乳腺癌晚期患者循环肿瘤细胞表型Vimentin mRNA与AKT1 mRNA水平表达对临床疗效评估的价值研究

目的　探讨乳腺癌晚期患者外周血中循环肿瘤细胞（circulating tumor cells,CTC）表型标志物波形蛋白（Vimentin）mRNA与蛋白激酶B（protein kinase B,AKT1） mRNA表达水平与患者治疗疗效的相关性。方法　收集2018年6月～2020年1月在福建医科大学附属泉州第一医院乳腺外科就诊且初次确诊为晚期乳腺癌的患者共43例，同时选择15例健康体检者作为对照组。每次分别在患者治疗前以及经过2个治疗周期结束后采集外周血标本7.5ml，经差相富集法富集CTC后检测其Vimentin mRNA及AKT1 mRNA的表达情况，并据实体瘤疗效评价标准1.1（response evaluation criteria in solid tumors, RECIST）进行疗效评估。实验所得数据使用SPSS20.0统计软件进行数据分析，GraphPad Prism 7.0软件进行数据的作图。结果　晚期乳腺癌患者Vimentin mRNA和AKT1 mRNA的相对表达量均高于健康对照组（t=2.841，2.480,均P＜0.05）。患者治疗后Vimentin mRNA和AKT1 mRNA相对表达量低于治疗前，差异均有统计学意义（t=2.879，2.282,均P＜0.05），且治疗后Vimentin mRAN表达量下降患者有更高的治疗有效率（P＜0.05）。结论　晚期乳腺癌患者治疗后Vimentin mRNA和AKT1 mRNA表达量均显著降低，且治疗后Vimentin mRNA表达量降低与更高的治疗疗效有关，提示治疗前后Vimentin mRNA的变化可用于评估患者治疗疗效。     

登革病毒外膜蛋白DⅢ区融合基因真核表达载体的构建及免疫效果研究

目的:构建登革病毒外膜蛋白DⅢ区融合基因真核表达载体并分析其免疫原性.方法:利用连接肽将登革病毒1型与2型、3型与4型的外膜蛋白(E蛋白)DⅢ基因片段连接在一起,克隆人真核表达载体pCDNA3.1(+),构建DEN1/2型、DEN3/4型EDⅢ融合基因的二价真核表达载体,转染哺乳动物细胞BHK-21,用间接免疫荧光法和免疫印迹法鉴定目的蛋白的表达.将两种二价重组质粒混合形成四价DNA疫苗免疫小鼠,观察其免疫原性及诱导产生中和抗体的能力.结果:二价重组质粒能在BHK-21细胞中表达目的蛋白,四价DNA质粒免疫小鼠,能诱导产生针对登革病毒1~4型的中和抗体,平均中和效价分别为l:24.7、1:26.9、1:13.4、1:16.0.结论:本研究构建的DNA质粒在小鼠模型中具有良好的免疫原性,为登革多价DNA疫苗的研究提供了可行性.     

登革热病毒Ⅰ型外膜蛋白DⅢ区的克隆、表达及重组蛋白的应用

目的选取DVⅠ外膜蛋白DⅢ区基因进行克隆、表达和纯化,以获得能应用于血清学诊断的纯化重组蛋白。方法用RT-PCR和套式PCR法扩增登革病毒Hawaii株外膜蛋白DⅢ区基因,与表达载体pET-30a连接,构建重组表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,重组蛋白经Western-blot鉴定活性后用电洗脱法进行纯化。纯化的重组蛋白用间接ELISA法和捕获ELISA法应用于血清学检测,检测结果与间接免疫荧法进行比较。结果重组表达质粒在大肠杆菌中表达高产量的重组蛋白,Western-blot结果显示重组蛋白具有免疫活性。纯化的重组蛋白对登革热病毒Ⅰ型感染者具有很高的检出率,与间接免疫荧光法检测结果基本相符。结论DVⅠ外膜蛋白DⅢ区基因在大肠杆菌中成功表达,重组蛋白可应用于血清学检测。     

甲状腺功能亢进症病人的创伤护理

甲状腺功能亢进症（简称甲亢）是临床常见的内分泌系统疾病。主要表现为神经兴奋性增高和高代谢的症候群。２０００年我院收治了一名有甲亢病史的创伤病人,患者因车祸所致右股骨髁上粉碎性骨折,病人住院后甲亢病复发加重并诱发甲状腺危象。经过积极抢救治疗,病人安全经过手术治疗后,全愈出院。１ 甲亢病人创伤的临床特点１．１ 甲亢病人由于血液中甲状腺激素水平较高,作用于神经系统病人表现为交感神经兴奋性增强,神经过敏,易激动,烦躁不安身体受严重伤害后,心里应激反应强,,如不及时对甲亢病人进行检查和对症治疗易引起甲亢病的…     

泉州地区女性人乳头状瘤病毒感染与宫颈病变的相关性探讨

目的探讨泉州地区女性人乳头状瘤病毒(HPV)的感染率及型别分布特点。方法采用导流杂交基因芯片法对泉州地区4769例女性进行HPV分型检测,其中562例同时做液基细胞学(TCT)检测。结果筛查人群HPV的总感染率为23.6%,感染率最高的型别为HPV16,为26.6%;其次为HPV52、11、58、6、18,分别为18.8%、16.2%、13.4%、12.2%、8.8%;各年龄段HPV的感染率差异有统计学意义(χ2=36.486,P<0.01),82例宫颈癌患者HPV感染率为86.6%,显著高于宫颈炎患者(2χ=110.414,P<0.01)和健康体检者(2χ=157.925,P<0.01);宫颈癌患者HPV感染以HPV16型为主,其次为HPV18型。结论不同人群HPV感染率差异有统计学意义(P<0.01),HPV感染与宫颈病变及宫颈癌的发生密切相关,HPV检测是筛查宫颈癌的有效辅助方法。     

登革病毒重组亚单位疫苗的构建及免疫原性分析

目的 构建登革病毒1～4型重组亚单位疫苗,分析重组疫苗的免疫原性.方法 利用连接肽将登革病毒1型与2型,3型与4型的外膜蛋白DⅢ基因片段连接在一起,克隆人原核表达载体pET-30a,在大肠埃希菌中表达DEN1/2型、DEN3/4型融合重组蛋白.重组蛋白经高效液相色谱柱分离纯化后,混和免疫小鼠,采用中和实验法测定血清中和抗体效价,同时进行乳鼠体内中和实验,观察中和抗体对乳鼠的免疫保护作用.结果 重组蛋白能诱导小鼠产生针对登革病毒1～4型的中和抗体,平均中和效价分别为1：34.9、1：45.3、1：24.7和1：38.4.中和抗体能保护新生乳鼠免受致死剂量DEN1～4的攻击,保护率分别为100%,100%,83%,83%.结论 构建的重组亚单位疫苗具有良好的免疫原性,能诱导小鼠产生中和抗体,为构建单一四价疫苗提供了实验室依据.     

中国福建泉州地区心脑血管患者 CYP2C19，ABCB1基因多态性的检测分析

目的　检测分析泉州地区心脑血管病患者氯吡格雷相关基因细胞色素 P4502C19（ CYP2C19）和三磷酸腺苷黏合 转运体B1 （ ABCB1）的突变情况。方法　收集2018 年5 月~2019 年5 月到泉州第一医院住院接受治疗的2 029 例心脑 血管病患者的全血标本,采用sanger 测序法检测 CYP2C19,ABCB1基因型,应用Hardy-Weinberg 遗传平衡吻合度检验方法, 判断选取的标本是否具有群体代表性。根据性别、年龄因素对患者进行分组,采用四格表资料的χ2 检验,R×C 表资料的 χ2 检验比较各组间氯吡格雷代谢相关基因CYP2C19,ABCB1,氯吡格雷代谢型的分布差异。结果　CYP2C19* 2（G681A）, * 3（G636A）,* 17（C806T）,ABCB1（C3435T）的等位基因频率分别为 57.1 %,10.0%,1.5% 和60.1%,每个等 位基因分布的观察值和预期值差异有统计学意义（χ2=0.000~3.316,均P >0.05）,符合遗传平衡定律, 具有群体代表性。 CYP2C19 * 1 /* 1,CYP2C19 * 1 / * 2,CYP2C19* 1 /* 3,CYP2C19* 1 /* 17,CYP2C19* 2 /* 2,CYP2C19* 2 /* 3, CYP2C19* 2 /* 17,CYP2C19 * 3 /* 17 基因型频率分布分别为 35.5%,42.1%,6.4%,0.9%,11.1%,3.4%,0.4 % 和0.2%, 氯吡格雷超代谢型、快代谢型、中代谢型、慢代谢型的频率分别为0.9%,35.5%,49.1% 和14.5%。CYP2C19 基因型及 氯吡格雷代谢类型在不同性别之间分布差异有统计学意义（χ2=838.9~1361.134,均P <0.05）,氯吡格雷代谢类型在男 性不同年龄段的差异无统计学意义（χ2=11.408,P >0.05）,氯吡格雷代谢类型在女性不同年龄段的差异无统计学意义 （χ2=21.262, P >0.05）。ABCB1（C3435T）基因型CC,CT 和TT 的频率分别为39.9%,44.4% 和15.7%,ABCB1 基 因型在不同性别之间分布差异有统计学意义（χ2=139.445,P <0.05）。结论　泉州地区心脑血管患者 CYP2C19 基因型 主要以CYP2C19 * 1 /* 2 （42.1%）为主,ABCB1 基因型主要以CT（44.4%）为主,氯吡格雷代谢表型以中代谢（49.1%） 为主。CYP2C19 基因型、ABCB1 基因型及氯吡格雷代谢类型在不同性别之间是有差异的。氯吡格雷代谢类型在同性不 同年龄段是没有差异的。     

聚合酶链反应在性传播疾病诊断中的应用

国内性传播疾病（STD）的发病率逐年增加，除了常见的淋球菌外，还有多种病原体可引起STD，而且多种病原体混合感染的病例不断增多．有些病原体感染的临床症状相似或不明显，易造成漏诊或误诊．因此加强对STD病原体的检测日益重要。笔者用聚合酶键反应（PCR）对410例可疑STD患者的尿道或宫颈分泌物分别进行淋球菌（NG）、钦眼衣原体（CT）、解脲脲原体（Uu）、单纯疤疹病毒Ⅱ型（HSV-Ⅱ型）、人乳头瘤病毒（HPV）检测，结果如下．一、材料和方法1．试剂PCR试剂为浙江伊利康生物技术有限公司产品．2．标本来源l996年元月至6月我…     

宫颈癌组织中HPV16型E6/E7序列突变分析

目的：分析泉州地区宫颈癌患者HPV16型E6/E7序列突变情况,探讨其与宫颈癌发生的相关性。方法：取35例HPV16阳性的宫颈癌组织标本,采用PCR法扩增E6、E7全长基因。PCR产物直接测序,并与野生型序列进行比对。分析E6、E7基因的变异情况。结果：E6、E7基因的突变率分别为91.4%和89.2%。E6基因中有10个位点为错义突变, 2个位点为无义突变。氨基酸突变频率最高的是D25E（77.1%）。E7基因中共发现5个突变位点,有2个位点为错义突变,3个位点为无义突变,突变频率最高是N29S和无义突变T846C（均为75.0%）。结论：HPV16 E6、E7基因中最常见突变位点D25E、N29S和T846C可能与宫颈癌的发生密切相关,可为研究针对中国人群的HPV疫苗提供一定的线索。     

登革热实验诊断和疫苗的研究进展

登革病毒（dengue virus,DV）属于黄病毒科黄病毒属,是现今最重要的虫媒病毒。它可引起登革热（dengue fever,DF）,登革出血热（dengue hemorrhagic fever,DHF）和登革休克综合征（dengue shock sydrome,DSS）。全球有2．5亿人正受到感染登革病毒的威胁,100多个国家有地方性登革热传播。每年均出现几百万病例,是个较为严重的公共卫生问题。本文论述了登革热的流行病学概况、分子生物学特征以及实验室诊断和免疫保护方面的国内外研究进展。