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目的 探讨应用大肠杆菌Klenow大片段同时补平及切平DNA 3'凹端或3'凸端的可行性。方法 以构建乙型肝水(乙肝)病毒S基因的真核表达载体为例,用Kpn I及Xhol I消解含乙肝病毒前S/S基因的质粒,切除质粒中的前S区基因序列。通过Klenow大片段的核酸外切酶的活性切平质粒Kpn I切口的3'凸端,再利用其聚合酶活性补平Xhol I的3'凹端。处理后的质粒经连接酶作用而自身环化后,转化并筛选阳性克隆。结果 重组质粒获得了限制性内切酶分析的证实;对重组质粒的序列测定表明,Kpn I及Xhol I酶切端经Klenow大片段切(补)平并重新连接后其接续口端序列与预期一致。结论 对质粒作内部改建中,质粒两端分别为3'凸端及3'凹端时,可以同时利用Klenow大片段的两种酶活性将DNA末端修饰为平端,以便于使质粒自身环化。 相似文献
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Klenow大片段的聚合酶及核酸酶活性在重组质粒构建中的巧用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 探讨应用大肠杆菌Klenow大片同时补平及切平DNA3‘凹端或3‘凸端的可行性。方法 以构建乙型肝水(乙肝)病毒S基因的真核表达载体为例,用KpnⅠ及XhoⅡ消解含乙肝病毒前S/S基因的质粒,切除质粒中的前S区基因序列。通过Klenow大片段的核酸外切酶的活性切平质粒KpnⅠ切口的3‘凸端,再利用其聚合酶活性补平XhoⅠ的3‘凹端。处理后的质粒经连接酶作用而自身环化后,转化并筛选阳性克隆。结果 重组质粒获得了限制性内切酶分析的证实;对重组质粒的序列测定表明,KpnⅠ及XhoⅡ酶切端经Klenow大片段切(补)平并重新连接后其连续口端序列与预期一致。结论 对质粒作内部改建中,质粒两端分别为3‘凸端及3‘凹端时,可以同时利用Kelnow大片段的两种酶活性将DNA末端修饰为平端,以便于使质粒自身环化。 相似文献
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以家犬为实验对象,匀速静注5%山莨菪碱,观察血压及心电的变化。证明山莨菪碱为一安全可靠的托品类药物。大剂量能达到降低外周阻力的作用,使血压轻度下降。 相似文献
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日益猖獗的艾滋病的流行给人类的生存与发展构成了严重的威胁,已成为亟待解决的世界性的公共卫生问题[1]。以下分析了我院收住的10例艾滋病患者的临床表现,提示医务工作人员应高度警惕艾滋病的医源性传播。1 临床资料1.1 一般资料 10例患者,均为男性,29~64岁。广东籍5例,安徽籍1例,江苏籍1例,柬埔寨官员1例,印尼华侨2例。患者入院时临床表现分别为:极度消瘦、恶病质,发热,颜面部及全身皮肤真菌性 相似文献
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本临床实验选30例儿童,年龄从4到9岁,患下颌乳磨牙牙髓炎,需行失活干髓术。按就诊顺序随机分为两组,使用自身对照方法:单数组初诊经予暗示信号,在治疗时收集唾液,复诊时给予空白信号,同样收集唾液。双数组反之。实验结果经统计学处理,暗示组与对照组相比,两者差别在高度显著性,证明暗示法在儿童牙病治疗中有显著抑制唾液分泌作用,是一种可行的隔湿方法。 相似文献
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智齿冠周炎张口受限的一种疗法 总被引:1,自引:0,他引:1
采用甲硝唑、醋酸泼尼松龙、地卡因混合液 (简称“MPD”液 )作为冠周炎局部治疗药物 ,并与 30例冠周炎常规冲洗上药的患者对比 ,取得了满意的效果。1 材料和方法随机抽取口腔门诊 6 5例诊断为冠周炎并有张口受限的患者 (冠周脓肿或伴有间隙感染者除外 )。男 2 4例 ,女 41例。治疗前先测量患者的最大张口度 (上中切牙切端与下中切牙切端的距离 )。取 5 0g/L甲硝唑葡萄糖注射液、12 5mg的醋酸泼尼松龙注射液和 2 0g/L地卡因 ,以 2 :1:1的体积比配制成“MPD”液 ,置冰箱冷藏待用。MPD组 35例用 30ml/L过氧化氢液清洗盲袋 ,… 相似文献
100.
3种脱敏剂治疗超声龈下刮治所致根面牙本质敏感症的疗效观察 总被引:3,自引:0,他引:3
目的:评价极固宁、Gluma脱敏剂、75%氟化钠甘油治疗超声龈下刮治所致根面牙本质敏感症的临床疗效,探讨其作用机制.方法:将99例龈下刮冶术所致的774颗根面牙本质过敏症患牙随机分为3组,即极固宁脱敏组、Gluma脱敏剂组和氟化钠甘油脱敏组,分别进行脱敏治疗,观察即刻、1个月疼痛的VAS值.结果:极固宁脱敏组和Gluma脱敏剂的即刻有效率分别为94.32%、93.41%,显著优于氟化钠甘油脱敏组(71.83%),而脱敏后1个月,3组间无显著性差异.结论:极固宁、Gluma脱敏剂对治疗龈下刮治后产生的牙本质过敏有着较为理想疗效. 相似文献