从噬菌体肽库中筛选弓形虫抗原模拟表位初探

以弓形虫感染兔血清免疫球蛋白（Ig）作为靶分子，免疫筛选噬菌体随机7肽库和12肽库。经3轮筛选，随机挑取70个噬菌体克隆用ELISA检测其特异性，共获得43个阳性克隆。对23个ELISA反应较强的克隆进行测序，根据序列分析选择有代表性的克隆A7作为模拟表位抗原进行ELISA检测。对47份弓形虫感染兔血清进行ELISA检测，结果32份为阳性，敏感性为68.1%；155份健康人血清中弓形虫抗体呈阳性者10份，特异性为93.5%。从噬菌体随机肽库中能筛选到弓形虫抗原模拟表位有诊断弓形虫病的潜在价值。     

一种对活动性内脏利什曼病的快速、简便诊断方法

以A蛋白胶体金作显色剂建立了一种免疫斑点试验,用于活动性内脏利什曼病的血清诊断。以培养的杜氏利什曼原虫前鞭毛体,4℃离心收集原虫,用含2%葡萄糖的PBS洗涤,将虫体混悬于10mmol/L Tris中(含2mmol/L EDTA,1.6mmol/L氟化磺酰苯甲酯和100μg/ml亮肽素(leupetin),作为蛋白酶抑制剂)。于1500磅/时~2的氮气下裂解10min,裂解物用Pierce法测定蛋白浓度后置-80℃保存备用。将6.5mm×21mm硬的乙烯塑料长条,     

蛔虫种群的遗传结构和流行病学:危地马拉的宿主源类型

在危地马拉蛔虫可感染人和猪。为探明人和猪是在蛔虫的单个传播圈,还是在两个不同的传播圈(一个是人宿主,一个是猪宿主),收集了两个村两种宿主的蛔虫,用酶电泳测定蛔虫核基因组的等位基因变异,并且用限制性内切酶图谱测定其线粒体DNA(mtDNA)序列多态性。     

三种凝集试验检测弓形虫抗体的定性和定量比较

[目的 ]评价用于检测弓形虫抗体的我室改良凝集试验 (MAT 1)、日本的胶乳凝集试验 (LAT)和法国的改良凝集试验 (MAT 2 )的实用价值。 [方法 ]用 3种试验对 2 88份人血清进行检测 ,比较阳性检出率与符合率等 ,并对检测的半定量结果进行统计分析。 [结果 ]3种试验的阳性率 (9 7%、 8 9%和 8 1% )无显著性差异 (χ2 =0 392 ,P >0 0 5 )。平行检测相同对象的结果显示 :MAT 1与LAT的总符合率为 93 7% ,两法的相关系数r =0 6 13;LAT与MAT 2的总符合率为 94 5 % ,两法的相关系数r =0 5 5 1;MAT 2与MAT 1的总符合率为97 3% ,两法的相关系数r =0 841。应用配对资料的卡方检验进行差异的显著性检验 ,结果均无显著性意义(P >0 0 5 )。而且 ,3种凝集试验中任两法间的正相关均具有非常显著性意义 (P <0 0 0 1)。 [结论 ]检测弓形虫抗体的MAT 1、LAT和MAT 2具有很好的符合性 ,提示 3种方法用于常规普筛和血清流行病学研究时可以相互替代。     

改良凝集试验用于检测禽类弓形虫感染的探讨

本文报道了应用改良凝集试验（ＭＡＴ）检测禽类的弓形虫抗体水平。共检测了包括４１只家鸡在内的７７份禽类（隶属５目、５科、１３属、２１种）的血清,结果ＭＡＴ阳性５份,阳性率为６．５％。４只阳性珍禽的弓形虫抗体滴度分别为１：２０（３禽）和１：６４０（１禽）,１只阳性家鸡的抗体滴度为１：４０。珍禽的弓形虫抗体阳性率（１１．１％）高于家鸡的抗体阳性率（２．４％）,但二者无显著差异（Ｐ〉０．０５）。本文结果表     

“标棒”斑点ELISA快速诊断寄生虫感染

用一种不溶于水的胶水将已点上几种寄生虫抗原的硝酸纤维素滤纸盘粘附于一根扁平的塑料棒(长7cm,宽0.6cm,厚0.1cm),干燥后用5％BSA-PBS封闭,接着将小棒与已作最适稀释的病人血清一起孵育,清洗,与辣根过氧化物酶标记的第二抗体反应,清洗后加底物(4-氯-1-萘酚)作用。稀释度为1:32时,25例内脏利什曼病患者中阳性数为23例(92％),而10份锥虫病患者血清均不发生反应。以后,用阿米巴病、包虫病和旋毛虫病患者以及实验感染杜氏利什曼原虫的狗血清进行“标棒×斑点ELISA测试。这些血清与     

上海市人体弓形虫病研究概况

弓形虫病是一种人兽共患的寄生虫病。我国 2 0世纪 5 0年代在福建从猫、兔、猪、鼠等动物分离出其病原 ,6 0年代在江西发现了首例人体病例。 70年代后期 ,在上海市发现了猪弓形虫病的大流行[1 ] ,这不仅引起了兽医界的广泛关注 ,而且也引起了人医部门的高度重视 ,并纷纷参与人体弓形虫病的研究 ,进而把弓形虫病的研究和防治课题作为重点 ,掀起了上海市人体弓形虫病研究的热潮。近 2 0年来 ,上海市的人体弓形虫病研究取得了很大的进展 ,本文试就其病原学、流行病学及病例和治疗等方面的进展概述如下。1　病原学1.1　弓形虫病的发现与虫株分离…     

先天性弓形早感染产前诊断研究的国内,外进展

弓形虫是一种感染人和多种脊椎动物 (包括哺乳动物和鸟类 )的寄生原虫 ,广泛分布于世界各地。人体的感染是由于食入受弓形虫卵囊污染的蔬菜、水果等 ,或是吃了含有包囊的生的或未熟的猪肉、牛肉或鸡肉等。由输血或器官移植也会发生传染[1] 。弓形虫进入人体后 ,在免疫功能正常的人体内因其繁殖力受到抑制 ,形成包囊而不表现出临床症状。但是 ,孕妇感染弓形虫后 ,虫体往往会通过胎盘传播给胎儿 ,导致先天性弓形虫感染 ,直接影响胎儿的发育。胎儿出现严重疾病的危险率与孕妇获得感染时的孕期有关[2 ] 。如果感染发生早孕 ,胎儿往往因感染而造…     

免疫色谱技术(ICT)用于疟疾诊断的探讨

在我国流行的疟疾主要是间日疟,其次为恶性疟［１］。目前,检测这两种疟原虫的方法仍采用传统的血片镜检法,要正确区别虫种,不仅耗时费力,而且要有较高的镜检技能。因此,寻求快速、简便、具有高度敏感性和特异性的诊断方法是近年来疟疾研究的主要任务之一。免疫色谱技术（ＩｍｍｕｎｏｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃＴｅｓｔ,ＩＣＴ）是９０年代发展起来的一种高新技术,自开发后立即引起了广大医务工作者的关注,并逐渐被引用于疾病的诊断,国内外曾有用ＩＣＴ方法检测恶性疟原虫的报道［２,３］,但未见检测间日疟或同时检测两…     

弓形虫病IgM免疫吸附凝集试验（ISAGA）的建立

目的∶建立检测弓形虫 Ｉｇ Ｍ 抗体的免疫吸附凝集试验 （ Ｉ Ｓ Ａ Ｇ Ａ） 。方法∶ Ｕ 型微孔板以适宜浓度的羊抗人 Ｉｇ Ｍ 抗体包被， 用１ ％ 牛血清白蛋白封闭， 洗板后加入待测血清， 在３７ ℃孵育后洗涤， 加入弓形虫（ Ｒ Ｈ 株） 速殖子抗原悬液， 置３７ ℃过夜后观察结果。将其与丹麦的 Ｉ Ｓ Ａ Ｇ Ａ 和 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 检测的结果以及玻片 Ｅ Ｉ Ａ 检测的结果作比较。结果∶本法与丹麦的试验检测丹麦孕妇４４ 份血清， 总符合率为９３２ ％ ；与玻片 Ｅ Ｉ Ａ 检测丹麦和上海孕妇６７ 份血清， 总符合率为９２５ ％ ， 两法的滴度之间明显相关 （γ＝ ０５８９ ， Ｐ＜ ０００１） ， Ｉ Ｓ Ａ Ｇ Ａ 滴度较玻片 Ｅ Ｉ Ａ 高１８ 倍； 用 Ｗ Ｈ Ｏ 国际生物标准化实验室提供的标准的抗弓形虫人血清定量测得其灵敏度为００８ Ｉ Ｕ／ ｍｌ。结论∶ Ｉｇ Ｍ Ｉ Ｓ Ａ Ｇ Ａ 具有敏感性、特异性高， 操作简便等优点， 不仅可作为弓形虫急性感染和慢性感染活动期的一种检测手段， 而且适用于弓形虫感染调查的大规模筛选。