蛋白血症患者的血清载脂蛋白E水平有关。     

酰基辅酶A∶胆固醇酰基转移酶2基因734位点T等位基因与高糖低脂膳食诱导的健康青年女性TG/HDLC、log(TG/HDLC)及LDLC/HDLC改变相关联

目的探讨酰基辅酶A∶胆固醇酰基转移酶2(ACAT-2)基因734位点C/T多态性对健康青年血脂比值的影响及在高糖低脂膳食诱导的血脂比值变化中的作用。方法给予56名健康青年志愿者7天平衡膳食和6天高糖低脂膳食,于第1天、第8天以及第14天清晨抽取12 h空腹静脉血,测定血脂,计算甘油三酯/高密度脂蛋白胆固醇(TG/HDLC)、log(TG/HDLC)、总胆固醇/高密度脂蛋白胆固醇(TC/HDLC)和低密度脂蛋白胆固醇/高密度脂蛋白胆固醇(LDLC/HDLC)比值。提取基因组DNA,聚合酶链反应限制性酶切法分析ACAT-2基因734位点多态性。结果女性T等位基因携带者log(TG/HDLC)显著低于CC纯合子受试者,男性CC纯合子受试者TC/HDLC显著高于女性CC纯合子受试者,男性T等位基因携带者log(TG/HDLC)显著高于女性。高糖低脂膳食前,男性T等位基因携带者TG/HDLC、log(TG/HDLC)显著高于女性。与高糖低脂膳食前相比,高糖低脂膳食后男性TC/HDLC、LDLC/HDLC显著降低,不受基因型影响。女性CC纯合子受试者高糖低脂膳食后TG/HDLC、log(TG/HDLC)显著升高,TC/HDLC、LDLC/HDLC显著降低,女性T等位基因携带者TC/HDLC显著降低。结论 ACAT-2 734位点T等位基因与高糖低脂膳食诱导的健康青年女性TG/HDLC、log(TG/HDLC)及LDLC/HDLC改变相关联。     

高凝状态大鼠肝脏差异表达基因反向消减cDNA文库的构建

目的构建高凝状态(prothrombotic states,PTS)大鼠肝脏差异表达基因反向清减cDNA文库．方法用高淀粉饲料喂养制备大鼠PTS模型,从PTS模型大鼠和对照大鼠肝脏提取poly A^ mRNA,分别以1．5 μg poly A^ mRNA起始,依次合成单链和双链cDNA,经酶切成平均大小为400-600 bp的片段。以PTS大鼠cDNA作为Driver,对照大鼠cDNA为Tester。将Tester分为两组,分别连上不同的接头,与Driver进行两次消减杂交和两次抑制性PCR。将第二次PCR产物cDNA克隆至pMD18-T载体上,然后转化细菌,转化后的细菌接种于含50 μg／ml ampicillin、IPTG、和X-gal的LB琼脂平板上,将克隆计数。结果获得的克隆78％为白色克隆,成功构建了PTS大鼠肝脏差异表达基因反向消减cDNA文库．结论以1．5 μg poly A^ mRNA起始,采用抑制性清减杂交,构建了PTS大鼠肝脏差异表达基因反向消减cDNA文库。     

对当前医学生人文素质教育的几点思考

当前医学教育存在着偏重专业知识,忽略学生人文素质教育的现象。而社会的发展,医学模式和医患关系的转变要求医学生应具备较高的人文素质。本文通过现状分析,提出改变观念,发挥综合性大学的优势,提高教师的人文素质,创建浓厚的校园文化,加强社会实践等途径,提高医学生的人文素质,以适应社会的进步和医学的发展。     

谈艾滋病同伴教育及体会

简介澳大利亚墨尔本大学与四川大学华西公共卫生学院联办的艾滋病青年同伴教育活动中志愿者培训、练习、讲课基本过程,并讨论同伴教育中存在的具体问题及个人体会。