脉冲电磁场对大鼠椎间盘退变及A2A腺苷受体介导的活性氧/PI3K/Akt信号通路的影响

目的 观察脉冲电磁场（PEMF）对椎间盘退行性病变（IDD）大鼠髓核A2A腺苷受体（A2AR）的调控效应,并探讨其对A2AR介导的活性氧（ROS）/PI3K/Akt信号通路的影响。 方法 采用随机数字表法将50只SD大鼠分为对照组、椎间盘退行性病变组（简称模型组）、A2AR激动剂CGS-21680治疗组（简称激动剂组）、PEMF组和PEMF联合CGS-21680治疗组（简称观察组）。除对照组外,其余各组大鼠均制成IDD动物模型。制模后激动剂组向L5-6椎间盘组织注射100 μl CGS-21680,PEMF组给予PEMF干预,观察组注射CGS-21680后再给予PEMF干预,PEMF干预时间为14 d。培养大鼠原代髓核细胞,将其分为对照组、IL-1β模型组(简称IL-1β组)、激动剂组、PEMF组和观察组,各组细胞干预方法同上。于制模8周后采用HE染色评估各组大鼠椎间盘组织病理形态变化,采用TUNEL染色评估髓核细胞凋亡情况,采用免疫组化/免疫荧光法测定8-OHDG表达,采用ELISA试剂盒等检测超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）及ROS含量,采用Western blot技术检测A2AR、PI3K、AKT及p-AKT蛋白水平。 结果 模型组大鼠髓核细胞明显皱缩、坏死,纤维环断裂;观察组纤维环完整,髓核结构基本趋于正常。激动剂组、PEMF组及观察组SOD水平及A2AR、PI3K、p-AKT、AKT蛋白含量均较模型组明显升高,MDA、ROS及8-OHDG表达均显著降低（P＜0.05）;并且观察组ROS水平亦显著低于激动剂组及PEMF组（P＜0.05）,p-AKT磷酸化水平则显著高于激动剂组及PEMF组（P＜0.05）。细胞实验结果显示,激动剂组、PEMF组及观察组髓核细胞SOD水平、A2AR、PI3K、p-AKT、AKT蛋白含量均显著高于IL-1β组,MDA、ROS及8-OHDG水平均明显降低（P＜0.05）;并且观察组ROS表达亦显著低于激动剂组和PEMF组（P＜0.05）,A2AR蛋白含量及p-AKT磷酸化水平则明显高于激动剂组及PEMF组（P＜0.05）。激动剂组、PEMF组及观察组髓核细胞Bax水平均较IL-1β组显著降低,Bcl-2表达则明显升高（P＜0.05）,并且观察组细胞凋亡率亦显著低于激动剂组和PEMF组,Bcl-2表达则显著高于激动剂组及PEMF组（P＜0.05）。 结论 PEMF可通过上调A2AR活性,减少ROS生成,从而发挥抗氧化应激作用;联合A2AR激动剂能进一步激活PI3K/Akt磷酸化,下调促凋亡蛋白Bax水平,上调抗凋亡蛋白Bcl-2表达,从而抑制髓核细胞凋亡,减缓IDD恶性进展。     

小剂量米非司酮治疗子宫肌瘤的临床效果分析

目的探讨子宫肌瘤患者应用小剂量米非司酮方案予以治疗效果及对性激素水平和安全性的影响。方法选取我院妇科2017年3月—2018年3月收治子宫肌瘤患者120例作为研究对象,将全部研究对象随机分为两组。观察组患者(n=60)采用12.5 mg/次,1次/d小剂量米非司酮方案治疗;对照组患者(n=60)采用50 mg/次,1次/d高剂量米非司酮方案治疗。对比两组患者的治疗总有效率、性激素水平、不良反应发生率。结果观察组患者的治疗总有效率为95.0%,对照组为75.0%,组间比较,差异具有统计学意义(P 0.05)。治疗后,观察组患者的性激素指标孕酮、卵泡刺激素、雌二醇、黄体生成素均低于对照组,差异具有统计学意义(P 0.05)。观察组不良反应率为6.7%,低于对照组23.3%,差异具有统计学意义(P 0.05)。结论子宫肌瘤采用小剂量米非司酮方案予以治疗,可增强总有效率,改善性激素水平,降低不良反应,具有较高的应用价值。     

腺苷受体2A调控神经肽Y抑制髓核细胞凋亡及基质降解的机制研究

目的探索腺苷受体2A(A2AR)调控神经肽Y(NPY)的机制及其在椎间盘退行性病变中对髓核细胞凋亡和细胞外基质的影响。方法采用随机数字表分组法将30只雄性SD大鼠分为5组, 每组6只。S组为对照组, 即穿刺大鼠L5～6椎间盘后注射生理盐水;M组为模型组, 即通过椎间盘穿刺联合椎间盘内注射肿瘤坏死因子α构建大鼠椎间盘退变模型;A2AR-小干扰RNA(siRNA)组、NC-siRNA组和CGS-21680组则为构建椎间盘退变模型基础上分别向椎间盘内注射A2AR的siRNA、阴性对照(NC) siRNA和A2AR激动剂CGS-21680。采用蛋白质印迹法和实时荧光定量聚合酶链反应检测A2AR、NPY、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)、Ⅱ型胶原(Col-Ⅱ)、蛋白激酶A(PKA)和环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)等蛋白在椎间盘中的表达。组间比较采用单因素方差分析。结果在M组中, A2AR(1.72±0.50比0.95±0.18, F=11.49, P>0.05)、NPY(0.40±0.03比0.20±0.04, F=22.08, P<0.05)和bax(0.62±...     

异丙酚对兔主动脉阻断脊髓细胞凋亡的影响

目的探讨异丙酚对家兔主动脉阻断所致脊髓细胞凋亡的影响及其可能的作用机制。方法24只家兔随机分为假手术组(A组)、缺血再灌注损伤组(B组)和异丙酚组(C组)。B、C组阻断腹主动脉40min,再灌注7d;C组于阻断腹主动脉前10min静脉注射异丙酚5mg/kg,继以微量泵静脉持续输注异丙酚20mg·kg-1·h-1直至松夹。分别测定阻断前10min(C10)、开放即刻(C40)、再灌注60min(R60)及7d(R7d)血清丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)值;检测脊髓凋亡神经元及Bax、Bcl2蛋白表达;观察术后后肢神经功能。结果1缺血、及再灌注后B组MDA值明显高于C10值及A组相应时间点值(P<0.05或P<0.01),SOD值变化同MDA变化相反;C组MDA值明显高于C10值(P<0.05),但显著低于B组相应时间点值(P<0.05),较A组差异无显著性。2B组Bax蛋白表达明显高于A组(P<0.05),Bcl2蛋白表达明显低于A组(P<0.01);C组Bax蛋白表达明显低于B组,但高于A组(P<0.01和P<0.05),Bcl2蛋白表达明显高于B组及A组(P均<0.01)。3B组凋亡细胞指数明显多于A组;C组明显少于B组,但高于A组(P<0.01和P<0.05)。4C组瘫痪发生率明显低于B组,其后肢神经功能明显好于B组(P均<0.01)。结论异丙酚能抑制家兔主动脉阻断所致的脊髓细胞凋亡的发生,其机制可能与其抗过氧化反应、抑制Bax蛋白、增强Bcl2蛋白的表达有关。     

寄生虫学及检验教学改革初探

以培养学生实际应用能力为宗旨,探索改革寄生虫学及检验理论教学与实践教学的方法。     

盐酸戊乙奎醚对非体外循环冠状动脉搭桥手术患者微循环功能的影响

目前,体外循环(CPB)虽广泛用于临床,但其可影响患者的微循环.2005年1月～2007年11月,我们观察了盐酸戊乙奎醚对行非体外循环冠状动脉桥手术(OPCAB)患者微循环功能的影响.现报告如下.     

丙泊酚对心肺转流病人血浆血栓调节蛋白和血管性假血友病因子水平的影响

目的 探讨丙泊酚用于心肺转流(CPB)对全身性血管内皮细胞(VEC)急性损伤的保护作用.方法 30例心脏瓣膜置换术病人随机均分为观察组和对照组,CPB过程中分别持续输注丙泊酚、硝酸甘油维持病人血流动力学的稳定.分别于术前、CPB前、CPB 30 min、停CPB、手术结束、术后1、3 d采血动态监测两组病人血浆可溶性血栓调节蛋白(sTM)和血管性假血友病因子(vWF)的变化.结果 两组病人血浆sTM和vWF在CPB期间和术后1 d均显著增高(P＜0.05或P＜0.01).观察组病人CPB期间至术后3d的所有指标均低于对照组(P＜0.05或P(0.01).观察组的指标术后3 d恢复到术前水平.对照组未能恢复.结论 CPB可导致全身性VEC的急性损伤,丙泊酚可以减轻CPB导致的VEC损伤.     

副舟骨切除加胫后肌腱转位术在合并扁平足的副舟骨疼痛综合征中的临床应用

目的 探讨副舟骨切除加胫后肌腱转位术在治疗合并扁平足的副舟骨疼痛综合征中的临床疗效.方法 对21例经半年以上保守治疗无效的合并扁平足的副舟骨疼痛综合征患者行副舟骨切除加胫后肌腱转位术.结果 术后随访19例,时间6～30个月.患者疼痛症状明显好转,足部外观改善.应用Maryland足部评分标准,由术前平均(57.6±6.8)分提高至术后平均(84.2±5.1)分,差异有统计学意义(P<0.05).结论 副舟骨切除加胫后肌腱转位术治疗合并扁平足的副舟骨疼痛综合征近期疗效明显.     

人凝血因子Ⅷ新型离子交换树脂的筛选及吸附性能的研究

目的筛选对人凝血因子Ⅷ吸附效果较好的新型离子交换树脂,研究其吸附性能。方法将初始浓度为(20±1)IU/ml的冷沉淀提取液,恒温摇床振荡吸附2 h,测定吸附后上清液中蛋白浓度及FⅧ活性,通过蛋白吸附量及FⅧ活性吸附率,获得人FⅧ吸附效果较好的树脂;P-15与A-15树脂相同条件下吸附FⅧ,计算FⅧ的活性吸附率以及蛋白吸附量,考察树脂骨架对吸附的影响,同种方法考察树脂孔径大小对吸附的影响;测定吸附过程中吸附液中蛋白浓度的变化,得到吸附动力学曲线,从而确定吸附速率。分别改变A-15树脂用量、吸附温度、冷沉淀粗提液的pH值以及NaCl浓度,计算FⅧ的活性吸附率以及蛋白吸附量,考察树脂用量、温度、pH值、NaCl浓度对吸附的影响。结果 A-15树脂对FⅧ的活性吸附率为(78.76±4.2)%,蛋白吸附量(77.32±3.8)mg/g;A-15树脂未接基团时对FⅧ的活性吸附率为(12.34±5.6)%,蛋白吸附量为(18.68±5.3)mg/g;随着孔径的增大,树脂对FⅧ的活性吸附率和蛋白吸附量均为先增大后减小;树脂为1.25 g时,即可满足对FⅧ的吸附要求;吸附速率常速为0.003 56 g/mg.min;摇床温度为25～30℃、pH值为6.5～7.0、NaCl浓度为(0.1～0.2)mol/L时为较佳吸附条件。结论 A-15树脂对人凝血因子Ⅷ的吸附效果较好,在较佳吸附条件下,树脂对FⅧ的活性吸附率为78±4%,蛋白吸附量为(77±4)mg/g。     

急性等容血液稀释对妇科患者血清IL-6与皮质醇的影响

目的了解急性等容血液稀释（ANH）对妇科手术患者应激反应影响。方法30例妇科手术患者,随机分为两组,对照组（A组,n=15）和ANH组（B组,n=15）,分别于诱导前、切皮前、手术开始1h和手术结束时取血测定血清IL-6、皮质醇浓度。结果两组患者手术1h和术终的血清IL-6,皮质醇浓度相比差异无统计学意义（P〉0.05）。结论急性等容血液稀释未导致妇科患者围术期的应激反应。