NK细胞系细胞毒效应MTT比色法优化条件探讨

自然杀伤细胞 (ＮＫ)以其独特的抗病毒、抗肿瘤活性而成为机体的第一道防线。由于ＮＫ细胞数量少 ,且无特异性表面标志 ,难以获取高纯度的ＮＫ细胞 ,一度成为深入研究ＮＫ细胞的障碍。近年来ＮＫ细胞系的相继建立 ,为进一步揭示ＮＫ细胞的奥秘找到了理想模型。由于ＮＫ细胞系来     

人白细胞介素15单克隆抗体的制备及鉴定

目的 :用rhIL 15与沙门氏菌裸菌相偶联制备IL 15单克隆抗体 (monoclonalantibody ,McAb) ,以便为疾病的诊断、治疗和发病机制的研究提供可靠的生物制剂。方法 :将纯化的rhIL 15蛋白与沙门氏菌裸菌相偶联制成免疫原 ,用脾内、腹腔、静脉三种途径相结合免疫BALB c小鼠 ,以PEG为促融剂 ,将脾细胞与SP2 0细胞进行融合 ,HAT选择培养 ,间接ELISA筛选阳性克隆 ,通过多次克隆化 ,获得稳定分泌特异性McAb的杂交瘤细胞株 ,并对所获得的细胞株及分泌的McAb特性进行了分析。结果 :获得 4株能稳定分泌特异性McAb的杂交瘤细胞系 (hybridomacell,Hc) ,ELISA法检测其效价分别为 1:10 6 、1:10 7、1:10 7、1:10 7。Dotblot检测IL 15的灵敏度为 1 5ng ,其中一株 (1 7E4 )尚可用于Westernblot检测。结论 :成功制备了 4株IL 15McAb杂交瘤细胞系。     

儿童T淋巴细胞不同剂量辐射后DNA合成的增殖反应的应答

观察儿童T淋巴细胞低剂量辐射后DNA合成的刺激效应和对大剂量辐射的适应性反应。 8例儿童外周血T淋巴细胞培养后 ,予以不同的低剂量辐射 ,用14 C TdR (14 C 胸腺嘧啶核苷 )或3 H TdR (3 H 胸腺嘧啶核苷 )掺入法观察T淋巴细胞DNA合成 ,用掺入百分率和辐射损伤减轻百分数 (DRP )分别表达刺激效应和适应性反应。T淋巴细胞经 2、 5、 10cGy照射后14 C TdR掺入与 0cGy比较分别是 10 7 7%、 12 5 5 %、 133 8% ,明显增加了DNA合成。分别予以 0 5、 1 0、 1 5、 2 0、 3 0、 4 0cGy不同剂量辐射后 ,DRP分别是 2 0 8%、 33 2 %、 5 3 4 %、 4 9 0 %、 2 8 9%。 1 5cGy辐射后 6、 2 4、 4 8、 72h ,DRP分别是2 2 2 %、 5 3 4 %、 36 6 %、 11 1%。 1 5cGy辐射后 2 4h再予以 1、 3、 5、 7Gy不同大剂量辐射 ,DRP分别是 30 7%、 4 5 1%、2 6 4 %、 11 9%。儿童T淋巴细胞经适宜的低剂量辐射后可以明显增加DNA合成 ,1 5cGy辐射后 2 4h对 3Gy大剂量辐射适应性反应表达最为充分     

过敏性紫癜患儿急性期外周血OX40/OX40L的表达及意义

目的探讨共刺激分子OX40/OX40L在过敏性紫癜(HSP)患儿外周血单个核细胞(PBMC)中的表达及其在过敏性紫癜发病机制中的作用及临床意义。方法选取首次住院的34例HSP患儿作为观察组,另20例健康体检儿童作为对照组。采集分离PBMC,应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测OX40、OX40L mRNA的表达,并分析其与24 h尿微量白蛋白(24 h UMA)的相关性。结果 HSP患儿OX40、OX40L mRNA的表达均明显高于对照组,差异有统计学意义(P均<0.01)。24 h UMA增高的HSP患儿OX40、OX40L mRNA的表达均高于24 h UMA正常者,差异均有统计学意义(P均<0.05),且均与24 h UMA呈正相关(P<0.05)。结论过敏性紫癜患儿PBMC的OX40、OX40L mRNA表达有异常增高并与24 h UMA相关。提示OX40、OX40L可能参与了过敏性紫癜的发病,其或许可以作为监测HSP患儿病情及检测早期肾脏损害的免疫学指标。     

气管异物窒息所致β昏迷1例报告

气管异物窒息所致β昏迷１例报告西国基张建华１病例报告患者男性，４３岁。于１９９６年８月９日上午９时许整吞服中成药丸（直径约１．５ｃｍ）时未能咽下而嵌入气管，出现呼吸困难，口唇青紫，烦燥不安，抽搐，继而意识丧失，呼吸停止由家人急送来院，当即给予气管插管...     

DNA纤维荧光原位杂交技术

DNA纤维荧先原位杂交是一种分子细胞遗传学技术，现已应用于克隆排序、人类基因组高分辨物理图的绘制、染色体组织结构分析和致病基因的定位克隆等多个方面。本文总结了近年来该项技术在方法学、应用等方面的进展，并与其它染色体FISH方法进行比较。     

重组腺病毒载体mIL-12治疗小鼠黑色素瘤的实验研究

目的： 观察重组腺病毒载体AdmIL-12对小鼠黑色素瘤的治疗效应.方法： 皮下注射B16黑色素瘤细胞给C57BL/6小鼠建立荷瘤模型.于瘤内注射重组腺病毒载体AdmIL-12治疗, 观察皮下肿瘤的生长及荷瘤小鼠的存活期.采用乳酸脱氢酶（LDH）释放法检测荷瘤小鼠脾细胞的杀伤活性.结果： 重组腺病毒载体AdmIL-12治疗后, 能显著抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长, 明显延长荷瘤小鼠的存活时间, 增强荷瘤小鼠脾细胞的杀伤活性.结论： 重组腺病毒载体AdmIL-12对小鼠黑色素瘤有显著的治疗效应.     

131Ⅰ-SAP的制备及应用安全性研究

目的探讨一种新型淀粉样变性诊断标记物131I-SAP的制备方法及其应用安全性。方法应用Iodogen法对SAP标准品进行131I标记;纸层析法测定131I-SAP的标记率与放射化学纯度。将131I-SAP分别于4℃和37℃新鲜人血清中0h,24h,48h,72h和96h,测定放射化学纯度,评价其体外稳定性。对131I-SAP进行热原、异常毒性等安全性实验。结果131I-SAP的标记率为70.6%,96h后的放射化学纯度仍大于90%。热原、异常毒性实验均为阴性。结论131I-SAP具有较好的体外稳定性,并且无热原及明显毒性反应,适合进一步临床实验及应用的安全性。     

高强度聚焦超声治疗胰腺癌致超声通道损伤的机制研究

目的探讨高强度聚焦超声治疗胰腺癌的效果及导致超声通道损伤的机制。方法选择11例诊断明确并接受高强度聚焦超声治疗的晚期胰腺癌患者,行开放手术评价超声通道区组织、器官损伤情况,分析可能机制。结果 8例出现皮肤Ⅰ、Ⅱ度烧伤,超声通道区腹壁呈局限性浅、深筋膜纤维化样改变,肝脏呈充血样改变,胃、十二指肠、空肠、胆囊、胆总管均未发现肉眼可见的损伤。结论高强度聚焦超声治疗晚期胰腺癌有效,其损伤超声通道区组织、器官的可能机制为靶区与皮肤距离较近及消融时间相对较长。     

“腧穴解剖学”育人平台的建设

针灸治病通过刺激腧穴来疏通经络、调和气血以及平衡阴阳,从而发挥其防治疾病的作用.尽管针灸疗法本身是安全的,如果医生掌握不当,针刺某些腧穴就可能发生意外事故,轻者可能造成患者一时痛苦,重者则可能导致患者脏器严重损伤,甚至死亡[1].针对中医针灸临床发展的需要,上海中医药大学解剖学教研室通过开展科学研究,总结研究成果,编写系列教材,于1978年在国内率先开设了《腧穴解剖学》课程的教学.该课程是科研成果向教学转化的成功范例,是《腧穴学》与《局部解剖学》相结合的跨学科课程,是中西医结合领域中现代医学与传统医学相融合的创新性课程[2].于2012年获得上海市精品课程,在建设过程中有以下几方面的体会,现总结如下,供同道参考.