大鼠习瓣膜含神经肽Y血管性肠肽P物质和降钙素基因相关肽神经的分布及年龄变化

用免疫组织化学ＡＢＣ法结合葡萄糖氧化酶－ＤＡＢ－硫酸镍铵增强技术，研究了１月、８月和１８月龄大鼠心瓣膜中ＮＰＹ、ＶＩＰ、ＣＧＲＰ和ＳＰ免疫反应阳性神经纤维的分布。结果显示，以上４种含肽神经纤维在８月龄大鼠房室瓣上均有分布，密度顺序为ＮＰＹ＞ＣＧＲＰ＞ＶＩＰ和ＳＰ，含ＶＩＰ和ＳＰ神经纤维的密度相近。三尖瓣中含ＮＰＹ和ＳＰ神经纤维的密度大于二尖瓣，含ＶＩＰ和ＣＧＲＰ神经纤维的密度与二尖瓣的相近。瓣膜中的含肽神经纤维可从瓣膜附着处的心壁及乳头肌内的神经两个方向延伸而来。主动脉和肺动脉瓣内仅发现有ＮＰＹ神经。随大鼠年龄增长，房室瓣中含ＮＰＹ神经的密度有增加趋势。含ＣＧＲＰ、ＶＩＰ、ＳＰ神经在１月龄大鼠房室瓣上的密度为零，在８月和１８月储时的密度与１月龄时的差异非常显著，８月和１８月龄时的密度间无明显差异。１月龄和１８月龄大鼠的主动脉和肺动脉瓣上，未见到４种含肽神经。我们的结果为心瓣膜的神经支配提供了新的资料，但这些含肽神经在心瓣膜的作用尚待探讨。     

小鼠睾丸中神经激肽B受体(NK3r)的免疫组织化学

1　材料和方法1.1　材料　雄性成年 BAL B/ c小鼠 6只 ,体质量 2 5～ 2 8g.以颈椎脱臼法处死后立即取材 ,用 9g· L- 1 生理盐水迅速冲洗干净置入 40 g· L- 1 多聚甲醛固定 2 4h,再浸入含 30 0 g·L- 1蔗糖的缓冲液中浸泡 4℃过夜 ,包埋剂包埋后恒冷箱切片 ,分两套收集 ,片厚 4μm,贴于涂明胶载玻片上室温晾干 .1.2　方法　经 30 m L· L- 1 的甲醇双氧水封闭 30 min后 ,第一套切片按照 ABC法进行染色 :1进兔抗神经激肽 B受体 [1 ](1∶ 5 0 )染色 12～ 2 4h;2 Biotin标记的山羊抗兔 Ig G抗体(DAKO 1∶ 40 0 )染色 6～ 8h;3 Avidin…     

成年大鼠睾丸Smad1和Smad5的免疫组织化学研究

目的 :探讨骨形态形成蛋白的细胞内信号传导分子Smad1和Smad5蛋白在成年大鼠睾丸内的表达。　方法 :应用免疫组织化学ABC法结合葡萄糖氧化酶 DAB 硫酸镍铵增强技术 ,检测成年大鼠睾丸Smad1和Smad5蛋白的表达和定位。　结果 :Smad1蛋白表达于大鼠睾丸精曲小管的各级生精细胞的胞质内 ,呈淡染的紫蓝色颗粒 ,胞核为阴性 ,免疫染色阳性细胞主要包括精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞和精子细胞 ;而Smad5蛋白阳性染色不明显 ,只有睾丸间质细胞呈弱阳性反应 ,免疫反应阳性物质主要定位于细胞质。　结论 :Smad1蛋白主要表达于睾丸精曲小管各级生精细胞 ,Smad5蛋白表达于间质细胞 ,为揭示TGF β超家族在精子发生中的分子机理提供了直接证据。     

腺嘌呤致大鼠雄性不育发病机理的实验研究

目的探讨转化生长因子-β(TGF-β)超家族的细胞内信号转导分子Smad2、Smad4蛋自在腺嘌呤所致雄性不育的大鼠睾丸内定位、分布及作用机制。方法应用免疫组织化学SABC法检测正常成年及腺嘌呤(300mg／kg)灌胃后第7、14、21d大鼠睾丸中Smad2、Smad4的定位和分布,并通过图像分析系统进行统计学分析,同时应用放射免疫法测定血清中睾酮(T)、促黄体激素(LH)和促卵泡激素(FSH)的含量。结果Smad2免疫阳性产物位于实验大鼠各级生精细胞及支持细胞的胞质内,Samd4则位于间质细胞的胞质内;灌胃后第21d大鼠睾丸中Smad2、Smad4表达明显高于正常成年及7、14d大鼠,同时,血清中T较正常成年及7、14d大鼠明显降低,LH、FSH明显增高。结论腺嘌呤所致雄性不育可能与Smad2在大鼠睾丸生精细胞中表达增强及Smad4在睾丸间质细胞中表达增强,直接或间接影响睾丸的生精功能有关。     

BRCA1蛋白在胰腺癌组织中的分布和表达

目的:研究肿瘤抑制基因BRCAl对胰腺癌的作用和其蛋白在胰腺癌组织中的分布和肿瘤发生中的蛋白特性.方法:以乳腺癌的细胞株作为阳性对照组,对胰腺癌组织中的BRCAl亚细胞分布做了免疫荧光双重染色,免疫组织化学等实验并进行量化.结果:BRCAl蛋白在胰腺癌的组织中呈一定比例分布,这点在不同的胰腺癌患者组织标本中得到证实.免疫荧光双重染色法证实BRCAl蛋白在胰腺癌细胞胞质和胞核间互动,这是国内首次发现和报道BRCAl在胰腺癌组织细胞中胞质和胞核间互动现象和其亚细胞分布情况.结论:我们的多病例研究结果都证实BRCAl的胞质胞核有比例明确分布,提示可能是参与胰腺癌组织中蛋白功能调节机制,并可能具有与胰腺癌发生相关的蛋白特性,在胰腺癌细胞其亚细胞分布现象预示着将有更好的胰腺癌临床治疗的生物靶点.     

β-趋化性细胞因子RANTES在人睾丸和附睾中的表达

目的:探讨受激活调节正常T细胞表达和分泌因子(RANTES)在成人睾丸及附睾组织中的表达及分布。方法:提取人睾丸和附睾总RNA,进行RT-PCR分析RANTES的表达;同时取睾丸和附睾组织固定,石蜡包埋,用免疫组化法检测RANTES在人睾丸和附睾组织中的定位情况。结果:在睾丸中未见RANTES的表达,而从附睾组织中获得了RANTES的cDNA片段,且RANTES蛋白定位于附睾输出小管的高柱状细胞和低柱状细胞靠近腔面的胞质内,附睾头部远端及体、尾部均未检测到RANTES蛋白。结论:RANTES在人的附睾中有表达,且其分布表现出明显的附睾区域特异性,提示RANTES基因可能参与精子成熟过程的调控。     

原始生殖细胞迁移的分子机理

脊椎动物原始生殖细胞（ＰＧＣｓ）的迁移是发育生物学最基本的问题之一。最近的研究结果表明细胞外基质、生殖腺嵴释放的趋化因子和细胞因子等，都是ＰＧＣｓ迁移过程中不可缺少的条件。对这些事件的了解不但有助于了解ＰＧＣｓ迁移的机理，而且对阐明由于ＰＧＣｓ异常迁移而引起的生殖细胞肿瘤等病理现象的机制都是有必要的。     

山莨菪碱对失血性休克时肝脏的保护机制研究

我们通过观察失血性休克合并内毒素血症时枯否氏细胞 (KC)中IκB激酶(IKK) βmRNA的表达和核因子 (NF) κB活性变化以及山莨菪碱 (65 4 2 )的影响 ,从分子水平探讨失血性休克后继发肝脏损害的病理机制及 65 4 2的保护作用。一、材料与方法1.动物模型与分组 :健康大耳白兔(本校动物实验中心提供 ) 2 7只 ,6个月龄 ,雌雄不限 ,体重 (2 .0 7± 0 .2 3 )kg。随机分 3组 :休克组 (9只 ) ,抽血使平均动脉压降至 3 0～ 40mmHg(1mmHg =0 .13 3kPa) ,维持 60min后 ,缓慢回输失血 ;65 4 2干预组 (9只 ) ,步骤同上 ,在回输血液时腹腔注射 65 4…     

嫌色细胞型肾细胞癌3例的临床病理特点及文献复习

目的：研究嫌色细胞型肾细胞癌(CRCC)的临床病理特点．方法：采用常规HE染色光镜观察、胶体铁染色、免疫组织化学染色和透射电镜观察．结果：患年龄分别为62、63和67(平均64)岁，均为男性．主诉为腰部酸胀，无明显血尿和腰部包块．所有肿瘤分期均为T0N0M0,组织学上，肿瘤细胞为多变的网状透明胞质的大细胞构成,根据网状化胞质的程度和分布，肿瘤细胞可分为3种类型,细胞的超微结构特征是在网状化的区域存在大量小泡，似乎是CRCC的特征性结构.小泡可能起源于线粒体外膜的外突．胶体铁染色阳性也是CRCC的特征之一．免疫组织化学研究显示肿瘤对(CKpan、CK19、上皮膜抗原和波形蛋白有不同程度的阳性，S-100蛋白阴性.15-26mo的随访表明生存良好。结论：这些发现进一步确证CRCC是肾细胞癌的一种特殊亚型，其典型的形态特征是存在胞质内小泡。