^90Y间接法标记单克隆抗体的实验研究

目的：采用间接法对抗CEA单抗（McAb）及CD45McAb进行^90Y标记,并确定最佳标记条件,为90Y放射免疫导向治疗CEA分泌性肿瘤及急性白血病奠定基础。方法：利用DTPA环酐（cDTPAa）作为络合剂,将^90Y偶联至CEAMcAb与CD45McAb上,确定cDTPAa与抗体偶联的最佳条件,并测定偶联物的免疫活性及在体外的稳定性。结果：在抗体浓度为20mg/ml时,最佳偶联条件为：抗CEA单抗与cDTPAa的摩尔比为1：20,偶联反应中pH值8.2,在最佳偶联条件下,^90Y标记CEAMcAb与CD45McAb的标记率均〉93,放化纯度均〉95,体外稳定性良好,并且两类标记物均保持较好的免疫活性。结论：^90Y标记的CEAMcAb与CD45McAb是较理想的放射免疫靶向治疗制剂,可用于下一步的CEA分泌性肿瘤及急性白血病的治疗研究。     

Bortezomib或联合三尖杉酯碱、三氧化二砷对急性髓系白血病原代细胞增殖作用的影响

目的:探讨bortezomib单独或联合三尖杉酯碱(HT)、三氧化二砷(As2O3)对初发及难治/复发急性白血病原代细胞的增殖作用。方法:以初发及难治/复发急性髓系白血病原代细胞为研究对象,分别应用bortezomib、HT、As2O3单独或联合处理细胞后,使用MTT法观察细胞增殖活力。结果:10～500nmol/L bortezomib对初发及难治/复发性白血病患者原代细胞均有抑制作用,且呈明显剂量依赖关系,随浓度增大抑制效果逐渐增强。作用于初发白血病原代细胞时,Bortezomib与HT联合与各单药处理组相比,抑制率无明显提高,而联合As2O3时其抑制率优于单药处理组;作用于难治/复发白血病原代细胞时,bortezomib与HT或As2O3联合效果均呈现相加作用,其中与As2O3联合效果优于与HT联合者。结论:Bortezomib能够抑制初发及难治/复发急性白血病原代细胞增殖,与As2O3联合作用后抑制效果明显增强。     

介导细胞迁移与转化的Cdc42下游效应子信号途径分析

目的制备Cdc42定点突变体，检测各种突变体与Cdc42下游效应子的相互结合能力以及细胞迁移、转化活性，分析效应子对Cdc42诱导的细胞迁移与转化的影响。方法以含突变位点的多聚寡核苷酸为引物，通过PCR法合成Cdc42突变体。以Cdc42效应子为探针，通过下拉实验检测Cdc42突变体与Cdc42效应子的结合能力。通过transwell小室法检测表达Cdc42突变体的细胞的迁移能力。通过计数表达Cdc42突变体的细胞在软琼脂糖胶里形成的集落检测Cdc42突变体的细胞转化活性。结果活化的Cdc42（Cdc42F28L）能与所有被检测效应子（PAKl、WASP、IQGAP1、BORG3及PAR6B）结合。氨基酸100、160、183—184位点突变不影响Cdc42F28L与任何效应子的结合，而其余突变选择性地影响Cdc42F28L与以上5个效应子结合。细胞的迁移活性不受Cdc42突变体与效应子结合能力的影响，但部分突变体抑制Cdc42F28L重建与细胞迁移能力相关的细胞骨架。细胞的转化活性受到突变体与部分效应子的结合能力的影响。一些突变体能抑制Cdc42F28L激活与细胞转化相关的转录因子c—Jun，但不抑制细胞的转化。结论效应子PAK1、WASP、IQGAP1、BORG3及PAR6B均非Cdc42（活化的Cdc42，即Cdc42F28L）诱导的细胞迁移所必需；PAKl及PAR6B为Cdc42诱导的细胞转化的必备效应子。Cdc42诱导的细胞骨架重建不足以引起细胞的迁移，Cdc42对c—Jun的激活不足以诱导细胞转化。Cdc42调节的细胞转化和迁移可能涉及到截然不同的信号途径，细胞转化和迁移可能都受到多个Cdc42效应子的协同调控。     

特发性嗜酸性粒细胞增多综合征3例报告

特发性嗜酸性粒细胞增多综合征 (ｉｄｉｏｐａｔｈｉｃｈｅｐｅｒｅ ｏｓｉｎｏｐｈｉｌｉｃｓｙｎｄｒｏｍｅ ,ＩＨＥＳ)是一组原因不明、以嗜酸性粒细胞持续增高、伴有一个或多个内脏器官浸润及功能不良的综合征。ＩＨＥＳ较少见 ,且病因不清 ,临床表现复杂多样 ,初诊时常常难以确诊。我们近年来收治 3例 ,现结合文献对其诊断、鉴别诊断和治疗进行分析讨论。1　病历简介例 1,男 ,48岁。因低热、咳嗽、气喘半年于 1996年 1月2 5日入院。半年前因受凉后发热、咳嗽、气喘 ,在当地医院按“上呼吸道感染”治疗无效。病情逐渐加重 ,感心悸、气促…     

生活实例

某中年妇女,机关干部,近3年一直感觉面色苍白、头晕、乏力,长期间断性服用各种市售补血药物及保健品治疗,但效果不理想,仔细询问发现该患者月经量偏多,且有长期饮浓茶、嚼食茶叶的习惯,检查血红蛋白为82克/升,妇科检查发现子宫肌瘤,经切除子宫     

硼替佐米单独或联合三尖杉酯碱、三氧化二砷对耐药白血病细胞增殖、凋亡的影响

目的 探讨硼替佐米单独或联合三尖杉酯碱(HT)、三氧化二砷(As2O3)对HL-60/ADM多药耐药细胞株和难治、复发急性白血病原代细胞增殖、凋亡的影响.方法 以HL-60/ADM白血病细胞株及难治、复发急性白血病患者原代细胞为研究对象,采用硼替佐米单独或联合HT、As2O3,处理细胞,MTT法观察细胞增殖活力,Hoechst33342染色、流式细胞术检测细胞凋亡率及检测胞内阿霉素荧光阳性率,进一步分析硼替佐米逆转耐药能力.结果 10～50 nmol/L硼替佐米能够抑制HL-60/ADM细胞增殖并引起凋亡,其中40 nmol/L处理48 h达最大抑制效果;应用15 μmol/L As2O3和752nmoL/L HT分别与不同浓度硼替佐米联合处理HL-60/ADM细胞,其对HL-60/ADM细胞的增殖抑制率和凋亡率均高于硼替佐米单药处理组(P值均<0.05).10 nmol/L硼替佐米能使HL-60/ADM细胞对阿霉素的蓄积作用大大提高.硼替佐米对难治、复发急性白血病患者原代细胞的增殖抑制作用与HL-60/ADM细胞一致.结论 硼替佐米能够抑制HL-60/ADM细胞及难治、复发急性白血病原代细胞增殖并诱导其凋亡,与HT或As2O3联合具有相加作用.     

病毒性肝炎与免疫性血小板减少

风疹、麻疹、HIV、传单等多种病毒均可引起免疫性血小板减少,近年来的研究认为肝炎病毒亦与ITP有密切关系。肝炎病毒感染人体后主要通过免疫机制破坏肝细胞,引起一系列的症状和体征。但肝炎病毒也可通过免疫机制引起各种肝外表现,包     

抗血小板药物的副作用

血小板聚集在动脉血栓形成中起着重要作用,抑制血小板聚集将减少动脉粥样硬化性疾病的急性及慢性缺血性并发症,因此各种抗血小板药物在心脑血管缺血性疾病中应用广泛,但不可忽视其在血液学上的副作用。抗血小板药物分为以下4类:①环氧化酶抑制物(阿司匹林aspirin ASA);②双嘧达莫(dipyridamole,DMP);③选择性ADP抑制剂(噻氯匹定ticlopi-dine TP);④GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂,abcixomab。以下将对每类药物的作用、血液学副作用以及临床上如何处理进行综述。     

G-CSF对慢性粒细胞白血病患者bcr/abl+-CD34+细胞增殖、分化的影响

目的了解G-CSF对bcr／abl^＋-CD34^＋细胞增殖、分化的影响。方法采集慢性粒细胞白血病（CML）患者的bcr／abl^＋-CD34^＋细胞，分别以0、10、100、1000ng／ml的G-CSF与之共培养，并以正常骨髓CD34’细胞为对照，通过锥虫蓝拒染法、流式细胞术和光学显微镜观察研究其细胞增殖、周期分布、抗原分化和形态变化特点。结果所有实验组bcr／abl^＋-CD34^＋细胞均明显增长，其中G-CSF10ng／ml组培养48、96h，其细胞数显著高于同期无G-CSF组（P〈0．05）；而正常CD34^＋细胞数只在G-CSF存在的情况下增长明显，其中G-CSF100ng／ml组培养48、96、144h细胞数均显著高于同期无G-CSF组（P值分别为〈0．05，0．01，0．01）；G-CSF10、100、1000ng／ml组的bcr／abl^＋-CD34^＋细胞培养144h其Go／G1期比例显著低于G-CSF空白组（P〈0．05）；而正常CD34^＋细胞G-CSF10、100、1000ng／ml组培养48和96h其Go／G1期比例均明显低于无G-CSF组（P〈0．01）；bcr／abl^＋-CD34^＋细胞及正常CD34^＋细胞CD34抗原表达均随培养时间延长而下降，伴随CD33和CDl3抗原先升后降，其变化与G-CSF浓度无关。但bcr／abl^＋-CD34^＋细胞的各抗原分化显著快于正常CD34^＋细胞。bcr／abl^＋-CD34^＋细胞和正常CD34^＋细胞均随着增殖分化表现出终末细胞的形态特征。结论G-CSF能促进bcr／abl^＋-CD34^＋细胞及正常CD34^＋细胞的增殖，但并非前者增殖的必要条件。bcr／abl^＋-CD34^＋细胞比正常CD34^＋细胞分化更快，但两类细胞的分化速度均与G-CSF浓度无关。