芡欧鼠尾草中1个新的二萜化合物

目的 研究芡欧鼠尾草Salvia hispanica地上部分的化学成分.方法 采用硅胶、Sephadex LH-20、HPLC等各种现代色谱分离技术进行系统地分离纯化,根据波谱数据结合改良的Mosher法对化合物进行结构鉴定.结果 从芡欧鼠尾草地上部分的丙酮提取物中分离得到了3个化合物,分别鉴定为(5S,7R,9R,1...     

3种重楼属药用植物的生药学研究

目的 对腾冲重楼、大理重楼、漕涧重楼3种药用植物进行系统的生药学研究.方法 采用原植物观察、石蜡切片、水合氯醛透化法和HPLC,对腾冲重楼等3种重楼属药用植物进行系统研究.结果 3种重楼属药用植物的原植物形态差异明显,但性状、根茎横切面和粉末显微特征较为相似;腾冲重楼中含有重楼皂苷Ⅶ、重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅱ、重楼皂苷Ⅲ...     

刚地弓形虫微线体蛋白6和醛缩酶在虫体内的定位

目的观察刚地弓形虫微线体蛋白6(MIC6)和醛缩酶在虫体内的定位。方法聚合酶链反应扩增微线体蛋白2羧基端(MIC2C)基因片段,构建MIC2C/pGEX-4T-1/BL21表达系统,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导表达谷胱苷肽巯基转移酶-MIC2C(GST-MIC2C)蛋白,用该蛋白免疫新西兰兔,制备GST-MIC2C多克隆抗体。刚地弓形虫速殖子涂片,分别用一抗、荧光二抗温育,荧光显微镜下观察。结果成功获得GST-MIC2C多克隆抗体。荧光显微镜下显示MIC6(红色荧光)和醛缩酶(绿色荧光)2种蛋白皆定位于弓形虫的顶端。结论刚地弓形虫MIC6与醛缩酶在虫体内存在共定位关系,为2种蛋白相互作用关系的确立提供了细胞定位学证据。     

刚地弓形虫谷胱苷肽巯基转移酶-醛缩酶融合蛋白的制备及纯化

目的体外制备刚地弓形虫醛缩酶(aldolase)蛋白并纯化。方法以刚地弓形虫cDNA链为模板,聚合酶链反应扩增aldolase基因,克隆至质粒pGEX-4T-1上,转化至大肠杆菌BL21;异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导表达,亲和层析纯化表达产物。结果获得了aldolase基因序列,构建了aldolase/pGEX-4T-1原核表达系统,表达并纯化了谷胱苷肽巯基转移酶-醛缩酶(GST-aldolase)融合蛋白。结论体外获得了纯化的GST-aldolase蛋白,为后续的aldolase功能研究奠定了基础。     

云南松中莽草酸含量的高效液相色谱法测定

目的 建立云南松中莽草酸的高效液相色谱测定方法,以分别考察云南松的不同部位中莽草酸的含量.方法 色谱柱为Agilent Zorbax XDB-C18(4.6 mm×150 mm,5 μm),流动相为甲醇-1 %磷酸水溶液(3∶97),流速为0.8 ml·min-1,检测波长为214 nm,柱温为25 ℃.结果 莽草酸线性范围为0.083～1.66 μg,相关系数r=0.999 9,平均回收率为99.12%,RSD为1.16%(n=6).云南松不同部位均含有莽草酸成分,且含量差异较大.结论 云南松中的莽草酸可以作为新的莽草酸资源加以开发利用.     

新生儿弓形虫感染流行病学调查

本研究用间接血凝试验 (IHA)法分别检测 134份新生儿脐血及 6 5份临产孕妇静脉血弓形虫特异性抗体 ,以了解本地区孕妇、新生儿弓形虫感染及经母婴传播的情况。材料和方法一、材料　选取新乡市两家医院产科 2 0 0 2年 9月～ 2 0 0 2年 12月住院足月顺产的新生儿 134例 ,男 6 3例 ,女 71例 ;临产孕妇 6 5例。新生儿出生后立即采集脐血 3ml,分离血清 ;临产孕妇住院时采集静脉血并分离血清 ,- 4 0℃保存备测。二、方法　采用IHA检测。试剂盒购自中国农科院兰州兽医研究所 ,批号为 90 4 1,根据其试验操作细则进行定性检验。诊断标准为 :阳性效…     

中药质量评控的第一要义:效应当量一致性

中药的优质性和稳定性是保证临床疗效的关键因素,中药的质量评控方法应以保证临床疗效为最终目标,如何在复杂的中药质量影响因素中寻求一条以临床应用为导向的方法对中药的质量评控具有重要的意义。为此,通过对现行中药质量评控模式的分析,结合课题组开展的中药生物评价与控制模式研究的基础上,提出了构建效应当量的中药质量控制与评价模式的新设想,并对其研究思路进行阐释,以期为中药质量评控方法的构建提供参考。     

基于QuEChERS-GC-QQQ-MS/MS法同时测定知母中58种农药残留

目的建立基于QuEChERS-GC-QQQ-MS/MS的知母中58种农药残留同时定量分析方法。方法采用岛津TQ8050三重四极杆气质联用仪,Shimadzu SH-Rxi-5Sil MS毛细管柱(30 m×0.25 mm,0.25μm)为色谱柱;进样口温度为250℃,进样量为1.0μL,不分流进样,高压进样压力为250 k Pa;载气为高纯氦气,载气控制方式为恒线速度模式;色谱柱体积流量为1.69 mL/min,线速度为47.2 cm/s,吹扫流量为5 mL/min;程序升温:初始温度为50℃,保持1 min,先以25℃/min升温至125℃,再以10℃/min升温至300℃,保持15 min;柱平衡时间为0.5 min。采用QuEChERS法提取、净化供试品溶液;配制基质匹配标准曲线;使用稳定的同位素内标进行校正等3个措施共同消除基质效应。结果成功建立并验证了一种基于QuEChERS-GC-QQQ-MS/MS的知母中58种农药残留同时定量分析方法。通过对不同产地、野生与栽培品种、不同规格的知母药材进行58种农药残留量的定量测定,结果显示30个批次内共有6个批次知母药材检测到了微量的p,p′-滴滴伊(p,p′-DDE),3个批次检测到了氟乐灵,2个批次检测到了毒死蜱,1个批次检测到了微量的仲丁灵。结论建立的基于QuEChERS-GC-QQQ-MS/MS的知母中58种农药残留同时定量分析方法具有较好的适用性,对其他中药材农药多残留检测方法的建立具有参考价值。     

基于成分-活性整体相似性的重楼替代资源筛选

目的考察不同种重楼成分-活性的整体相似性,建立重楼替代资源筛选的新方法。方法采用HPLC法及镇痛、止血药理学模型比较了重楼属7种药用植物中重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的量及其镇痛、止血的药效,采用离差标准化法对数据进行标准化,以《中国药典》2015年版一部规定的重楼皂苷含量及阿司匹林、云南白药组"镇痛、止血"药效数据作为标准对照,建立了成分指数和活性指数,采用SPSS 20.0软件对成分指数和活性指数进行主成分分析和聚类分析。结果重楼属7种药用植物主要皂苷类成分的总质量分数为0.125%~1.649%,其中长柱重楼最高(1.649%),大理重楼最低(0.125%);云南重楼镇痛活性最强、小鼠出血停止时间(BT)最短、小鼠凝血时间(CT)最短;长柱重楼组小鼠活化部分凝血活酶时间(APTT)最短,黑籽重楼组最长;南重楼组小鼠凝血酶原时间(PT)最短;大理重楼组小鼠BT最长,多叶重楼组小鼠CT和PT均最长;云南重楼、南重楼、黑籽重楼聚为一类,多叶重楼、长柱重楼、大理重楼、毛重楼聚为一类,说明南重楼、黑籽重楼与云南重楼的成分-活性整体之间相似度较高,可考虑作为替代资源使用。结论通过成分-活性等指标的整体相似性,评价不同种重楼之间的品质关系,为濒危植物重楼替代资源的寻找提供了思路和方法。     

人心肌特异性肌钙蛋白T单克隆抗体的制备与鉴定

目的　制备抗人心肌肌钙蛋白T的单克隆抗体。方法　利用纯化的人心肌肌钙蛋白T免疫BALB/C小鼠 ,常规方法制备抗人心肌肌钙蛋白的单克隆抗体 2株N15C和N16D。结果　利用普通ELISA方法检测 2株单抗 ,小鼠腹水N16D滴度可达 1/ 32 0 0 0 ,N15C滴度达 1/ 80 0 0 ;斑点酶联免疫吸附试验证明N16D对急性心肌梗塞患者血清中出现的肌钙蛋白T有较好的亲和性。结论　N16D株单抗对人心肌肌钙蛋白具有较好的特异性和亲和性