黑斑息肉病LKB1基因胚系突变和肿瘤易感性研究

目的　检测黑斑息肉病患者LKB 1基因胚系突变及特点 ,并调查国内黑斑息肉病患者的肿瘤发生率和肿瘤发生特点。方法　 (1)对 12例确诊的黑斑息肉病患者 (9例家族性 ,3例散发性 )取血 ,提取血脱氧核糖核酸 (DNA) ,分别以多聚酶链反应 (PCR)扩增LKB 1的 9个外显子 ,并逐一测序 ;(2 )综合分析作者搜集的 5个大的黑斑息肉病家系 32例患者和 7例散发性患者 ,并结合国内近 10年来报道的较大家系和有关文献 34篇共计 16 9例患者 ,总结恶性肿瘤的发生率和特点。结果　 (1) 12例患者中 ,7例有LKB 1的胚系突变 ,多数突变为病理性突变 ;(2 )综合分析 16 9例患者中 ,恶性肿瘤发生率为 2 0 1% ,家族性患者 90例中恶性肿瘤发生率为2 0 .0 %。发病较多的肿瘤为结肠癌 12例 ,胃癌 5例 ,直肠癌、小肠癌和宫颈癌各 3例 ,卵巢癌和骨肉瘤各 2例 ,病理类型以低分化黏液腺癌为多 ,患者平均确诊年龄 32 2岁。结论　 (1)LKB 1基因胚系突变是本病重要的分子遗传学基础 ,LKB 1基因突变检测可用于多数患者的遗传学诊断 ;(2 )黑斑息肉病患者是典型的肿瘤高发人群 ,常见肿瘤依次为结直肠癌、胃癌、小肠癌、宫颈癌和卵巢癌等 ,恶性肿瘤发病年龄轻 ,分化较差。     

APC基因表达异常在国人大肠肿瘤形成中的作用研究

应用免疫组化和斑点杂交技术检测３０例大肠癌和１５例大肠腺瘤ｍＲＮＡ和蛋白表达水平，结果显示ｐ３００ＡＰＣ在大肠正常粘膜，腺瘤和癌组织的表达分别为７０％、６６．７％、２０％，在伴有重要度非典型性增生腺瘤中的２５％。     

反义人类端粒酶 RNA逆转录病毒载体构建及其对结直肠癌细胞的抑制作用

目的 研究反义人类端粒酶RNA逆转录病毒载体对结直肠癌HT29细胞端粒酶活性及细胞生长的抑制作用。探讨以端粒酶为酸点的结直肠癌基因治疗的可能性。方法 将端粒酶hTR的cDNA反向插入逆转录病毒载体pLXRN中，转染包装细胞PT67后获得反义重组病毒，感染结直肠癌HT29细胞，采用RT-PCR检测hTR表达。端粒酶重复扩增法（telomerase repeat amplification protocol,TRAP)检测端粒酶活性，绘制生长曲线了解细胞生长状态，倒置显微镜观察和DNA片段电泳检测细胞凋亡。结果 反义hTR作用后的结直肠癌细胞hTR表达下降，端粒酶活性和细胞生长受到明显抑制，细胞出现凋亡。结论 反义hTR对结直肠癌HT29细胞的生长和端粒酶活性具有明显的抑制人舰艇可能以hTR为靶点对结直肠癌进行基因治疗。     

LOSS OF HETEROZYGOSITY INVOLVING THE APC TUMOR SUPPRESSOR GENE IN HUMAN COLORECTAL CARCINOMA

ＬＯＳＳＯＦＨＥＴＥＲＯＺＹＧＯＳＩＴＹＩＮＶＯＬＶＩＮＧＴＨＥＡＰＣＴＵＭＯＲＳＵＰＰＲＥＳＳＯＲＧＥＮＥＩＮＨＵＭＡＮＣＯＬＯＲＥＣＴＡＬＣＡＲＣＩＮＯＭＡ￥ＸｕＷｅｎｈｕａｉ；徐文怀；ＹａｎｇＤｉｎｇｃｈｅｎｇ；杨定成（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆ...     

nm23—H1等位基因缺失与大肠癌转移相关性研究

ｎｍ２３基因是近年来发现的与肿瘤转移表型抑制相关的基因，称之为转移抑制基因。ｎｍ２３基因的等位基因缺失、突变和低表达与多种人类肿瘤转移相关。ｎｍ２３基因包括ｎｍ２３－Ｈ１及ｎｍ２３－Ｈ２两种亚型。我们利用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交技术检测了２３例大肠癌及其相应正常粘膜基因组ＤＮＡｎｍ２３－Ｈ１等位基因缺失情况，结果发现５例存在ｎｍ２３－Ｈ１等位基因缺失。有淋巴结、肝或其它脏器转移者，ｎｍ２３－Ｈ１等位基     

胃癌c－Ha－ras基因突变分析方法的建立及临床应用研究

本文应用多聚酶ＤＮＡ链延伸反应产物限制性酶切片段多态性分析（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）和单链构象多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）两种方法同时检测了２０例胃癌中ｃ－Ｈａ－ｒａｓ基因突变．本文显示ＰＣＲ－ＲＦＬＰ和ＰＣＲ－ＳＳＣＰ均是检ｃ－Ｈａ－ｒａｓ基因突变的简便、快速和敏感的方法，适用于临床大批量肿瘤标本的检测。     

C－Ha－ras癌基因高表达与胃癌临床行为的关系

应用ＲＮＡ斑点杂交、Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ和免疫组织化学技术检测了２０例胃癌病员癌组织中ｃ－Ｈａ－ｒａｓｍＲＮＡ和Ｐ２１蛋白的表达。统计学结果表明，胃癌组织中ｃ－Ｈａ－ｒａｓｍＲＮＡ过度表达和肿瘤淋巴结转移状态密切相关（Ｐ＝０．０３３），随着胃癌临床病程进展，肿瘤细胞中ｃ－Ｈａ－ｒａｓＰ２１表达水平逐渐升高（Ｐ＝０．１１２）。提示ｃ－Ｈａ－ｒａｓ癌基因高表达可能是胃癌形成过程中的关键步骤，ｃ－Ｈａ－ｒａｓ癌基因产物可作为胃癌新的生物学标志来判定肿瘤的预后并指导临床治疗。     

膜型基质金属蛋白酶-1在人胃癌中的表达

目的:研究膜型基质金属蛋白酶1(membranetype1matrixmetalloproteinase,MT1MMP)基因mRNA在人胃癌组织中的表达及其与胃癌浸润转移和临床分期的关系。方法:应用RTPCR半定量的方法检测MT1MMP基因mRNA在30例胃癌组织、正常粘膜和转移淋巴结中的表达。使用SPSS/PC+统计软件进行t检验和多因素分析。结果:MT1MMP基因的mRNA在肿瘤组织和转移淋巴结中分别有76.7%(23/30)和76.9%(10/13),高于正常组织。按TNM分期,MT1MMP在Ⅰ、Ⅱ期与Ⅲ、Ⅳ期的表达差异有显著性。经多元回归分析,MT1MMP基因的表达与肿瘤的浸润深度、有无淋巴结转移及有无癌栓正相关。结论:MT1MMP基因参与胃癌的直接浸润和转移,可能成为一种潜在的肿瘤生物学标记物。     

大肠癌中多药耐药基因表达的临床意义及对预后的影响

目的：探讨多药耐药基因1(MDR1)表达产物P—糖蛋白(P—gp)在大肠癌中表达情况及其对预后的影响。方法：用免疫组织化学方法测定48例大肠癌及正常肠粘膜组织中P—gp表达情况，并与各临床指标及预后进行相关性分析。结果：上述组织中均存在P—gp的高表达率，两者之间无显著性差异；P—gp的表达与大肠癌临床分期、组织学类型等临床资料无关，但与预后有关，P—gp高表达者预后差，统计学上有显著性差异。结论：由于大肠癌中P—gp的高表达率，因此推测多数大肠癌患者对抗肿瘤化疗药物具有先天耐药性，这是大肠癌化疗疗效不佳的原因之一。肿瘤组织中P—gp高表达患者预后差。