脑缺血损伤体外模型的建立及评价

目的建立一种符合脑缺血损伤的体外模型,并评价其可靠性。方法运用海马神经细胞原代培养技术,采用厌氧袋及糖剥夺法相结合建立体外脑缺血损伤模型。观察细胞形态学变化;MTT法测定细胞活性;化学比色法检测细胞质及细胞外液中乳酸脱氢酶（LDH）的活力,计算LDH的漏出率;流式细胞仪检测神经细胞的凋亡率。结果与正常组比较,当损伤在8h以内时,神经细胞活性、凋亡率及LDH的漏出率无显著性差别（P＞0.05）;当损伤在12h以上时,细胞形态损伤严重,细胞活性明显下降（P＜0.01）,细胞凋亡率及LDH漏出率显著上升（P＜0.01）。结论厌氧袋及糖剥夺相结合法能有效的建立脑缺血损伤体外模型,并具有良好的可靠性。     

不同方位手术切口白内障超声乳化术后眼表的观察

目的 探讨年龄相关性白内障在表面麻醉下不同方位手术切口的超声乳化白内障抽吸联合后房型人工晶状体植入术后眼部的观察.方法 68例(78只眼)均在表麻下行上方或水平方位透明角膜缘切口的白内障超声乳化联合后房型人工晶状体植入术,术后根据切口位置归为两组:上方透明角膜缘切口组31例(41只眼),水平透明角膜缘切口组31例(37只眼).每组均在术前和术后1周,1个月,3个月时行泪膜破裂时间(BUT),泪液分泌实验Ⅰ(SchirmerⅠ)和角膜荧光素实验指标的眼部观察.结果 所有入选的病例均在表麻下接受手术治疗,术后随访3个月.两组在视力,年龄,结膜充血,房水闪辉差异无统计学意义(P＞0.05).上方透明角膜缘切口组和水平组之间在泪膜破裂时间(BUT)及泪液分泌实验Ⅰ(SchirmerⅠ)在各个观察时间点差异均有统计学意义(P＜0.05),而角膜切口局部染色(FL)在同一时间点则差异无统计学意义(P＞0.05).每组均显示在术后1周时各项指标与术前差异有统计学意义(P＜0.05).上方透明角膜缘切口组在术后3个月除SchirmerⅠ外,另两项指标基本恢复至术前水平.在水平透明角膜缘切口同一时间点BUT,SchirmerⅠ仍未基本恢复至术前水平.结论 白内障超声乳化抽吸联合后房型人工晶状体植入术后水平透明角膜缘切口可能比上方透明角膜缘切口更容易出现类似干眼症状,且相关指标异常出现的高峰期在术后1周左右.     

地肤子挥发油成分的研究

本文采用气相色谱—质谱联用的方法,对地肤子的挥发油成分进行了定性分析,共分析了61种化学成分,鉴定了其中36种,均系首次从该药材挥发油中发现。     

朝鲜淫羊藿的化学成分

从朝鲜淫羊藿(Epimedium koreanum Na kai)的地上部分分离出3个新化合物,应用化学和波谱分析方法,其结构分别确定为3-O-β-D-吡喃葡萄糖(1→3)-α-L-(4-乙酰基)吡喃鼠李糖-脱水淫羊藿素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(1),2-(对-羟基苯氧)-5,7-二羟基-6-异戊烯基色酮(2),7-羟基-3,4,6-三甲氧基-9,10-二氢菲-2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(3)。化合物1和3分别命名为朝藿苷丙(korepimedoside C)和淫羊藿苷A₇(icarisideA₇)。     

丁酸钠诱导COLO205结肠癌细胞凋亡及其对caspase-3的调控

目的: 观察丁酸钠对COLO205结肠癌细胞株caspase-3的调控, 并探讨其诱导COLO205细胞株凋亡的机制.方法: 1、2、4 mmol/L丁酸钠与结肠癌细胞共同培养48 h;MTT法测定细胞活性;免疫组织化学法检测细胞中caspase-3的蛋白表达;流式细胞仪检测细胞的凋亡率.结果: 与阴性对照组比较, 1、2、4 mmol/L丁酸钠组细胞活性下降(0.47±0.09, 0.40±0.03,0.37±0.02 vs 0.55±0.09, P<0.05或0.01);丁酸能显著促进caspase-3蛋白的阳性表达(31.9±1.15, 40.6±1.04, 51.7±1.17 vs 29.4±1.02,P<0.05或0.01), 增加COLO205细胞的凋亡率(8.27%±0.42%, 15.1%±0.72%, 21.6%±0.95% vs 7.0%±0.33%, P<0.05或0.01).结论: 丁酸钠能通过上调caspase-3基因的表达并诱导COLO205细胞凋亡.     

朝藿甙甲和朝藿甙乙的结构鉴定

自朝鲜淫羊藿(Epimedium koreanum Nakai)地上部分中分离得到二个黄酮类化合物I和II,根据理化数据及光谱分析,其结构分别鉴定为:脱水淫羊藿素3-O-β-D-(6-乙酰基)吡喃葡萄糖(1→3)-α-L-(4-乙酰基)吡喃鼠李糖甙(I)和脱水淫羊藿素3-O-β-D-(2,6-二乙酰基)吡喃葡萄糖(1→3)-α-L-(4-乙酰基)吡喃鼠李糖-7-O-β-D-吡喃葡萄糖甙(II)。I和I为新化合物,分别命名为朝藿甙甲(korepimedoside A)和朝藿甙乙(korepimedoside B)。     

朝鲜淫羊藿的化学成分(Ⅰ)

自朝鲜淫羊藿（ＥｐｉｍｅｄｉｕｍｋｏｒｅａｎｕｍＮａｋａｉ．）的地上部分，分离得到５个单体化合物，根据理化数据和光谱分析鉴定为ａｎｈｙｄｒｏｉｃａｒｉｔｉｎ（１），８ｐｒｅｎｙｌｋａｅｍｐｆｅｒｏｌ（２），ｇｉｎｋｇｅｔｉｎ（３），ｉｓｏｇｉｎｋｇｅｔｉｎ（４）和ｂｉｌｏｂｅｔｉｎ（５）．其中，化合物（３，（４），（５）是从本属植物中首次分离得到     

体外共培养诱导人羊膜间充质干细胞分化为眼表上皮细胞的研究

背景 人羊膜间充质干细胞（hAMSCs）在体外能诱导分化为多种体细胞,但目前有关hAMSCs分化为眼表细胞的研究鲜有报道. 目的 探讨体外共培养诱导hAMSCs向眼表细胞分化的可能性及其分化机制.方法 本研究经广州医科大学第二附属医院伦理委员会批准,在健康产妇的知情同意下从人胎盘中分离hAMSCs并进行培养,采用流式细胞术计数分析CD44、CD45、CD73、CD90在培养细胞中的表达以鉴定细胞,此外通过成骨诱导分化实验和成脂诱导分化实验对培养细胞进行体外分化鉴定.在患者知情同意下获取眼科手术中弃用的人眼球结膜组织,用组织块培养法分离和培养人球结膜成纤维细胞（hBCFs）,将hAMSCs与hBCFs在Transwell培养体系中进行共培养,分为hAMSCs培养组和hAMSCs与hBCFs共培养组,用含质量分数5％胎牛血清（FBS）的DMEM高糖/F12培养基培养7d,采用免疫荧光技术检测hAMSCs中对上皮细胞角蛋白19（CK19）的表达,评价hAMSCs向眼表细胞分化的程度,并检测hAMSCs中α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达,评价其分化过程与间质上皮化转换（MET）过程的关系.结果 传代至3～7代的hAMSCs均为细长形,但随着传代增加,细胞体积增大,细胞中CD44、CD73、CD90表达呈强阳性,但不表达CD45.经成骨或成脂诱导分化后3～4周,细胞中茜素红S（ARS）染色或油红O染色阳性.hAMSCs与hBCFs共培养后1周,hAMSCs形态由细长形变为类上皮细胞型,共培养组的部分细胞中CK19表达阳性,所有细胞α-SMA表达呈微弱阳性,而hAMSCs细胞培养组可见呈绿色荧光的α-SMA阳性细胞,但不表达CK19. 结论 通过体外共培养可诱导hAMSCs向人眼表细胞分化,其分化机制可能与MET过程相关.     

中年人的老年之忧：老人成社会发展快的牺牲品

无论是40岁、55岁还是60岁，从不上班那天起，你在别人眼里就是老人了。昨天，你还能穿大红T恤，挂MP3，在会上侃侃而谈；今天，不过是没想起一个电话号码，你就琢磨自己是不是得了老年痴呆症。人们就这样“哐啷”一声，从中年跨入老年，有些人认了，有些人偏不信邪，钱柜K歌，网上写BLOG，追明星扮偶像，当驴族，随着时代的变化，老年生活也该转轨了。[编者按]