基于PCR的siRNA表达框的制备

目的 改进目前基于PCR的方法制备siRNA表达框,转染细胞后产生高效的RNA干扰作用。方法从K562细胞中提取基因组DNA,以此为模板,PCR扩增U6启动子序列并克隆至pMD18-T载体中,用载体上的引物进行扩增,所得产物即制成作为扩增siRNA表达框的模板。选择p53为靶基因,扩增制备siRNA表达框,测序验证后,转染SH—SY5Y细胞48h后提取RNA进行RT—PCR,检测RNA干扰的效应。结果测序结果表明所克隆的U6启动子序列正确。细胞转染表达框,在mRNA水平上,p53基因的表达明显受到了抑制。结论本实验所制作的基于PCR的方法制备siRNA表达框可以很好地应用于RNAi作用研究。     

力修内丹,促进身心健康(下)

内丹术在中国历史上屡屡被人误读，如以光的金华象征意识，以“天心”“灵台”隐喻意识存在的住宅，以精水、神火、意土炼丹之道的三要素喻本能、理性和直觉的相互作用，把修炼的过程比作为炼金丹和孕育胚胎，以“圣胎”象征新人格的诞生……如此等等。荣格从一开始就注意到了这个特点，他感叹地称东方贤哲为“象征主义的心理学家”。     

力修内丹,促进身心健康(上)

中国思想文化的核心是儒、道、佛三教。儒教追求成圣，道教追求成仙，佛教追求成佛。从早期的情况看，儒教注重修养道德人格，佛教注重解脱人生痛苦，两家皆偏重于心性。后来道教吸收了儒佛两家的心性说，又发扬了自家传统的养生说，遂形成性命双修的炼养理论。性功是道教与儒佛两教相通的地方，命功则是道教独有的传统，不讲命功则不是道教。     

基于信息系统的健康管理数据标准建设难点

介绍国内外健康管理信息系统数据标准化研究现状,分析构建基于信息系统的健康管理数据标准的特点要求,阐述数据标准制定的难点,提出完善指标体系、提高科学性、注重标准应用的解决对策.     

鼻咽癌中水通道蛋白1表达与血管生成能力的相关性研究

目的:研究水通道蛋白1(AQP1)、血管内皮生长因子(VEGF)及微血管密度在鼻咽部肿瘤及非肿瘤组织中的表达情况及其相关性.方法:收集30例鼻咽部活检标本,分别使用免疫组织化学及实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测组织中AQP1、VEGF的表达情况,计算组织中的微血管密度.结果:免疫组织化学及real-time PCR检测均证实肿瘤组织中AQP1、VEGF的表达强于非肿瘤组织,且两者存在一定相关性.结论:AQP1在鼻咽癌中通过VEGF参与血管生成,从而促进肿瘤生长和转移.     

食管胃吻合双肌瓣成形在全腹腔镜近端胃癌根治术中的应用价值

目的:探讨食管胃吻合双肌瓣成形在全腹腔镜近端胃癌根治术中的应用价值。方法:采用回顾性描述性研究方法。收集2020年1—12月中国医科大学肿瘤医院收治的5例行全腹腔镜近端胃癌根治术病人的临床病理资料;5例均为男性;中位年龄为65岁,年龄范围为57~72岁。5例病人均行全腹腔镜近端胃癌根治-食管胃吻合双肌瓣成形术。观察指标...     

潍坊市2004年碘缺乏病健康教育调查分析

潍坊市多年来一直把碘缺乏病(IDD)健康教育作为IDD防治工作的重点之一，为了解我市目前居民IDD防治知识的普及状况，为今后健康教育工作提供科学依据，2004年5月份，对我市12个县(市、区)城镇和农村的五年级学生、家庭主妇进行了一次IDD健康教育调查，现将调查情况报告如下。     

限制性显示-聚合酶链反应扩增苏云金杆菌基因片段的克隆与分析

目的运用限制性显示-PCR技术(RD-PCR)扩增苏云金杆菌(Bacillusthuringiensis,Bt)基因片段,并进行克隆、测序分析。方法设计特异性引物扩增长片段Bt基因,对扩增产物进行RD-PCR扩增,扩增后的产物克隆至pMD18-T载体并进行快速鉴定。提取阳性克隆质粒进行测序分析。结果运用RD-PCR技术,将长片断的基因(2 000-3 000 bp)分为多个短的片段,片段长度较为均一(200~600 bp)。测序结果表明,所扩增的片段均属于特异扩增的Bt基因。结论运用RD-PCR技术可以将长片段基因进行片段化,使其适用于基因芯片的探针。     

糖代谢在肠道病毒EV71复制中的作用研究北大核心CSCD

目的研究细胞内糖代谢对EV71病毒复制的影响。方法用MOI=100的EV71感染HUVECs,观察HUVECs在4h、8h和12h时存活率和EV71复制水平变化,确定EV71复制峰值时间点。用不含糖的DMEM培养基培养感染EV71的HUVECs 4h、8h和12h,检测EV71的RNA和蛋白水平改变。在EV71复制峰值时间点使用糖代谢抑制剂KAN0438757干扰糖代谢途径,检测EV71复制的改变;采用靶向代谢组学技术检测EV71感染或KAN0438757处理HUVEC后糖代谢关键代谢产物丙酮酸的含量变化。结果用MOI=100的EV71感染HUVECs 8h和12h后,EV71mRNA分别为4h的123.8倍和298.9倍(均P<0.05);在感染后4h、8h、12h细胞存活率为对照组的81%、66%和48%(均P<0.05);感染后12h,细胞内的丙酮酸含量明显降低(P<0.05)。糖代谢抑制剂KAN0438757处理HUVECs后丙酮酸含量降低(P<0.05),糖代谢水平受到抑制,EV71复制受到抑制(P<0.05)。感染EV71的HUVECs使用不含糖的DMEM培养基培养4h、8h和12h,相同时间点的EV71复制水平低于含糖细胞培养组(P<0.05)。结论EV71病毒感染HUVECs后利用HUVECs内糖代谢提供的能量促进自身的复制,抑制HUVECs内糖代谢水平可抑制EV71的复制。