CRISPR/Cas9载体优化及CHD1L条件性敲除肝癌细胞系的构建

目的利用优化的pLV-Tet3G-CRISPR/Cas9载体系统构建条件性敲除CHD1L的QGY-7703肝癌细胞系,验证敲除效果及其对细胞生物学的影响,为研究CHD1L促肿瘤细胞恶性表型机制提供重要的细胞模型。方法用点突变方法优化pLV-Tet3G-Cas9载体以降低其脱靶效应,进而将Cas9改造成eSpCas9;其次,通过筛选获得稳定表达eSpCas9的QGY-7703细胞株;将mCherry基因插入载体pLVXhU6-SgRNA中,获得携带mCherry荧光基因的pLVX-mCherry-hU6-SgRNA载体;设计和筛选特异性靶向CHD1L的SgRNA序列,用重叠PCR方法获得hU6-CHD1L-SgRNA片段,筛选具有CHD1L切割活性的靶点,随后,将其克隆到pLVX-mCherry-hU6-SgRNA载体中;用293FT细胞进行病毒包装,获得慢病毒颗粒;转染7703eSpCas9细胞株,利用Western blot验证Dox诱导下的CHD1L敲除效果,划痕和Transwell实验检测Dox诱导的CHD1L敲除对肝癌细胞生物学功能的影响。结果 pLV-Tet3G-Cas9载体Cas9成功优化为eSpCas9序列;成功构建pLVX-mCherry-hU6-CHD1L-SgRNA载体;通过转染及筛选,获得Dox诱导的CHD1L敲除QGY-7703肝癌细胞系;细胞实验显示Dox可诱导eSpCas9表达,靶向性切割CHD1L,抑制QGY-7703细胞的迁移侵袭。结论成功构建Dox诱导的CHD1L敲除肝癌细胞株,此载体系统可为靶向肿瘤特异性基因研究提供细胞模型。     

微创肿胀吸脂术治疗腋臭67例疗效观察

目的 探讨应用微创肿胀吸脂术治疗的疗效.方法 利用局部肿胀麻醉技术和脂肪抽吸技术对腋臭进行微创手术治疗.结果 本组67例患者一次手术后臭味消失65例,2例行二次手术后臭味消失;所有病例随访12个月,1例复发,疗效满意.结论 利用微创肿胀吸脂术治疗腋臭能够获得安全、可靠的效果.     

盐酸美金刚对血管性痴呆的临床疗效观察

目的为了观察盐酸美金刚对治疗血管性痴呆（VaD）的疗效及其安全性。方法选取来自干部病房或门诊的轻中度VaD患者共62例,随机分成治疗组和对照组,治疗组32例,对照组30例,两组患者在年龄、性别、文化程度、病程、痴呆程度等方面比较差异无统计学意义（P〉0．05）,具有可比性。治疗组给予盐酸美金刚,起始剂量是5mg／d,前3周以每周5mg递增,从第4周起,使用剂量维持在20mg／d,口服,共24周;对照组给予吡拉西坦0．8g,3次／d口服,共24周。治疗前和治疗24后周均给予简易智能痴呆量MMSE、ADL行为量表进行评分,比较得分的情况。结果两组治疗前后MMSE、ADL评分分别进行比较,均有明显的改善;两组治疗24周后MMSE、ADL评分比较差异有统计学意义。治疗组有2例（占6．25％）、对照组有2例（占6．67％）出现轻度的不良反应,均为一过性反应。结论盐酸美金刚对老年轻中度VaD患者的认知功能、日常行为能力有明显改善作用,安全性好且其疗效优于吡拉西坦。     

良性巨大甲状腺肿物手术治疗体会

目的探讨良性巨大甲状腺肿物的手术切除技巧及其并发症的预防。方法总结32例巨大甲状腺肿物患者,其中结节性甲状腺肿15例,甲状腺腺瘤12例,淋巴性甲状腺肿3例,结节性甲状腺肿合并甲状腺腺瘤2例。全身麻醉下采用甲状腺被膜解剖技术采用成功地进行了手术治疗。结果术中行双侧甲状腺部分切除术22例,单侧甲状腺部分切除术6例,单侧甲状腺全切除术4例;术中行气管悬吊8例,术后1周左右拆除悬吊线。术后无永久性喉返神经麻痹;无气管塌陷及气道梗阻者,检查甲状旁腺激素及血钙均无异常。术后甲状腺功能低下者3例,嘱其系统服用甲状腺素片治疗。结论采用被膜解剖技术,妥善处理甲状腺上、下极,注意保护颈内静脉、喉返神经、甲状旁腺,预防气管塌陷,可成功切除巨大甲状腺肿物并避免并发症的发生。     

鼻内镜下等离子射频鼻后神经切断术治疗中重度变应性鼻炎疗效观察

目的 探讨鼻内镜下等离子射频行鼻后神经切断治疗中重度持续性变应性鼻炎的疗效。方法 2015年1月—2018年1月收治中重度变应性鼻炎合并下鼻甲肥大患者80例,其中46例同时合并有鼻中隔偏曲,所有患者应用等离子射频行鼻后神经切断术,同时行下鼻甲成形术;对46例合并鼻中隔偏曲患者行鼻中隔矫正术,观察手术前后变应性鼻炎症状改善情况。结果 术后经随访1年有效率100%,2年有效率95%,3年有效率88.75%,患者术后1、2、3年VAS总评分均比术前明显好转,3年内随着年限延长,治疗有效率逐年下降,VAS总评分逐年上升（P<0.05）。结论 鼻内镜下等离子射频行鼻后神经切断联合鼻中隔矫正及下鼻甲成形术治疗中重度变应性鼻炎疗效确切,长期效果仍需要进一步研究。     

微创穿刺术治疗基底节区脑出血的临床研究

目的：探讨微创穿刺术治疗基底节区脑出血的临床疗效。方法：选择基底节区高血压脑出血患者104例,随机分为观察组与对照组各52例,对照组给予小骨窗开颅手术治疗,观察组给予微创穿刺手术治疗,对比两组患者治疗效果。结果：观察组手术时间及术后偏瘫开始恢复时间均显著短于对照组（P〈0．01）;术后3个月时观察组日常生活能力（ADL）I--Ⅱ级者43例,显著多于对照组的32例（P〈0．05）。结论：微创穿刺引流术在高血压基底节区脑出血患者中具有确切疗效,能够在较短的时间内安全有效的清除血肿,有效改善患者生活自理能力与生活质量,安全可靠,值得应用。     

血浆同型半胱氨酸水平与高血压病及其合并糖尿病的相关性分析

目的：探讨血浆同型半胱氨酸（HCY）水平与高血压病及高血压合并2型糖尿病的相关性。方法：将152例高血压病患者分为单纯高血压组、高血压合并2型糖尿病组,85例正常健康者作为对照组。3组患者进行血浆同型半胱氨酸检测。结果：高血压患者血浆HCY水平较对照组明显升高,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：血浆HCY水平在高血压尤其在高血压合并2型糖尿病患者中明显升高,是心脑血管疾病的独立危险因子。