人胰岛素样生长因子-1基因的克隆、表达及生物活性分析

采用RT PCR方法 ,从人扁桃体组织中扩增得到人胰岛素样生长因子 1 (IGF 1 )cDNA ,利用基因重组技术将该基因片段重组于pcDNA3 .1 ( +)真核表达载体上 ,成功构建了 pcDNA/I重组表达载体。应用脂质体介导的基因转移技术将重组质粒体外转染至人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)。MTT法检测结果表明 :重组质粒转染能明显促进内皮细胞的分裂增生。将重组质粒通过脂质体介导 ,体外转染至人肾细胞 2 93细胞系进行表达 ,经G41 8筛选获得稳定表达的重组质粒细胞克隆 ,表达产物经鸡胚绒毛尿囊膜试验表明有促血管生成活性。此结果为研究IGF 1对血管内皮细胞作用的分子机制 ,以及利用IGF 1基因治疗肢体及冠状动脉缺血性疾病等的研究奠定了实验基础。     

早期胃癌的内镜下特征分析

目的探讨早期胃癌的内镜下特征。方法对2010年1月至2014年7月北京军区总医院消化科胃镜检查发现并经病理确诊的119例早期胃癌患者（130处病灶）和695例进展期胃癌患者（695处病灶）的临床资料进行回顾性总结,对比分析早期胃癌的内镜下特征。结果早期胃癌癌灶多位于胃窦部（34．6％,45／130）,镜下形态分类以0-Ⅱc型最多见（55．4％,72／130）,白光内镜下97处（74．6％）病灶可见色调发红、121处（93．1％）具有清晰的边界、46处（35．4％）边缘部有明显“毛刺征”、116处（89．2％）具有明显不规则的表面形态或颜色、35处（26．9％）表面可见并发的溃疡、57处（43．8％）可见自发性出血、108处（83．1％）周边背景黏膜有肠化／萎缩改变、23处（17．7％）表面可见白色不透明物质,病理分型以分化型为主（90．8％,118／130）;进展期胃癌癌灶多位于胃底／贲门部（39．1％,272／695）,病理分型以未分化型为主（81．3％,565／695）。两者在病变分布和病理分型构成方面差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论清晰的边界和表面不规则是早期胃癌的重要内镜下特征,胃镜检查时重视上述特点的观察将有助于早期胃癌的发现和诊断。     

心脏康复莫轻视

<正>俗话说“三分治、七分养”，心脏疾病也是这样，治疗过程并不是一蹴而就的，在解决了心脏疾病急性期的心肌坏死、疼痛、水肿等问题后，在病情较轻或恢复期时，就是开始心脏康复的过程了。心脏康复是一个囊括医学评价、运动处方、危险因素矫正、心理干预和行为干预的综合长期调理过程，对于改善患者精神状态与运动耐量有明显的作用，可以使心脏功能与结构尽可能得到改善，     

牙周炎患者与正常人唾液SIgA、IGg及溶菌酶含量的测定

口腔牙周粘膜等组织经常与多种细菌接触,受感染的机会较多。对于感染的防御反应能力,除口腔组织本身具备外,唾液也是重要的防御环节,不仅因为唾液中含有相当数量的白细胞,更由于唾液内还含有免疫球蛋白及溶菌酶等,在局部免疫反应中具有重要作用,是局部免疫防御系统的重要环节,对全身或口腔某些疾病的发生、发展有密切关系。牙周     

上消化道出血急诊手术的临床研究

目的探讨急诊手术治疗上消化道出血的临床效果。方法采用回顾性分析的方法,分析我院收治的86例上消化道出血患者临床资料,根据临床特点采用急诊手术治疗。结果非手术治疗16例,治疗后均痊愈。70例上消化道出血患者手术均顺利进行,总有效率100%。6例术后发生并发症,其中3例切口感染,2例腹腔感染,1例膈下感染。术后无多器官功能衰竭及死亡比例发生。术后随访6个月所有病例均无复发。结论根据上消化道出血原因和临床特点,采取相应的、有效的手术治疗,临床效果良好,值得临床推广应用。     

宝宝鼻炎,秘方搞定

明明今年3岁了,去年冬天感冒时,由于病程拖延时间太长,便落下了鼻炎的毛病.每到生病感冒、季节变化时,明明的鼻子就会变得异常敏感,长时间的鼻塞使明明变得呼吸不畅、烦躁不安,同时也让全家人心疼不已.今年年初,妈妈带明明去了乡下老家过年,一位乡村医生向明明的妈妈透露了几个秘方,竟然治愈了明明的鼻炎.     

不同fimA基因型牙龈卟啉单胞菌刺激上皮细胞表达细胞因子的比较

目的比较不同fimA基因型牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis）刺激下口腔上皮细胞表达细胞因子的水平。方法P.gingivalis ATCC33277（IfimA）,W83（ⅣfimA）,47A-1（ⅣfimA）分别与KB细胞ATCCCCL17共同孵育6h,在3h和6h收集细胞和培养上清液。逆转录-聚合酶链式反应检测KB细胞IL-8,IL-6,IL-1βmRNA的表达,酶联免疫反应检测培养上清液中IL-8,IL-6,IL-1β的变化。结果3h时,ⅣfimA组IL-6蛋白水平低于IfimA组（P〈0.05）,6h时,ⅣfimA组IL-6和IL-8蛋白水平均低于ⅠfimA组（P〈0.05）;IL-8,IL-6mRNA和蛋白水平表达不一致,提示存在转录后水平的调节。3h,6h时,IL-1β对P.gingvalis刺激不敏感,mRNA和蛋白表达水平都很低。结论P.gingivalis fimA基因型与上皮细胞表达细胞因子的水平相关,提示P.gingivalis致病性与其fimA基因型相关。     

苦参碱促进三苯氧胺诱导乳腺癌Bcap-37细胞凋亡的机制研究

[目的]研究三苯氧胺(TAM)联合低剂量苦参碱对人乳腺癌Bcap-37细胞的增殖抑制及作用机制.[方法]用MTT法检测各组细胞的抑制率,克隆形成实验检测对细胞增殖的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot法检测p53、Bax、Bcl-2蛋白表达.[结果]TAM对Bcap-37细胞增殖具有明显抑制作用,且具有剂量和时间依赖性,与低剂量苦参碱联合,其抑制作用明显增强.药物作用24、48、72h后,与对照组相比,TAM组的凋亡率均明显增高(P＜0.01);与TAM组相比,联合组的凋亡率均明显增高(P＜0.01).Western blot检测发现,与对照组相比,TAM组p53、Bax蛋白表达增加,Bcl-2蛋白表达降低;与TAM组相比,联合组p53、Bax蛋白表达增加,Bcl-2蛋白表达降低.[结论]低剂量苦参碱能促进TAM对Bcap-37细胞增殖抑制作用,其作用机制与增加p53、Bax蛋白表达,降低Bcl-2蛋白表达,促进细胞凋亡有关.     

人VEGF基因杆状病毒表达载体的构建及生物学活性鉴定

目的构建含人血管内皮细胞生长因子(VEGF)基因的杆状病毒表达载体,并对其表达产物的生物学活性进行测定。方法用HindⅢ对pcDNA3.1/VEGF进行酶切,回收575 bp的VEGF片段;pFast a载体用HindⅢ酶切回收,与VEGF片段连接。NcoI酶切鉴定方向,得到正向连接重组载体pFast/VEGF;将其转化DH10BAC感受态细胞,经卡那霉素、四环霉素、庆大霉素及蓝白斑筛选得到重组杆状病毒载体pBacmid-Fa-VEGF,PCR扩增鉴定得到单一VEGF条带。将该病毒载体转染sf9细胞,用噬斑筛选及SDS-PAGE和Western blot检测VEGF表达,并通过MTT法检测VEGF促内皮细胞生长活性。结果病毒液在稀释到10-7时出现噬斑,Western blot检测出现单一条带,MTT检测促内皮细胞生长率为19.44%。结论成功构建了含VEGF基因的杆状病毒表达载体,且表达产物具有显著的促内皮细胞生长作用。     

大气中总悬浮颗粒物和可吸入颗粒物中多环芳烃的测定

本文介绍了用二氯甲烷溶剂、索氏提取法提取总悬浮颗粒物(TSP)和可吸入领险物(IP),然后用硅胶柱层析分组去除脂肪烃的干扰,用1:1已烷:苯洗脱多环芳烃,洗脱液用旋转蒸发器浓缩,然后用自制SF-52玻璃毛细管柱,以及氢火焰检定器进行色谱测定,对五个代表性多环芳烃重复测定平均回收率的范围为84.3—100.2%。方法的重复性好,变异系数在10%左右,最低检出浓度为1—2r/m溶液。并用此法对北京、上海、太原、武汉四个城市采集的TSP和IP样品中12个多环芳烃进行测定,获得较满意结果。