选择性增菌在产TEM型ESBL菌株痰标本检测中的应用

目的:探索选择性增菌在痰标本TEM型ESBL菌株痰标本检测中应用的可行性.方法:从郑州大学第一附属医院30份不重复的痰标本中分离出TEM型ESBLs菌株,采用LB液体培养基进行增菌培养,应用氨苄青霉素(终质量浓度为100 mg/L)进行选择抑菌,采用酶抑制剂增强试验及PCR技术进行ESBLs确证.结果:酶抑制剂增强试验中头孢噻肟与头孢噻肟/克拉维酸抑菌环直径差大于5 mm;PCR扩增产物在约900 bp处有明显条带.结论:选择性增菌方法简单、快速,准确,可用于痰标本中TEM型ESBL菌株的检测.     

纤维蛋白支架对人嗅鞘细胞髓鞘形成相关蛋白表达的影响

目的:探讨纤维蛋白支架对人嗅鞘细胞髓鞘相关蛋白表达的影响.方法:将体外培养的成人鼻粘膜嗅鞘细胞种植于纤维蛋白支架,用多聚赖氨酸修饰的玻片作为对照底物,培养14 天后用扫描电镜观察细胞的形态学变化并对细胞内髓鞘形成相关蛋白2,3-环核苷3-磷酸二酯酶(2′,3′ cyclic nucleotide 3′ phosphodiesterase,CNPase)和髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein, MBP)进行免疫荧光染色定位和免疫印迹半定量测定,分析纤维蛋白支架对人嗅鞘细胞CNPase和MBP表达的影响.结果:人嗅鞘细胞种植于纤维蛋白支架后,其形态为长条带状,细胞成束排列,方向一致.细胞内CNPase和MBP表达水平明显高于对照组.结论:纤维蛋白支架与人嗅鞘细胞具有很好的生物相容性并可促进细胞表达髓鞘相关蛋白CNPase和MBP;将该组织工程支架用于移植治疗脊髓损伤,有利于再生神经纤维的髓鞘形成.     

血管内皮细胞生长因子与缺血性脑血管病

血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)是迄今为止已知的最强的促血管生长因子，其由多种正常细胞产生和分泌，特异性作用于存在VEGF受体即flt—l(VEGFR—1)或KDR(VEGFR-2)的血管内皮细胞(VEC)而实现其生物学效应。除人们所熟知的可以增加血管通透性，促进血管生成，维持血管功能，修复损伤后血管的功能外，更有研究表明其对神经细胞有直接保护作用并可促进神经元的生成。缺氧为VEGF／VEGFR表达的最强调节因素。许多实验都证实了脑缺血过程中均伴有VEGF及其受体的表达，与缺血性脑血管病的发生发展密切相关。目前VEGF作为一种功能强大且能产生多种效应的细胞因子因其潜在的治疗前景引起国内外的广泛关注。     

大鼠脊髓损伤后HIF-1α和VEGF表达的上调及其在血管新生中的意义

目的:探讨脊髓损伤后神经细胞内缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)表达水平的变化在血管新生中的意义.方法:应用改良Allen重击法损伤大鼠T12脊髓,按伤后存活时间再分为脊髓损伤1 d,3 d,7 d,14 d和30 d组.各组动物的脊髓切片经免疫荧光染色后,用荧光显微镜观察HIF-1α,VEGF的表达和分布,对Laminin免疫反应阳性的血管基膜进行图像分析,比较上述各组的血管密度.结果:HIF-1α和VEGF共定位于脊髓前角运动神经元,脊髓损伤局部的免疫荧光强度高于正常脊髓内的荧光强度,在脊髓损伤后第3天,其荧光强度达到高峰.脊髓损伤后Laminin阳性血管主要分布于损伤坏死组织周围并逐渐向坏死组织内生长,血管密度经历由低到高的过程.结论:脊髓损伤后损伤部位残存神经元可能通过表达高HIF-1α诱导VEGF表达增加,后者通过旁分泌模式作用于周围血管内皮细胞以促进内皮细胞增殖和血管再生.     

大鼠蛛网膜下腔注射脂多糖后脊髓神经细胞内肿瘤坏死因子的表达及其动态变化

目的:探讨蛛网膜下腔注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)后,肿瘤坏死因子(TNF-α)在脊髓组织内表达水平的动态变化及其在神经细胞内的定位.方法:SD大鼠蛛网膜下腔注射LPS后,采用ELISA法检测大鼠脊髓组织匀浆内TNF-α含量;脊髓组织切片经神经丝(NF)和TNF-α免疫荧光双染色后,在荧光显微镜下观察TNF-α在脊髓神经细胞内的定位.结果:脊髓组织内的TNF-α于蛛网膜下腔注射LPS后 1 h 开始升高,6 h 达到第一个高峰,随后下降,至24 h 降至最低但仍高于正常水平,而后又开始上升,在第5天时达到第二个高峰后再逐渐下降,到第14天仍略高于正常水平.结论:脊髓组织内的细胞受LPS刺激后,可产生大量的TNF-α,介导神经组织的炎症反应;脊髓灰质内的神经细胞是LPS的主要靶细胞,可能具有调节脊髓损伤局部炎症反应的生物学功能.     

Barrett食管75例临床治疗观察

目的 研究不同方法治疗Barrett食管(BE)患者的疗效,探索各种治疗方法产生效果的可能机制,筛选出合理有效、实用的Barrett食管治疗方案.方法 经胃镜及活检确诊的Barrett食管患者75例,随机分为5组,对照组(A组):未给予治疗;抑酸药组(B组):口服奥美拉唑20 mg,2次/天;胆汁吸附剂组(C组):口服铝碳酸镁1000 mg,每日3次;抑酸药 胆汁吸附剂组(D组):口服奥美拉唑20 mg,2次/天;口服铝碳酸镁1000 mg,3次/天;氩气凝固术(APC) 抑酸药及胆汁吸附剂组(E组):行内镜下氩气凝固术治疗,之后口服奥美拉唑20 mg,2次/天,口服铝碳酸镁1000 mg,3次/天.各组均治疗3个月.治疗前、治疗后1个月及3个月后观察临床症状及内镜下表现.结果 各治疗组的临床症状均较治疗前明显改善,与对照组比较均有显著性差异(P＜0.05);各治疗组比较,症状缓解率无明显差异(P＞0.05).对照组和单纯药物治疗组的Barrett食管黏膜均未见明显缩小,E组能使91.3%的Barrett食管患者Barrett食管黏膜消除.结论 抑酸药和(或)胆汁吸附剂不能使Barrett食管逆转,但可消除临床症状;APC 抑酸药及胆汁吸附剂方案可以消除症状,也可消除Barrett食管黏膜,安全性好,是治疗Barrett食管的一种合理可行、有效实用的方法.     

单核细胞趋化蛋白-1基因-2518G/A多态性与中国湖南地区汉族人群脑梗死关系的研究

目的探讨单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)基因-2518G/A多态性与中国湖南地区汉族人群脑梗死(CI)的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)、DNA测序等方法检测162例CI患者(CI组)和150名健康对照者(NC组)MCP-1基因-2518G/A多态性;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测两组血清MCP-1水平。结果CI组GG、GA、AA基因型频率分别为39.5%、37.0%、23.5%,G、A等位基因频率分别为58.0%、42.0%;NC组GG、GA、AA基因型频率分别为27.3%、39.3%、33.4%,G、A等位基因频率分别为47.0%、53.0%。CI组GG基因型和G等位基因频率显著高于NC组(均P<0.05)。CI组血清MCP-1含量[(157.68±11.60)pg/ml]明显高于NC组[(131.82±10.72)pg/ml](P<0.05);MCP-1基因-2518G/A多态位点中含G等位基因者(GG+GA)血清MCP-1含量[(149.44±15.71)pg/ml]显著高于非G等位基因携带者(AA)[(134.57±15.84)pg/ml](P<0.05)。结论MCP-1基因-2518G/A位点的G等位基因可能是中国湖南地区汉族人群CI发病的遗传易感基因。携带G等位基因的个体可能通过上调MCP-1表达而增加CI的发病风险。     

NGF及其活化受体p-TrkA在人脑胶质瘤细胞株U251细胞周期中的多靶点分布模式

为了探讨神经生长因子(NGF)及其活化受体磷酸化的酪氨酸蛋白激酶A(p-TrkA)在人脑胶质瘤细胞株U251细胞周期中的多靶点分布模式及其生物学意义,采用免疫荧光双标记技术对处于细胞周期不同时相细胞内的NGF和p-TrkA的动态分布进行亚细胞定位,并观察了抗癌药物羟基脲、紫杉醇和秋水仙素及抗NGF-β中和血清对NGF和p-TrkA在细胞分布的影响;用免疫印迹技术检测细胞核和细胞质内NGF和p-TrkA的相对含量以及细胞培养液内的分泌性NGF。免疫荧光染色结果表明:分裂相细胞在重新贴壁生长6h后,NGF主要分布于核周区,p-TrkA主要定位于细胞膜;培养12h后,NGF和p-TrkA共同转位至细胞核内;在M期,NGF主要定位于中心体,p-TrkA主要定位于纺锤丝;用羟基脲将细胞阻滞于G1/S期后,NGF和p-TrkA主要积聚在细胞核内;用紫杉醇或秋水仙素处理后,NGF与γ-Tubulin仍然共定位于中心体,p-TrkA与α-Tubulin共定位于异形纺锤丝上或弥散分布于细胞质内。用兔抗人NGF-β抗血清中和培养基中分泌性的NGF后,细胞内NGF和p-TrkA免疫荧光强度明显减弱。免疫印迹结果显示:G1/S期细胞核内的NGF和p-TrkA蛋白条带明显浓于细胞质内的蛋白条带。上述结果提示:人脑胶质瘤U251细胞高表达NGF及其高亲和力受体TrkA,并将NGF分泌至细胞外;胞外NGF与细胞膜上TrkA结合后形成NGF/p-TrkA复合物内化入胞内;NGF/p-TrkA在细胞内的分布具有细胞周期性特征;NGF/p-TrkA可通过多靶点作用模式调控U251细胞的生物学行为。上述多靶点分布模式为研制NGF修饰的抗肿瘤靶向药物提供了细胞生物学基础。     

稳恒磁场对大鼠胚胎脊髓神经细胞发育的影响

目的 研究稳恒磁场对大鼠胚胎脊髓神经细胞发育的影响。方法 观察1．0、10、0、50．0、100．0、200．0mT的磁场对原代培养的Wistar大鼠胚胎脊髓神经细胞形态、分化、增殖、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)活力和蛋白质含量的影响。结果 50、0～200、0mT组胚胎脊髓神经细胞分化、增殖受到抑制,细胞有聚集现象,部分细胞脱落,集落形成率明显减少,细胞体积小,细胞内MDA含量增加,SOD活力下降和蛋白质相对含量降低。结论 50．0～200．0mT稳恒磁场可促进脊髓神经细胞脂质过氧化过程而致发育期神经系统的损伤。     

有效清洁自然通风与紫外线照射空气净化作用对比研究

目的寻求一种有效、安全、无毒、方便、实用、费用低、回归自然的空气净化方法。方法选择医院1、3、5、8层楼普通病房和治疗室的空气质量作为监测对象,在不同季节、不同时间,同时进行有效清洁后自然通风与紫外线照射前后的空气、物体表面采样,监测细菌菌落情况并进行相互对比分析。结果有效清洁后自然通风能使室内空气清新洁净,各项空气监测参数达到一般病房空气指标要求,与紫外线照射后空气监测结果进行比较,两者无显著性差异。结论有效清洁通风能取代或弥补目前医院紫外线照射存在的缺点及局限性,可作为病房内空气净化的常规方法。