蛋白芯片用于筛选急性髓系白血病患者血清标志物的初步研究

目的利用生物素标记蛋白芯片筛选急性髓系白血病(AML)患者血清中可用于AML早期诊断、预后判断的血清标志物。方法采用生物素标记抗体芯片技术,对11名不同细胞遗传学和分子生物学特征的AML患者[分为预后良好组(5名),预后不良组(6名)]和5名健康体检者(对照组)的血清检测,采用芯片分析软件提取数据,获得的数据采用AAH-BLG-1数据分析软件作统计分析。结果 2个AML组与正常对照组相比,生长因子MFG-E8、osteoactivin、Hepassocin、M-CSF、M-CSF R、Insulin R,白细胞介素家族的IL-20、IL-3、IL-1 F8、IL-2 R alpha、IL-2 R beta、IL-1 R6凋亡因子(Fas)、粘附因子(ICAM-3)、趋化因子(CCL21)、载脂蛋白(Lipocalin-1)、跨膜蛋白(TMEFF1)、基质金属蛋白酶(MMP-3)和肿瘤坏死因子受体超家族的GFR alpha-4、TNF-alpha、TNFRF18、TNFRSF21等22个标志因子水平明显上调(P<0.05);预后不良组与预后良好组相比,IL-17RD、VEGF-D、IGFBP1、基质金属蛋白酶抑制剂TIMP-2、血管生成抑制剂Endostatin、蛋白水解酶uPA、趋化因子MIP-2、FGF-19、结合蛋白LBP、粘附分子L-selectin、载脂蛋白SAA等11个标志因子水平明显上调(P<0.05)。结论生物素蛋白质芯片共检测出33个AML血清标志物,证实这些标志物参与了AML细胞趋化、黏附、迁移、降解基质、恶性增殖、抗凋亡等过程。蛋白芯片有助于早期正确判断AML患者的预后,指导不同强度的个体化治疗。     

自体外周血干细胞移植治疗急性淋巴细胞白血病的临床观察

目的　评价自体外周血干细胞移植 (APBSCT)治疗急性淋巴细胞白血病 (ALL)的疗效。方法　以APBSCT治疗ALL患者共 1 7例 ,其中 ,ALL首次完全缓解 (CR1 ) 1 1例 ,ALL第 2次完全缓解 (CR2 ) 6例。动员方案为 :MOEP/CMOP +G CSF ,获得MNC中位数为 4 .8× 1 0 8/kg ,CD34+ 细胞为 5 .7× 1 0 6/kg ,CFU GM为 4 .1× 1 0 5/kg。预处理方案为 :Cy/TBI(1 5例 )及IEAC(2例 )。结果　所有患者移植后造血功能均快速重建 :ANC >0 .5× 1 0 9/L ,PLT >2 0× 1 0 9/L ,分别为 (1 0± 3)d、(1 5± 5 )d。中位随访时间 1 3个月 (2～ 2 6个月 ) ,其中 ,ALL CR1患者持续完全缓解 9例 ,死亡 2例 ;ALL CR2患者持续完全缓解 3例 ,死亡 3例。结论　APBSCT是急性淋巴细胞白血病一种安全有效的治疗方法 ,在首次完全缓解时移植疗效较好     

巨幼细胞性贫血发展到难治性贫血转变为急性髓系白血病1例

患者，女，13岁。1998年6月始无明显诱因感到乏力、纳差，伴食欲不振、面色苍白，并感逐渐加重，于1998年10月20日入院。患者既往有偏食习惯。入院体检：体温36．7℃，脉搏108次／min，消瘦，重度贫血貌，皮肤无淤点淤斑，浅表淋巴结不大，巩膜无黄染，舌面光滑，舌乳头萎缩，味觉减退。     

自体外周血干细胞移植治疗血液肿瘤56例疗效分析

目的：评价自体外周血干细胞移植(APBSCT)治疗血液肿瘤的疗效。方法：自2001年3月～2003年5月，以APBSCT治疗血液肿瘤患者共56例，年龄2～59岁(中位年龄25岁)；其中，急性淋巴细胞白血病(ALL)17例，急性髓细胞白血病(AML)3例，非霍杰金淋巴瘤(NHL)30例，霍杰金淋巴瘤(HD)4例，多发性骨髓瘤(MM)2例。动员方案为：联合化疗 G-CSF。预处理方案：包括含TBI(24例)与不含TBI的高剂量化疗方案(32例)。结果：所有患者移植后造血功能均快速重建。12例患者于移植后2～13个月分别死于感染和疾病进展。其余患者已无病存活2～26个月。ALL首次完全缓解(ALL-CR1)的11例患者中9例存活(即ALL-CR1 9／11)，再次完全缓解(ALL-CR2)的6例患者中3例存活(即ALL-CR2 3／6)。其他血液肿瘤患者存活情况分别为：AML-CR1 1／2，AML-CR2 0／1；NHL-CR1 20／21，NHL-CR2 3／5，NHL-NR 2／4；HD 4／4；MM 2／2。结论：APB-SCT是血液肿瘤安全有效的治疗方法，对首次治疗获得完全缓解的NHL(NHL-CR1)疗效最好，可显著改善初次完全缓解的ALL(ALL-CR1)患者预后。     

人脐血基质细胞分离培养的实验研究

目的：探讨人脐血CD34^ 细胞群中分离培养造血基质细胞的可行性。方法：分离人脐血CD34^ 细胞，采用Dexter法培养，对贴壁细胞进行观察和鉴定。结果：Dexter培养9～14d(平均11．2d)开始形成基质细胞集落，15～22d(平均19．6d)集落数量最多，培养28d贴壁细胞铺满培养皿底。细胞类型以成纤维样细胞、巨噬样细胞、“小圆”类细胞为主；细胞化学染色：非特异性酯酶染色(NSE)、糖原染色(PAS)：100％阳性，过氧化物酶染色(POX)：阴性，碱性磷酸酶(ALP)：28％阳性；免疫组化染色：CD106：阳性96％，CD29：93％阳性，CD44：98％阳性，CD45：阴性，CD50：62％阳性，纤维粘连蛋白(Fn)：92％阳性，层粘连蛋白(Lm)：74％阳性，胶原Ⅳ：83％阳性。结论：人脐血中存在造血基质细胞的前体细胞。     

抑制SDF-1活性对人急性髓性白血病HL-60细胞系增殖的影响

本研究通过观察抑制SDF-1活性对HL-60细胞增殖活性的影响，探讨趋化因子SDF-1在维持HL-60细胞生存能力中的作用。培养骨髓基质细胞，并与HL-60细胞共培养，采用SDF-1受体CXCR4单克隆抗体阻断SDF-1生物活性后，用MTT法检测HL-60细胞活力、用流式细胞术观察HL-60细胞增殖周期变化、检测细胞膜表面CXCR4表达，同时检测CXCR4单克隆抗体应用前后HL-60细胞内钙离子浓度变化。结果显示，抗CXCR4单克隆抗体可下调HL-60细胞膜表面CXCR4的表达，同时处于G0／G1期的细胞增多，处于S期的细胞减少，而白血病细胞存活率下调，细胞内钙离子浓度降低。结论：抑制SDF-1活性可在一定程度上抑制白血病细胞的增殖。     

系统性红斑狼疮相关性再障1例

系统性红斑狼疮(SLE)是一种可累及全身各器官系统的自身免疫性疾病，血液系统同样可以受累及。而引起再生障碍性贫血(再障)则非常罕见，临床称之为SLE相关性再障(SLE Assoiated Aplastic Anemia，SLEAAA)。到目前为止，国内仅有相关个案报道，我科近日收治1例SLE相关性再障，现报告如下。     

流式细胞术在首诊非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯中的作用

目的 探讨流式细胞术(FCM)在诊断非霍奇金淋巴瘤(NHL)骨髓浸润中的价值.方法 采用骨髓涂片和切片联合FCM检测NHL骨髓侵犯.骨髓涂片经瑞氏-吉姆萨液染色,分类计数瘤细胞.骨髓切片采用塑料包埋法制作组织切片,常规苏木精-姬姆萨-酸性品红(HGF)染色.流式细胞仪每份标本分析10 000个细胞.检测方案采用CD45/侧向散射角(SSC)设门,重点分析幼稚细胞群及成熟淋巴细胞群,经前向散射角(FSC)、SSC、异硫氰酸荧光素(FITC)标记的单克隆抗体(McAb1-FITC)、藻红蛋白(PE)标记的单克隆抗体(McAb2-PE)、CD45-Percp五参数分析确定免疫表型.结果 17例骨髓首诊病例中,骨髓穿刺(BMA)确诊12例(70.6%),骨髓活检(BMB)确诊15例(88.2%),FCM确诊17例(100%),FCM确诊率最高,较BMA差异有统计学意义(P<0.05),较BMB差异无统计学意义(P>0.05).BMB检查发现NHL骨髓浸润方式间质型、结节型和弥漫型均易见,分别占23.5%,23.5%和52.9%.FCM检测结果为B细胞淋巴瘤13例(76.5%)、T细胞淋巴瘤和NK/T细胞淋巴瘤4例(23.5%).结论 骨髓涂片和骨髓切片检查是诊断NHL-BMI的基本方法,可以做出定性诊断.FCM可进一步做出明确的病理诊断.对于骨髓检查首诊NHL-BMI的病例,3种技术的联合应用可以提高NHL-BMI的诊断正确性和阳性率.