异种羊脱细胞真皮基质与自体微粒皮复合移植后创面愈合及COX-2、VEGF的表达研究

目的 制备异种羊脱细胞真皮基质(ADM),观察异种羊ADM与自体微粒皮复合移植的组织学变化,以及免疫组化法检测环氧化酶-2(COX-2)、血管内皮生长因子(VEGF)在复合移植过程中的表达.方法 用0.25%胰蛋白酶和0.5%曲拉通(Tritonx-100)溶液联合脱细胞法制备异种羊ADM.以48只wistar大鼠为动物模型随机分为2组,每组各24只,背部做4 cm×3 cm全层皮肤缺损,分组采用羊ADM+自体微粒皮+异体皮(实验组)及自体微粒皮+异体皮(对照组)覆盖,术后2、4、6周观察植皮区愈合情况,检测创面收缩率;同时,在以上不同时间段处死大鼠做组织病理学观察及免疫组化检查.结果 (1)通过实验可成功制备出合格的异种羊ADM,脱细胞异种皮的镜下观察可见基质中的表皮已经完全除去,胶原纤维粗细均匀,排列规则,没有细胞成份存在.(2)进行移植术后,观察6周,两组皮片创面基本愈合,两组创面收缩率差异具有统计学意义(P<0.05),实验组术区收缩程度低,组织学检查可见成纤维细胞和血管长人,胶原纤维、弹力纤维结构排列规则;对照组创面收缩明显,组织学检查见成纤维细胞和血管无规则生长,胶原纤维、弹力纤维结构排列紊乱.两组大鼠创面COX-2、VEGF表达差异无统计学意义(P>0.05).结论 异种羊ADM在彻底脱除了基质中有免疫原性的细胞成分的同时,又保留了组织的基本结构,成为极低抗原性的真皮支架,是一种良好的真皮替代物;异种羊ADM与自体微粒皮复合移植后外观和功能优于自体微粒皮移植;COX-2,VEGF可能参与了创面的修复.     

放射性核素^125I与神经生长因子的偶联及条件优化

目的: 探讨放射性核素125I与神经生长因子(nerve growth factor,NGF)偶联的最优反应条件.方法: 采用联结标记法进行125I与神经生长因子偶联反应,在125I投料量固定为37 MBq的条件下,改变NGF的投料量分别为20,50,100,150 μg,同样的条件下反应后以三氯醋酸沉淀法计算产率.将产物保存于4℃,于1,2,3,5,7天,2,3,4周时间点检测产物的放射性化学纯度,评价产物的体外稳定性.结果: 当NGF投料量由20 μg增加到50 μg时,125I-NGF产率由76.6%迅速增加到79.0%,当继续增加NGF投料量至150 μg时,125I-NGF产率仅增加1.2%.经过连续4周观测,本标记方法的产物125I-NGF在体外4℃储存条件下未发现明显脱碘,放射化学纯度始终大于80%.结论: 125I与神经生长因子偶联的理想原料配比为37 MBq 125I与50 μg NGF进行反应,该条件下的产物125I-NGF放射性浓度为97.31 MBq/ml,放射性比活度为584.6 MBq/mg.     

骨髓间充质干细胞在骨形态发生蛋白2/注射式硫酸钙载体上的成骨

背景：将生长因子复合到支架上构建复合材料可同时具备骨诱导和骨传导作用。 目的：观察骨形态发生蛋白2/注射式硫酸钙复合载体对大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导成骨的影响。 方法：取生长状态良好的第2代SD大鼠骨髓间充质干细胞悬液,分3组培养：实验组将细胞悬液滴加到骨形态发生蛋白2/注射式硫酸钙复合材料表面,对照组在细胞悬液中加入骨形态发生蛋白2,空白对照组正常培养。 结果与结论：3组细胞随培养时间延长逐渐增多,实验组细胞数量最多,明显多于对照组及空白对照组(P < 0.05)。实验组培养不同时间点碱性磷酸酶活性高于对照组及空白对照组(P < 0.05)。体外实验显示骨形态发生蛋白2/注射式硫酸钙复合载体可促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化。     

TG2基因修饰的鼻粘膜间充质干细胞向神经样细胞分化的研究

目的:研究重组transglutaminase 2(TG2)腺病毒转染对鼻粘膜骨髓间充质干细胞(EMSCs)向神经样细胞分化影响。方法:利用贴壁筛选法分离培养和扩增EMSCs,通过免疫荧光方法分析EMSCs的纯度,采用免疫荧光和免疫印迹方法测定转染效率。实验分组:重组TG2腺病毒转染EMSCs(ad EMSCs)组、重组GFP腺病毒转染EMSCs组(GFP-EMSCs)和空白对照组(control),诱导细胞向神经样细胞分化,倒置显微镜观察分化过程中细胞形态的变化。免疫荧光和免疫印迹方法检测诱导后EMSCs的轴突膜蛋白(GAP-43),微管相关蛋白(MAP2)和髓磷脂碱性蛋白(MBP)的表达情况。向大鼠脊髓内注射ad EMSCs,2周后取脊髓。结果:实验数据表明转染TG2腺病毒的EMSCs可稳定表达TG2。诱导7 d后,ad EMSCs组细胞呈现双极和多极的典型神经样细胞形态,并且GAP-43,MAP2和MBP的表达水平较对照组高。移植入体内2周的ad EMSCs存活良好且部分细胞表达GAP-43。结论:TG2基因修饰有利于EMSCs在体外向神经样细胞分化,并且具有良好的可移植性。     

大鼠三叉神经刺激后神经肽的变化

偏头痛是一种常见病 ,但迄今其发病机理仍未完全阐明。神经激活后释放的神经肽及其对头颅血管的作用已成为关注的热点。本文应用大鼠三叉神经刺激模型 ,对刺激后血中代表交感、副交感及感觉神经系统的神经肽作一较全面探索 ,现报告如下。1　资料1 1　实验动物选择 :2 6只健康雄性ＳＤ大鼠 (上海西普尔 必凯实验动物有限公司提供 ,清洁级 ) ,体重 2 5 0～ 35 0ｇ ,随机分为预实验组 6只 ,假手术组 10只及三叉神经刺激组 10只。1 2　方法 :大鼠在 2 0 %乌拉坦麻醉 (1ｇ/ｋｇ)后 ,分离出股动脉并插管。按Ｄｉｍｉｔｒｉａｄｏｕ的方法[1 ] ,在…     

姐妹同患进行性肌阵挛性癫癎2例

1 资料例１：女,１１ 岁,反复发作四肢抽搐、意识不清２年入院,患者2年前始出现发作性意识不清、四肢抽搐,伴口吐白沫、两眼上翻、小便失禁。同时常出现四肢、面部肌肉阵挛,数秒钟后即缓解,无意识丧失,受刺激后发生较为频繁。在外院予“抗癫■”治疗效果欠佳而就诊我院。患者自发病以来,智能明显下降,现已退学。入院体检：神志清楚,发育较差,智能差,颅神经检查未发现异常,双手有意向性震颤,四肢肌力５级,肌张力增高,腱反射“＋＋＋”,对称,双侧 Ｈｏｆｆｉｎａｎｎ ｓｉｇｎ（＋）,双侧踝阵挛阳性,ＢａｂｉｎｓｋｉＳｉ…     

食管与贲门腺癌的临床病理之特点

目的比较分析食管腺癌与贲门癌的临床和病理特点,探讨两者的异同点。方法回顾、对比分析本院4年间收治的48例原发性食管腺癌,322例贲门癌的年龄和性别分布、主要症状、病理类型及分期、淋巴结转移情况、早期诊断率和手术切除率并进行统计学分析。结果食管腺癌、贲门癌多好发于老年男性。除食管腺癌的反酸及烧心症状的发生率（52．1％）高于贲门（24．2％）外,其他症状发生率两者相近。食管腺癌、贲门癌早期诊断率分别是8．3％和16．1％。食管腺癌、贲门癌手术切除率分别为81．3％和77％,根治性切除率为70．8％和68．3％。结论食管腺癌与贲门癌在一般临床特征上相似,但淋巴结播散类型不同。食管腺癌与贲门癌早期诊断率低,但手术切除率仍然较高,对其手术治疗应持积极态度。     

不同时期亚低温对短暂性脑缺血后海马神经元凋亡及Bcl-2/BaX的影响

目的观察不同时期亚低温(33℃)对短暂性全脑缺血的神经保护作用及对Bcl-2/Bax表达的影响.方法40只SD大鼠随机分成常温组、即刻亚低温组、延迟亚低温组和对照组,采用大鼠短暂性脑缺血模型,尼氏体染色观察存活神经元,TUNEL法检测凋亡神经元,免疫组化检测Bcl-2、Bax蛋白的表达.结果即刻亚低温可上调海马CA1、CA3区Bcl-2/Bax比值,减少细胞凋亡,延迟亚低温仅对CA3区有此作用.结论亚低温对缺血后神经元有保护作用,该作用与低温开始时间有关.     

丙烯酰胺对胚胎脊髓神经细胞增殖分化影响

目的 研究丙烯酰胺(ACR)对胚胎脊髓神经细胞增殖分化的影响.方法 利用大鼠胚胎脊髓神经细胞进行原代培养,从细胞形态学及细胞计数学角度观察不同浓度ACR对细胞生长与分化的影响;同时测定蛋白质含量、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,并与对照组进行比较.结果 150,300 μg/ml的ACR对大鼠胚胎脊髓神经细胞无抑制增殖和分化作用,当ACR浓度达到450,600,750 μg/ml时作用才显现,并随着浓度的加大,其抑制作用增强.结论 ACR能抑制胚胎脊髓神经细胞增殖和分化,可能与其能抑制蛋白质合成、DNA有关.     

克拉屈滨治疗经典型毛细胞白血病致间质性肺炎一例报道并文献复习

毛细胞白血病（HCL）是一种以脾大、全血细胞减少、骨髓组织增生等为临床表现的罕见慢性B淋巴细胞增殖性疾病。克拉屈滨作为其一线药物,对HCL的完全缓解率很高。本文报道了2017-09-04绍兴市人民医院收治的1例经典型HCL患者在克拉屈滨治疗期间,出现严重粒细胞缺乏伴高热,合并全身皮疹及间质性肺炎,经大剂量激素等治疗后好转的诊疗过程。并结合文献回顾了HCL的诊断及治疗方法,简述了克拉屈滨治疗HCL致间质性肺炎这一少见并发症的诊疗思路,以提高临床医师对该毒副作用的认识,为临床工作提供帮助。