HPV18E77-15免疫原性的实验研究

目的 鉴定抗原肽HPV18 E77-15能否诱导HLA-A2+健康供者的外周血淋巴细胞(PBL)产生抗原肽特异性细胞毒性T细胞(CTL),判断其是否具有免疫原性.方法 通过体外细胞培养技术分为两组,实验组:负荷抗原肽为HPV18E77-15,对照组:负荷的抗原肽为HBVc17-28,采用抗原肽负荷外周血单个核细胞(PBMC)及T2 细胞作为抗原呈递细胞,重复刺激HLA-A2 阳性健康供者的外周血淋巴细胞(PBLs),1 周1次,共3次;分别在第1 轮刺激后和第3 轮刺激后,采用RPE 标记的抗原肽特异性五聚体和FITC标记的CD8+抗体通过流式细胞仪检测抗原肽所诱导产生的抗原肽特异性CTL 的频率.结果 在流式细胞仪检测中,实验组第1轮刺激后所选淋巴细胞群中CD8+五聚体+ 双阳性的抗原肽特异性CTL 为(1.87±0.01)%,第3 轮刺激后抗原肽特异性CTL 增至(15.73±2.47)%;而对照组中未检出抗原肽特异性的CTL细胞增殖.结论 抗原肽HPV18E77-15能够诱导产生抗原肽特异性CTL增殖,具有良好的免疫原性,可能成为针对HPV18感染的治疗性多肽疫苗的候选表位.     

核小体的提取纯化及鉴定

目的探索一种操作简便、实用的核小体提取方法.方法取无菌新鲜鸡血,提取细胞核,用葡萄球菌核酶消化后裂解、离心,获得上清组分用连续性密度梯度蔗糖进行分离,收集分子量350 bp左右的组分.结果2%琼脂糖电泳显示该组分含有长度为150 bp的双链DNA,15%SDS-PAGE电泳显示该组分含有组蛋白H2A、H2B、H3和H4;本实验分离的核小体在0 ℃条件下存放4周未见DNA成分和组蛋白成分发生解聚.结论该方法可以正确的分离出核小体,且具有良好的稳定性,为深入研究核小体在SLE自身抗体产生中的作用打下基础.     

咪喹莫特合他扎罗汀治疗女性鲍温样丘疹病

目的：探讨5％咪喹莫特乳膏与0．05％他扎罗汀凝胶交替外用治疗女性鲍温样丘疹病的临床疗效和安全性。方法：治疗组54例采用5％咪喹莫特乳膏与0．05％他扎罗汀凝胶交替外用治疗，1天1次；对照组47例以二氧化碳激光治疗。结果：采用咪喹莫特乳膏与他扎罗汀凝胶交替外用治疗的有效率和激光治疗比较，差异无显著性意义（P〉0．05）；但其复发率明显低于对照组（P〈0．01）。结论：咪喹莫特乳膏与他扎罗汀凝胶交替外用治疗女性会阴鲍温样丘疹病是一种较为有效、安全的方法，能明显降低本病的复发率。     

人乳头瘤病毒16 E7抗原细胞毒性T细胞预测表位合成肽的纯化与鉴定

人乳头瘤病毒(HPV)16基因组中E7基因主要与细胞转化功能及致癌有关,从感染早期到肿瘤形成期均可持续检测到E7蛋白的表达。本研究选用已预测出的HLA-A2限制性CTL表位^[1],采用固相合成法合成多肽,产物经反相高效液相(RP-HPLC)纯化、分析和质谱分析鉴定,所获取的高纯度肽为预测表位抗原性的检测奠定了基础。     

祛风止痒口服液治疗急性荨麻疹作用机制的实验研究

目的：探讨祛风止痒口服液治疗急性荨麻疹的作用机制。方法：运用双抗体夹心ELISA法检测急性荨麻疹患者治疗前后血清IL-2、IL-4水平以及外周血体外培养产生IL-2、IL-4的水平。结果：经祛风止痒口服液治疗的急性荨麻疹患者外周血单一核细胞在体内和体外产生IL-2的水平显著升高，产生IL-4的水平明显降低。结论：祛风止痒口服液治疗急性荨麻疹的作用机制可能在于调节外周血单一核细胞分泌IL-2和IL-4等Th1和Th2类细胞因子的水平，以消除变应性炎症和恢复正常免疫功能。     

负载人乳头瘤病毒16型E7多肽树突细胞诱导抗原特异性细胞免疫反应

目 的 观 察 负 载 人 乳 头 瘤 病 毒 16 型 (H PV16)E749-57 多 肽 树 突 细 胞 (DC)体 外 诱 导 针 对H PV16 肿 瘤细 胞 的特 异性 细 胞免 疫反 应 。方 法 用粒 细 胞-巨 噬细 胞 集落 刺激 因 子(GM -CSF)及 白 介素 4(IL-4)从 健康 成人 外 周血 单一 核 细胞 诱导 DC 并 负载 H PV 16 E749-57 多肽 ,流 式细 胞 仪检 测 DC 表 面 抗 原;混 合淋 巴 细 胞 反应 观 察 DC 对 同 种 淋 巴 细 胞 增 殖 的 激 发 效 应 ;乳 酸 脱 氢 酶 (LDH )释 放 法 评 价 DC 诱 导 的细胞 毒 性 T 淋 巴 细 胞 (CTL)对 Caski肿 瘤 细 胞体 外 杀 伤 效应 。 结 果 负 载 H PV16 E749-57 多 肽 的 DC 表面表 达 CD 1a(58.4 ±6.7)%、CD 80(70.6 ±3.4)%及 H LA -DR (74.8 ±4.2)%分 子 ;具 有 刺 激 同 种 T 淋 巴 细 胞增 殖的 能 力 ;其 诱 导 的 抗 原 特 异 性 CTL 对 Caski肿 瘤 细 胞 产 生 特 异 性 杀 伤 ,而 对 SiH a、A N3CA 肿 瘤 细 胞无明 显 杀伤 作用 。 结论 负 载 H PV16 E749-57 多 肽的 DC 体 外可 诱导 高 效、特 异 性的 CTL 效应 。     

大海马不同萃取物的抗肿瘤和抗氧化活性研究

目的 检测新鲜大海马样品的抗肿瘤和抗氧化活性。方法 采用大海马新鲜样品进行冷冻干燥,以75%乙醇提取,并进一步以乙酸乙酯、正丁醇和水对提取物进行不同极性部位组分的萃取,对各萃取物分别开展抗肿瘤和抗氧化活性检测和比较,其中抗肿瘤活性检测采用人胶质瘤细胞LN229,抗氧化活性检测采用DPPH法、ABTS法和FRAP法。结果 大海马乙醇提取物的水相萃取物对人胶质瘤细胞LN229没有灭活作用,但正丁醇相和乙酸乙酯相萃取物均显示出显著的抗肿瘤活性,其中乙酸乙酯相萃取物的抗肿瘤活性较高;大海马的三种萃取物均具抗氧化活性,其中乙酸乙酯相萃取物在DPPH法和FRAP法所得结果中均表现出最高的抗氧化活性,水相萃取物在ABTS法中显示出最高的抗氧化活性。结论 研究结果为海马活性成分尤其是中低极性活性成分在海洋药物和保健品领域的开发提供重要参考。     

HPVl6E7_(11-20)-HSP110复合物的构建及其免疫原性研究

宫颈癌是一种危害妇女健康的常见恶性肿瘤,发病率仅次于乳腺癌,其发生发展主要与高危型人乳头状瘤病毒(human papillomavims,HPV)16和18型感染密切相关~([1-2]).因此,针对HPV研究、开发宫颈癌治疗性疫苗具有重要的临床意义.     

Foxpl及Ki-67在皮肤基底细胞癌的表达

目的：检测皮肤基底细胞癌（BCC）组织中Foxpl和Ki一67蛋白的表达。方法：采用免疫组化方法检测BCC组织石蜡切片中Foxpl和Ki-67蛋白的表达。结果：40例BCC标本中Foxpl蛋白的表达率为82．5％,Ki-67蛋白的表达率为75％,均显著高于对照组（均P〈O．01）。结论：Foxpl和Ki-67可能参与BCC的发生和发展。     

皮肤性病科临床技能操作培训实验室化的初步建设及效果评价

由于受到医疗环境、教学设施、教学方法、学生学习积极性等诸多因素的影响,提高实习医生的临床操作技能,一直是临床实习带教工作中的难点。有效避免紧张的医患关系和相关法律法规的限制因素,对教学设施和教学方法予以改进,探索一套较为完善的、强化实习医生操作技能的教学手段,是解决这一教学难点的关键环节。我院皮肤性病学教研室采用操作培训实验室化的途径,为本学科的实习教学作了有益的尝试。