包裹转化生长因子β1壳聚糖缓释微球的研制*

目的：制备包裹转化生长因子β1的壳聚糖微球,并分析其各种特性。 方法：将壳聚糖溶解在2%乙酸中,利用吐温-80作为乳化剂,多聚磷酸钠作为交联剂,以乳化交联法制备载有转化生长因子β1的壳聚糖微球;同时制作空壳聚糖微球以及包裹牛血清白蛋白的壳聚糖微球作为空白对照和实验对照。对获得的3种冻干微球的形态,直径大小进行观察,对转化生长因子β1壳聚糖微球的分散情况及所载药物的体外释放情况进行检测,并测定空壳聚糖微球及包裹牛血清白蛋白壳聚糖微球的吸水膨胀率。 结果：冻干后的微球经过扫描电镜观察后发现：空壳聚糖微球直径约15 μm,表面光滑,有较多微小孔隙,而包裹了牛血清白蛋白及转化生长因子β1的壳聚糖缓释微球直径约为1 μm,大小较均一,表面光滑。包裹了转化生长因子β1的壳聚糖微球在释放实验中前12 h内释放速度较快,随后趋于平缓。6 d内微球的转化生长因子β1释放率为53.5%。壳聚糖微球及包裹了牛血清白蛋白的壳聚糖微球在1 h后增加的质量基本达到平衡,均超过700%,且发现微球越是在酸性环境中,吸水膨胀率越高。 结论：实验采用乳化交联法制备包裹转化生长因子β1的壳聚糖缓释微球的方法简单易行,成球性好,得率高,具有良好的缓释效果。且壳聚糖微球的超强吸水膨胀率对软骨组织工程支架提出了孔径大小及强度的要求。 关键词：壳聚糖;缓释微球;转化生长因子β1     

兔骨髓基质干细胞的分离生长及冻存技术研究

目的：建立兔骨髓基质干细胞(MSC)体外分离、培养、增殖、冻存的方法，以及探讨其生物学特性。方法：抽取兔髂骨及胫骨的骨髓液，采用密度梯度离心法结合贴壁培养法分离纯化出MSC，并增殖。观察MSC的生长特性，测定其贴壁率及第3、8、13、18代的生长曲线，并评价其生物学特性。MSC在12．5％DMSO条件下经液氮或-60℃冻存复苏，测其成活率。结果：MSC为贴壁生长，以均一的梭形的成纤维细胞样生长，贴壁及增殖能力强，所测各代的生长曲线呈相似的S型，倍增时间约为35h。MSC需液氮保存，短期也可-60℃冰箱保存。结论：获得的兔MSC生长旺盛、增殖能力强，其分离、培养、纯化、增殖、冻存方法是可行的，可较长时间稳定地培养增殖、冻存，传代的MSC可保持其原代的生物学特性。MSC将是组织工程理想的种子细胞。     

干细胞分化调控机制研究的新进展

干细胞是一类具有自我更新、高度增殖和多向分化潜能的细胞，理论上具有无限分裂能力，在特定条件下，可分化成特定组织。如下图所示：     

大鼠骨髓间充质干细胞的分离增殖及分化潜能活性

目的：建立大鼠骨髓间充质干细胞（MSC）体外分离、纯化、增殖的方法，并观察其体外分化为成骨细胞及软骨细胞的潜能活性。方法：取SD大鼠的股骨及胫骨，冲取骨髓液，采用贴壁培养法分离纯化MSC，增殖，并测定其生长曲线。对第三代大鼠MSC进行成骨矿化诱导，测定其碱性磷酸酶（ALP）活性及成骨矿化情况。对第三代大鼠MSC进行诱软骨细胞的诱导分化，测定诱导后的细胞表型情况。结果：大鼠MSC为均一的梭形的成纤维细胞样生长，贴壁及增殖能力强。生长曲线呈S型。在成骨诱导剂作用下，MSC具有成骨能力，诱导后AIP活性显著提高。并出现矿化结节沉积。在成软骨诱导剂作用下，可见细胞由成纤维细胞样的梭形变为椭圆形及肾形，并分泌异染基质，甲苯胺蓝染色呈阳性，表现为软骨细胞分化特点。结论：获得的SD大鼠MSC生长旺盛，增殖能力强。在特定诱导条件下。大鼠MSC体外可定向分化为成骨细胞及软骨细胞。具有成骨及成软骨分化潜能。     

冬病夏治的临床运用

冬病夏治是指在冬季易发或多发的疾病，在夏季伏天进行治疗的方法，突出了治未病的思想，包括内服外治等多种治疗方法和手段。本文主要介绍用中药研末穴位外敷的治疗方法。在夏季初、中、末伏各敷1次，每次10～24h，以皮肤出现小水泡为准，3年为1个疗程。此法疗效甚佳，现简述如下。     

肠出血性大肠杆菌O157：H7（浙江株）的细胞毒性作用及其意义探讨

目的 用Vero、HeLa、CHO及KMB17细胞测定EHECO157：H7首例浙江株97-1-68菌株的细胞毒性同时与其他菌株作比较。方法 采用微量组织培养板的单层细胞培养,测定菌体超声裂解液及细菌培养上清液的细胞毒性作用效价。结果 97-1-68菌株对全部4株细胞均无细胞毒性作用。而阳性对照株对Vero、HeLa细胞具有较强的细胞毒性作用。结论 本文认为在EHECO157：H7感染中可能存在流行株和非流行株“两类菌株”。     

肠出血性大肠杆菌O157:H7分子生物学检测

本文对肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7的分子生物学检测方法(DNA探针聚合酶链反应),以及O157:H7的流行菌株分析的研究进展作了综述。     

中西医结合治疗乳腺增生病疗效观察

1995年1月-2005年12月笔者应用中西医综合治疗乳腺增生，取得很好的疗效，现报道如下。     

大肠杆菌O157:H7的分离筛选与实验诊断

O157:H7菌株是新近认识的肠出血性大肠杆菌(EHEC)的主要菌株.自1982年首次在美国发现以来,全球许多国家相继发生该菌感染及暴发流行,成为新的凶险传染病之一.国内自1987年首次分离到O157:H7以来,许多地方已发现该菌株.