早期梅毒螺旋体感染最适检测方法的探究

目的：探究早期梅毒螺旋体感染的最适检测方法。方法：采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）、梅毒螺旋体血凝试验（TPHA）、梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验（TP-ELISA）、快速血清反应（RPR）法对102例早期疑似梅毒患者、30例非梅毒患者分泌物、血清进行梅毒螺旋体（TP）检测,比较4种检测法灵敏度及特异性。结果：102例早期疑似梅毒患者FQ-PCR检出92例检出率90.20%,TPHA检出86例检出率84.31%,TP-ELISA检出88例检出率86.27%,RPR检出70例检出率68.6%。30例非梅毒患者FQ-PCR检测全阴性,TPHA检出2例阳性,TP-ELISA检出1例,RPR检出6例阳性。结论：早期梅毒患者诊断首选FQ-PCR进行分泌物或溃疡创面渗出物检测TP-DNA,其次选用TPHA和TP-ELISA进行血清学检测,RPR在梅毒感染早期检出率较低,易出现漏检现象。     

头孢地尼分散片治疗儿童急性中耳炎的临床效果

目的为了进一步提高儿童急性中耳炎的临床治疗效果,分析和探讨给予头孢地尼分散片治疗的优势。方法将2012年2月至2014年2月来我院耳鼻喉外科就诊的144例儿童急性中耳炎患者作为研究对象并按照随机双盲对照分配的原则分为观察组(72例、93耳)和对照组(72例、91耳),观察组患儿治疗上予以头孢地尼分散片口服治疗,对照组患儿治疗上主要给予阿莫西林口服治疗,对比和分析两组患者的临床治疗效果。结果经过对比研究分析发现,观察组的72例患者中治疗的总有效率(95.70%)显著高于对照组的总有效率(78.02%),两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论对于儿童急性中耳炎患儿临床上予以头孢地尼分散片口服治疗,不仅治疗效果显著,而且无明显的药物不良反应,值得推广。     

HBV反义全基因真核细胞表达载体的构建及在肝癌细胞内的表达

１．材料与方法：乳哺动物细胞表达载体ｐＢＫ－ＣＭＶ,长约４．５ｋｂ,带有Ｔ_７公用序列。ｐＣＰ１０是ｐＢＲ３２２ＥｃｏＲＩ位点中插入双拷贝头尾相接的ＨＢＶａｙｗ亚型全基因ＨＢＶＤＮＡ重组质粒。ＰＣＲ引物ＸＩ１：１４２８－１４４８ｎｔ５'ＣＧＴ　ＣＣＣＧＴＣ　ＧＧＣＧＣＴＧＡＡＴＣＣ３',ＸＩ_２：１６７２－１６５３ｎｔ５'ＡＧＴＣＣＡＡＧＡＧＴＣＣＴＣＴＴＡＡＧ３'。人肝癌细胞系ＳＭＭＣ－７７２１,出上海细胞所提供。将ＥｃｏＲＩ酶切后回收的全基因ＨＢＶ片段。在Ｔ_４ＤＮＡ连接酶作用下,与ＥｃｏＲＩ酶切…     

手足口病病原体实时荧光RT-PCR反应体系的建立与临床应用

目的 建立一种快速、准确、特异件高的方法 检测手足口病病原体.方法 根据引起手足口病常见致病原肠道病毒71(EV71)、柯萨奇病毒A16(CA16)及肠道病毒(EV),设计相应的引物、探针对35例临床诊断的手足口病患儿及20例正常健康婴儿的粪便进行EV、EV71、CA16三种病原体实时荧光RT-PCR检测,同时对55分标本进行EV71病毒培养分离.结果 35例临床诊断手足口病患儿粪便中EV全部阳性,EV71阳性25例,CA16阳性8例,其中3例为EV71、CA16同时阳性,与临床诊断符合率为85.71%,20例健康体检婴儿粪便中EV病毒5例阳性,EV71、CA16均阴性.结论 荧光RT-PCR对手足口病病原体检测准确性高、特异性强,具有快速、廉价等特点,适合于手足口病的早期诊断.     

外周血淋巴细胞中乙肝病毒cccDNA检测研究

目的做外周血淋巴细胞中乙肝病毒cccDNA检测研究,并探讨其临床意义。方法采用淋巴细胞分离液分离外周血淋巴细胞,用荧光定量PCR法检测外周血淋巴细胞中cccDNA含量。结果36例CAH患者中检出29例阳性(80.56%),61例CPH患者中检出32例阳性(52.46%),59例ASC标本中检出1例阳性(0.02%)。47例健康人标本检测结果均为阴性。CAH组、CPH组、携带者及阴性对照组之间互相存在统计学差异(P<0.05),携带者组和阴性对照组之间无统计学差异。对定量资料的统计学分析显示:CAH组检测的基因拷贝数较CPH组基因拷贝数明显增高,两者具有统计学差异(P<0.05)。结论(1)cccDNA在外周血淋巴细胞中的存在,对于慢性乙肝病毒持续感染状态的建立和维持,可能具有重要意义。(2)检测外周血淋巴细胞乙肝病毒cccDNA存在及其含量高低,可以作为评估临床抗乙肝病毒治疗有效性的一个参考指标。(3)该检测还可用于乙肝患者治疗中的复发及预后判断。     

血清透明质酸和胶原Ⅳ检测对诊断慢性肝炎肝纤维化的意义

透明质酸(Hyaluronic Acid,HA)是人体基质的主要成分之一,由间质细胞合成,经淋巴系统入血,大部分迅速被肝脏内皮细胞摄取及降解.由于HA主要在肝脏内代谢,肝病患者尤其是肝硬化患者HA代谢障碍,血中HA浓度明显升高,因而是临床判断肝硬化的生化指标之一.Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)是基底膜的主要组成部分,正常情况下主要分布于血管、胆管的基底膜中,其在血清中可出现三种主要降解片段,它们在血清中     

鼻内镜手术治疗108例慢性鼻窦炎疗效评价

目的探讨鼻内镜手术治疗慢性鼻窦炎的临床疗效。方法回顾性分析常州市第三人民医院近年来收治的108例慢性鼻窦炎患者的临床资料。结果 108例慢性鼻窦炎患者经过鼻内镜手术治疗,治愈89例,好转13例,无效6例,总有效率为94.4%。其中,Ⅰ型Ⅰ期,Ⅰ型Ⅱ期,Ⅱ型Ⅰ期的总有效率为100.0%,且Ⅰ型和Ⅱ型的总有效率与Ⅲ型比较,有显著性差异,P<0.05。结论鼻内镜手术治疗慢性鼻窦炎的临床疗效确切,创伤小,恢复快,值得临床推广使用。     

转基因表达干扰素-α1抑制乙型肝炎病毒的实验研究

目的 研究转基因表达干扰素-α1(IFN-α1)对乙型肝炎病毒(HBV)的抑制作用.方法 采用分子克隆技术,将HBV全基因插入真核细胞表达载体pBK-CMV中,用FuGENETM6,把pBK-HBV转染人肝癌细胞系SMMC-7721,建立HBV瞬时表达和稳定表达两种细胞模型;导入腺相关病毒载体介导的人IFN-α1重组体(pWP8A-IFN-α1),研究转基因表达IFN-α1对HBV的抑制作用.结果 pWP8A-IFN-α1转基因表达,在HBV瞬时表达的细胞培养系统中,对HBV有显著的抑制作用,HBeAg的产生被完全抑制;在HBV稳定表达系统中,对细胞培养液HBeAg的抑制率为70.6%,3 000 IU/ml外源重组IFN-α1b对HBeAg抑制率为53.6%.结论 转基因表达IFN-α1,能有效抑制HBV标志表达,其抑制作用与3 000 IU/ml的外源重组IFN-α1b的抑制作用相当.因而有可能应用转基因IFN-α1对HBV感染人群进行基因治疗.     

PCR试纸条检测乙肝病毒DNA新方法研究

目的通过和荧光定量PCR法的对比,试验一种乙肝病毒DNA检测的新方法（PCR试纸条）的特异性和敏感性,并评价其应用前景。方法对比检测4组不同HBV—DNA拷贝数的标本,分析PCR试纸条法检测HBV—DNA的敏感性和特异性。结果在18例〉10^7／ml的标本中检出了强阳性结果17例,27例10^5～10^7标本检出了中等阳性结果23例,在27例10^3-10^5标本中检出弱阳性结果22例,经统计学检验均有显著差异。而28例〈10^3标本检测结果均为阴性。结论研究结果显示该PCR杂交试纸条法检测HBV—DNA能够简便快速地获得HBV—DNA半定量结果,不需荧光定量PCR仪,检测成本低,易于在基层医院推广使用。     

浙江省乙型肝炎病毒B、C基因型感染者临床和肝组织病理的比较

目的了解浙江省乙型肝炎病毒B、C基因型慢性HBV感染者的肝组织病理学变化。方法采用荧光PCR方法检测浙江省慢性乙型肝炎患者HBV基因型,并与慢性肝炎的肝功能、凝血酶原时间、乙型肝炎病毒标志、HBV DNA定量、肝组织炎症分级及纤维化分期进行比较。结果1.浙江省HBV基因型B型、C型占94.53%;2.C基因患者HBeAg阳性率及HBV DNA定量略高于B基因患者82.00%vs77.36%;(7.09±1.02)lg vs(6.88±1.26)lg,但差异无统计学意义(P>0.05);3.肝组织学炎症分级和纤维化分期以B、C混合型为重,C型重于B型,B型、C型、B+C型肝组织学炎症分级分别为1.85±1.27vs1.93±1.32vs2.93±0.74;纤维化分期分别为1.86±1.31vs1.84±1.29vs2.95±0.71,三者差异有统计学意义(P<0.01)。结论浙江省HBV基因型以B、C型为主,C型、BC混合型肝组织损害严重。