血管紧张素Ⅱ对大鼠胰腺纤维化过程中细胞凋亡的调节作用

目的 探讨洛沙坦对TNBS诱导大鼠实验性胰腺纤维化形成过程中胰腺腺泡细胞凋亡的影响及可能机制。方法 雄性SD大鼠100只随机分为正常组、对照组、治疗组，采用胰管内注射2％三硝基苯磺酸(TNBS)诱导大鼠胰腺纤维化模型。治疗组每天给予洛沙坦(10mg／kg)灌胃；对照组给予等容积的无菌蒸馏水。观察胰腺组织病理改变；TUNEL法原位检测凋亡胰腺腺泡细胞密度；透射电镜观察胰腺组织细胞形态学变化；逆转录一多聚酶链反应(RT-PCR)方法 检测Bcl-2凋亡相关基因家族成员Bcl-2、Bcl—XL、Bak、Bax mRNA表达。结果 洛沙坦治疗可逆转胰腺组织炎症细胞浸润、腺泡萎缩等异常改变。对照组大鼠胰腺腺泡细胞凋亡较正常大鼠明显增加，胰腺组织Bax、Bak mRNA表达较正常增加，Bcl-2mRNA表达降低，Bcl-mRNA不表达；洛沙坦治疗后凋亡减少，洛沙坦治疗组Bax、Bcl-2mRNA表达及Bax／Bcl-2较对照组降低，Bak、Bcl—XLmRNA不表达。结论TNBS诱导大鼠胰腺纤维化形成过程中胰腺腺泡细胞凋亡增加；洛沙坦阻断1型血管紧张素Ⅱ受体(AT1R)可抑制其凋亡，其机制可能与调控bcl-2凋亡相关基因表达有关。由此可见，血管紧张素Ⅱ与AT1R可能介导了实验大鼠胰腺纤维化过程中胰腺腺泡凋亡的发生。     

过氧化物酶增殖物活化受体γ活化对胰腺癌细胞凋亡的诱导作用

目的探讨过氧化物酶增殖物活化受体γ(PPARγ)在诱导胰腺癌细胞凋亡中的调节作用。方法胰腺癌细胞系SW1990经10μmol/L PPARγ配体15-脱氧-前列腺素J2(15d-PGJ2)、20μmol/L维甲酸受体α(RXRα)配体9-顺式-维甲酸(9-cis-RA)及其两者联合作用培养48 h后,应用电子显微镜观察细胞形态学变化;流式细胞仪研究细胞凋亡比例的变化。30只雌性裸鼠皮下接种1×107个SW1990细胞,2周后待肿瘤可触及时,将其随机分为对照组和治疗组(予罗格列酮)。11周后处死裸鼠并取下移植瘤,采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的生物素缺口末端标记法(TUNEL)评估移植瘤中凋亡细胞的情况,并用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测bcl-2凋亡相关基因家族成员bcl-2、bcl-xl、bak、bax以及凋亡抑制基因Survivin的表达。结果电子显微镜结果显示15d-PGJ2、9-cis-RA及其两者联合作用均可导致SW1990细胞发生形态学变化。可见细胞核和胞质内容物密集皱缩,核内染色质凝集成块并边集,形成1个或数个沿核膜的月芽小体。在联合应用组中还可观察到凋亡小体的存在。流式细胞术检测提示对照组凋亡比率为0.95%,15d-PGJ2、9-cis-RA及其联合应用可引起SW1990细胞凋亡比率增加,15d-PGJ2组为8.05%,9-cis-RA组为8.36%,联合作用组为6.86%。TUNEL染色显示治疗组移植瘤组织中凋亡指数(AI)为15.25±4.57,明显高于对照组的6.25±2.62(P<0.05)。RT-PCR揭示在SW1990移植瘤中,促凋亡基因bak、bax表达上调,抗凋亡基因bcl-xl、Suvivin下调,抗凋亡基因bcl-2几乎不表达。结论PPARγ的活化可诱导SW1990胰腺癌细胞凋亡。其机制可能是通过上调促凋亡基因bak、bax及下调抗凋亡基因bcl-xl、Suvivin表达而实现的。     

实验性慢性胰腺炎大鼠骨髓间充质干细胞的检测

目的:检测实验性慢性胰腺炎(chronic pancreatitis,CP)大鼠造模后不同时间段内,骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的数量和增殖能力。方法:采用精氨酸腹腔注射法建立CP大鼠模型,并分别于造模后3、7、14 d获取大鼠骨髓细胞行原代培养,CFU-F计算克隆形成率。培养的细胞分别标记荧光抗体anti-CD29-PE/CY5、anti-CD44-FITC、anti-CD45-PE后,采用流式细胞仪检测MSCs细胞群CD29+CD44+CD45-占总体细胞的比例。结果:CP造模后3、7、14 d的原代培养骨髓细胞的克隆形成分别为(19.33±3.56)个、(24.67±4.89)个和(18.33±2.73)个,均显著高于对照组(4.83±1.72)个(P<0.05)。结论:CP大鼠建模后不同时间段MSCs数量和增殖能力发生改变,经历了先增加后减少的过程。     

环氧合酶2对胰腺癌新生血管生成的调节作用及其机制

目的　探讨环氧合酶 2 (COX 2 )在胰腺癌新生血管生成中的调节作用及其作用机制。方法　应用免疫组织化学染色研究人胰腺癌组织COX 2、血管内皮细胞生长因子 (VEGF)表达 ;同时标记肿瘤新生血管内皮细胞vWF和血管壁Ⅳ型胶原 ,计算肿瘤组织微血管密度 (MVD)。建立裸鼠胰腺癌细胞株PC 3移植瘤 ,观察选择性COX 2抑制剂Celebrex对肿瘤组织MVD的影响 ,并应用免疫组织化学染色和逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR)研究裸鼠移植瘤组织VEGF表达变化。结果　COX 2在人胰腺癌组织中表达阳性率为 87 5 % ,VEGF阳性率为 5 8 3%。COX 2强阳性组MVD平均值显著高于COX 2弱阳性 +阴性组 ,P <0 0 1。VEGF阳性组MVD平均值高于VEGF阴性组 ,但无统计学差异 ,P >0 0 5 ;Pearson相关性检验结果表明COX 2与vWF和Ⅳ胶原标记的MVD均有明显的相关性 (相关系数分别为 0 5 99和 0 6 ) ,P <0 0 5。在裸鼠移植瘤的体内实验中 ,与对照组MVD(6 3 89± 13 6 7)相比 ,Celebrex处理组MVD为 32 2 5± 12 99,两者差异显著 ,P <0 0 1。免疫组织化学染色和RT PCR结果表明Celebrex处理组肿瘤组织VEGF表达较对照组明显下调。结论　COX 2与胰腺癌新生血管生成密切相关 ,其高表达促进了胰腺癌新生血管生成 ;可能作用机制是上调促血管生成因子VEGF     

肾素—血管紧张素系统及其对胰腺生理及病理的调节作用

业已证实,肾素-血管紧张素系统(rennin-angiotensinsystem,RAS)在维持血压,调节水、电解质平衡方面起重要作用。然而,近年来研究发现除循环RAS外,机体许多组织如心脏、肾脏、肾上腺、脑及胰腺也存在局部独立的RAS,后者可通过旁分泌、自分泌及胞内分泌途径调节组织的生长、分化等生理反应或参与某些疾病的病理机制。在胰腺组织,局部RAS不仅参与胰腺内、外分泌功能的调节,而且还与某些胰腺疾病如急性胰腺炎、糖尿病、胰岛移植后反应等有关。因此,进一步研究RAS对胰腺生理及病理的调节作用将有助于临床认识及治疗胰腺疾病。     

核因子-κB在血管紧张素II介导的大鼠胰腺纤维化发生中的作用

目的:探讨NF-κB在血管紧张素II介导的大鼠胰腺纤维化发生中的作用。方法:SD大鼠(200-300g)随机分为正常组、对照组、治疗组。大鼠胰管内逆行注射2%三硝基苯磺酸(TNBS)复制胰腺纤维化模型。于造模后第1d始,治疗组给予洛沙坦灌胃(10mg·kg^-1·d^-1),模型组给予等量的无菌蒸馏水。分别采用免疫印迹、免疫组化和TransAM^TM方法检测胰腺组织NF-κB表达、分布和活化情况。采用硫堇蓝(toluidineblue)染色和透射电镜观察肥大细胞数量、分布和活化脱颗粒现象。RT-PCR研究胰腺组织细胞间粘附分子(ICAM-1)mRNA表达。结果:造模后第3d大鼠胰腺组织NF-κBp65蛋白表达及其活性增加,第7d达峰值[(0.406±0.086)mg/g总蛋白]。对照组大鼠胰腺组织中肥大细胞活化;ICAM-1mRNA表达于第3d和第7d增加。洛沙坦可抑制NF-κB蛋白表达和肥大细胞活化、下调ICAM-1mRNA表达。结论:血管紧张素II在大鼠胰腺纤维化形成早期可能通过受体AT₁途径促发炎症反应及纤维化,具体机制可能与NFκB表达增加并活化有关。     

肥胖为急性胰腺炎患者早期独立的预后指标

目的研究基于亚洲人群肥胖诊断标准探讨肥胖在评估急性胰腺炎(AP)预后中的作用.方法分别采用Ranson标准、APACHE-Ⅱ评分和Balthazar CT分级系统对临床资料完整的42例AP患者入院时的病情严重程度作回顾性分析,若同时符合Ranson标准为≥3分,APACHEⅡ≥8分和Balthazar CT分级达到D级或E级者拟诊为重症急性胰腺炎(SAP).肥胖的诊断依据为体重指数(BMI)≥25 kg/m2.同时详细记录患者入院时的年龄、性别、病因及并发症情况.结果42例患者中SAP11例,轻型急性胰腺炎(MAP)31例.SAP患者平均BMI为(27.31±6.28)kg/m2,显著高于MAP患者平均BMI(22.41±4.72)kg/m2,AP时肥胖患者与非肥胖患者发展成SAP与年龄无相关性.AP时男性肥胖患者较男性非肥胖患者更易发展成SAP,且男性肥胖患者较女性肥胖患者SAP发生的危险度高.胆源性AP时肥胖患者SAP发病的危险度最高,且胆源性AP时肥胖患者较非肥胖患者更易发展成SAP.AP时肥胖与并发症无显著差异.结论肥胖可能是AP时早期独立的预后因素,尤其与一些相关因素如性别、病因联合应用时可能更具有评估性.     

内镜下逆行胰胆管造影术术后胆道感染的危险因素分析及防治

内镜下逆行胰胆管造影术(enoloscopic retrograole cholangiopancreatography,ERCP)自1968年应用于临床,经过30多年的发展,目前已经成为胆胰疾病影像诊断的重要依据及胆胰疾病的重要治疗措施.但无论是诊断性还是治疗性ERCP均为微创或有创性技术,存在一定的并发症(如急性胰腺炎、胆道感染、出血、穿孔等),部分严重并发症甚至危及患者生命.国外报道ERCP术后胆道感染的发生率为0.5%～8.0%,一过性菌血症发生率为27%[1];国内报道为0.35%～20.4%[2 3].     

妊娠合并恙虫病的研究现状

恙虫病又名丛林斑疹伤寒(scrub typhus),是由恙虫病立克次体（Rickettsia tsutsugam ushi）引起的一种自然疫源性疾病。主要流行于亚洲太平洋地区,在我国东南沿海地区多见,常流行于夏秋季节。鼠类为传染源,恙螨为媒介,当恙螨的幼虫叮咬有隐性感染的鼠后,其下一代幼虫叮咬人体即将立克次体传给人,立克次体通过淋巴、血液扩散感染全身小血管内皮细胞及网状内皮系统,导致细胞破损、出血,造成广泛的小血管炎及血管周围炎,致多脏器充血、水肿、变性坏死,出现各脏器不同程度的损害。