微创经皮肾穿刺取石术治疗肾、输尿管上段结石

目的:探讨微创经皮肾穿刺取石术(MPCNL)治疗肾、输尿管上段结石的疗效。方法:对40例肾、输尿管上段结石行MPCNL治疗,其中5例曾行体外冲击波碎石(ESWL)治疗,8例曾有肾脏或输尿管手术史。单纯肾结石15例、单纯输尿管上段结石13例、肾结石合并同侧输尿管上段结石12例。结果MPCNL术后1个月结石清除率95%,有残余结石均为较大鹿角形结石或是结石嵌入较深肾小盏内者及多发多肾盏结石患者。术中平均出血量约40mL,术后平均住院时间10d。结论:MPCNL治疗肾、输尿管上段结石取石成功率高创伤小。     

兔骨髓间充质干细胞表面抗原检测及其变化特点

目的:应用流式细胞仪对兔骨髓间充质干细胞的表面抗原进行检测,观察骨髓间充质干细胞传代次数、克隆纯化与骨髓间充质干细胞表面抗原表达之间的关系。方法:实验于2004-01/2006-08在浙江省医学科学院生物工程所完成。取3月龄新西兰大白兔用于骨髓间充质干细胞的分离培养。兔骨髓间充质干细胞的克隆化:将铺满培养瓶底的原代骨髓间充质干细胞,用D-Hanks液小心的洗1次,加入0.25%胰蛋白酶消化约4min,弃消化液,加LG-DMEM培养液收集细胞,1000r/min,离心10min,然后用LG-DMEM培养液充分混匀沉淀细胞。细胞计数后以10倍递减稀释至细胞密度为103个/mL。取0.1mL稀释后的细胞悬液加入10mL培养液,使最终细胞密度为10个/mL。将细胞悬液加入96孔培养板,每孔100μL。置37℃、体积分数为0.05的CO2饱和湿度条件下培养,每天观察克隆细胞的增殖生长状况。待克隆细胞生长至60%～80%融合时,逐步扩大培养,在液氮冻存保种的同时进行细胞连续传代。将体外普通法分离的骨髓间充质干细胞第5代、第7代、第13代、第16代、第21代、第22代及克隆纯化的骨髓间充质干细胞第3代、第5代、第15代、第26代均标记上CD14-FITC及CD44-PE,通过流式细胞仪检测其阴性率及阳性率。结果:①普通法分离的骨髓间充质干细胞各代的CD44表达呈阳性,且随着培养代次的增加,其表达的阳性率逐渐增强,到P16代以后又呈下降趋势;各代骨髓间充质干细胞表面抗原CD14出现了微弱阳性,但随着培养代次增加,其阳性率呈下降趋势。②克隆纯化的骨髓间充质干细胞其CD44呈现阳性,表达在80%以上,至P26代时CD44表达下降到70.49%;其CD14基本呈阴性。结论:兔骨髓间充质干细胞其CD44呈阳性表达,CD14呈阴性表达。随着传代代数增加CD14阴性符合率逐渐提高,CD44阳性表达率也提高。普通法分离的骨髓间充质干细胞较克隆纯化的骨髓间充质干细胞CD14阴性符合率差,前者的CD44阳性表达率也较后者低。     

骨髓间充质干细胞的生物学特性及在组织修复中的应用

骨髓间充质干细胞MSC具有多向分化潜能,具有向骨、软骨、韧()带、肌腱等中胚层组织及神经外胚层组织分化的能力。MSC固有的优势和特性,使其成为组织工程理想的种子细胞。描述MSC在骨组织工程、软骨组织工程、神经组织修复及其他组织修复中的研究和应用进展情况。MSC将在医学组织工程中发挥重大作用,具有广阔的应用前景。     

超声监测水压灌肠治疗小儿肠套叠68例效果观察

目的观察超声监测水压灌肠治疗小儿原发性肠套叠的临床效果。方法选取本院2011年6月~2013年6月收治的136例患儿,将其随机分为实验组和对照组,每组各68例。其中对照组患儿均采用X线下空气灌肠治疗,实验组患儿采用超声监测水压灌肠治疗,观察两组患儿的临床治疗效果。结果实验组66例患儿复位成功,成功率为97.06%,显著高于对照组的77.94%（P〈0.05）;实验组患儿复位所需时间较短,63.64%的患儿复位所需时间〈0.5 h,显著短于对照组（P〈0.05）。结论超声监测水压灌肠是治疗小儿原发性肠套叠的一种非手术方法,具有安全性强和成功率高等优点,可有效替代传统的X线下空气灌肠复位术,以减少对患儿的伤害,在小儿原发性肠套叠的临床治疗中具有积极意义。     

蚕丝／聚乳酸-羟基乙酸共聚物支架降解液与骨髓间充质干细胞的增殖

背景：前期研究表明,蚕丝,聚乳酸一羟基乙酸共聚物支架浸提液具有良好的细胞相容性,基本无细胞毒性。目的：观察蚕丝,聚乳酸一羟基乙酸共聚物纤维细丝混合编织支架体外长期降解过程中降解液对兔骨髓间充质干细胞增殖活性的影响。方法：将蚕丝,聚乳酸一羟基乙酸共聚物细丝混合编织支架材料置于完全培养基中体外降解14周,每周换液1次,测定各周支架降解液的pH值。将兔骨髓间充质干细胞分组培养,实验组加入各周支架降解液和新鲜完全培养基各100μL,阴性对照组加入完全培养基200μL,培养4d。MTT法检测细胞增殖、生长情况。结果与结论：①支架降解液pH值的变化：前3周下降缓慢,从7．00降到6．89;第4周起下降较快,6—11周较低,在5．16—5．67之间;12—14周里上升趋势,回升到6．95。②骨髓间充质干细胞形态：实验组及阴性对照组细胞增殖生长及形态状况基本相似。降解7—10周支架降解液对细胞的生长有抑制作用,细胞数量相对较少、较疏,而其余各周支架降解液对细胞生长无明显抑制作用。③骨髓间充质干细胞的增殖：1—6周及11—14周的支架降解液对细胞增殖无显著影响,细胞相对增殖率均在92．1％以上,毒性分级为0或1级;7—10周的支架降解液虽对细胞增殖有抑制作用,但细胞相对增殖率为82．5％-87．9％,毒性分级为1级,为合格。表明蚕丝丝素,聚乳酸一羟基乙酸共聚物混合编织支架降解液具有良好的细胞相容性。     

组织工程韧带/肌腱支架材料的研究进展

理想的组织工程韧带和肌腱的支架材料需具备耐受持续的高强度张力、耐磨损性好、无免疫原性、良好的生物相容性及降解性.目前应用于组织工程韧带及肌腱的支架材料主要可分为两大类,天然高分子材料与合成高分子材料.选择合适的支架材料非常关键,它必须具有一定的机械强度及合适的降解速度,才能在完成支架的使命后为正常组织的生长留出空间.本文对这两种材料制备的韧带和肌腱的研究进展作如下综述.     

巨噬细胞在组织工程皮肤再生中的研究进展

组织工程皮肤的出现为临床上大面积皮肤缺损的治疗提供了新方法,干细胞、生长因子以及生物材料的开发为皮肤再生医学的发展提供了巨大的前景,但它们在促进创面再生、减少或抑制瘢痕形成方面还有待于进一步的优化和研究.再生疗法的疗效很大程度上受宿主免疫系统的影响,而宿主免疫细胞尤其是巨噬细胞在组织修复和再生过程中起着重要的作用.因此...     

3D打印技术构建支架修复软骨缺损的研究进展

3D打印技术是近年来兴起的一种数字化快速成型技术。本文就3D打印技术在软骨修复中研究较多的"生物打印墨水"、种子细胞的控制性打印以及牺牲层工艺打印技术等方面进行综述,总结其在软骨缺损治疗中的研究进展,并提出了当前该技术在研究和应用中遇到的问题及其发展趋势。     

负载TGF-β1微球的壳聚糖-丝素支架复合骨髓间充质干细胞修复兔关节软骨缺损的实验研究

目的研制负载转化生长因子β1（transforming growth factor—β1,TGF—B。）壳聚糖微球的壳聚糖-丝素支架复合骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）体外构建组织工程软骨,观察将其移植修复兔膝关节软骨缺损的效果。方法通过密度梯度离心法及贴壁培养法分离纯化MSCs,以抗兔CD14、CD44等单抗采用流式细胞仪进行MSCs表面抗原鉴定,获得纯化的MSCs。采用乳化交联法获得包裹TGF—B,壳聚糖缓释微球,并将该微球负载在冷冻干燥获得的壳聚糖一丝素支架上。将培养的MSCs种植到支架上,体外构建组织工程软骨,移植到兔关节软骨缺损处。移植空白支架的为实验对照组,移植体外构建的组织工程软骨为实验组。主要观察指标,流式检测的MSCs细胞表面标记情况,微球的形态,支架与细胞共培养后电镜下情况,支架移植后的兔关节修复情况及组织学检查。结果流式检测MSCs第4代及第9代细胞的CD14及CD44表面抗原的表达情况发现两代MSCsCD14表达基本呈阴性,CD44表达呈阳性,符合间充质干细胞的特性。扫描电镜观察所制备的微球基本呈球形,表面光滑,直径约为1μm,大小较均一,分散度好。细胞在壳聚糖-丝素三维支架上生长状态良好,电镜观察,可见支架孔隙内有细胞黏附生长。移植治疗后发现实验组修复明显好于对照组,实验组术后3个月实验组已经有较硬的类软骨组织填充修复,切片显示有软骨细胞规则排列,甲苯胺蓝染色为阳性,而对照组仅为纤维组织修复,切片显示为纤维组织或纤维软骨组织修复,软骨细胞排列紊乱,甲苯胺蓝染色阴性或弱阳性。结论负载TGF—β1壳聚糖微球的壳聚糖-丝素支架复合骨髓间充质干细胞体外复合培养后移植治疗修复兔膝关节软骨缺损,具有较好的疗效。     

人体粒单细胞单克隆抗体的制备及测定

单克隆抗体技术的产生,对研究血液病细胞表面抗原的结构与功能开创了有效的方法,为研究和解决白血病诊断和治疗提供了新的途径。髓系粒细胞单抗与造血和非造血细胞有广泛交叉,给鉴定工作带来许多困难,进展缓慢。髓性白血病的治疗方案与淋巴性白血病不同,冈此,鉴别这两类白血病至关重要。