沉默Bmi-1表达对人食管鳞癌细胞生长影响观察

目的：通过RNA干扰（RNAinterference,RNAi）抑制人食管鳞癌细胞Ecal09Bmi-1表达,探讨其对Ecal09细胞生物学特性的影响及可能机制。方法：通过对Bmi-1的小干扰RNA（siRNA）重组腺相关病毒（Bmi-1shRNA）转染Ecal09细胞,以转染空病毒（AAV—Null）的Ecal09细胞作阴性对照组,以未转染Ecal09细胞作空白对照组（PBS）,应用蛋白质印迹法分析,绘制细胞生长曲线、流式细胞检测、裸鼠成瘤实验和免疫组化分析等方法观察RNAi对Bmi-1基因的抑制情况及沉默Bmi1表达在体外及体内对Ecal09细胞增殖、侵袭、致瘤和凋亡的影响。结果：转染Bmi-1shRNA后蛋白质印迹法检测结果显示,Bmi-1shRNA组蛋白条带灰度扫描值为681．74±28．89,明显低于AAV—Null组的964．00±41．73（P=0．001）和空白对照组的1005．51±41．16,P=-0.001;AAV—Null组与空白对照组比较,差异无统计学意义,P=0．007。实验组细胞生长曲线较平缓,细胞生长速度较对照组（P=0．009）和空白对照组（P-0．031）明显降低。Ecal09细胞转染AAV—Bmi-1shRNA后,Bmi-1shRNA组增殖指数（proliferationindex,PI）为0．42±0．13,明显低于AAV-Null组的0．81±0．37（P=0．023）和空白对照组的0．91±0．25（P=0．006）,提示RNAi后细胞增殖活性明显降低。裸鼠成瘤实验提示转染Bmi-1shRNA后肿瘤生长减慢,Bmi-1shRNA组肿瘤质量（1．47±0．35）g明显低于AAV—Null组的（1．83±0．28）g（P=0．028）和空白对照组的（1．96±0．40）g,P=0．004;Bmi-1shRNA组细胞凋亡指数（16．9±5．31）％明显高于AAvlNull组的（9．57±3．84）％和空白对照组的（8．13±3．97）％,差异有统计学意义,P值均为0．001。结论：沉默Bmi-1表达能显著抑制Ecal09细胞生长,减慢肿瘤细胞的增殖,促进凋亡,抑制肿瘤生长。     

瓣环结构重建的瓣膜置换手术

目的 总结瓣环结构重建的瓣膜置换手术技术及临床效果.方法 2003年1月至2009年5月59例病人行瓣环结构重建的瓣膜置换手术,其中细小主动脉根部43例,感染性心内膜炎累及瓣环结构13例,钙化性主动脉瓣病变钙化斑累及主动脉瓣环2例,主动脉瓣二尖瓣置换手术后主动脉根部出血1例.行主动脉瓣环重建加主动脉瓣置换术40例,二尖瓣瓣环重建二尖瓣置换术7例,主动脉-二尖瓣纤维环重建加主动脉二尖瓣置换术12例.结果 二尖瓣瓣环重建加二尖瓣置换手术与常规二尖瓣置换手术的主动脉阻断时间差异无统计学意义;而主动脉瓣瓣环重建加主动脉瓣置换以及二尖瓣-主动脉瓣纤维连接重建加二尖瓣主动脉瓣置换手术的主动脉阻断时间均明显延长.本组术后早期死亡4例,占6.7%.术后再次开胸止血2例,Ⅲ度房室传导阻滞2例,呼吸功能不全2例,急性肾功能衰竭2例.术后6个月复查超声心动图,无瓣周漏.结论 瓣环结构重建手术适合于瓣环过小需置人与体表面积相匹配的人工瓣膜、瓣膜病变累及瓣环结构的完整性或手术损伤等情况,尽管其手术操作较为复杂,主动脉阻断和体外循环时问均有所延长,但手术操作引起死亡的比率并未增加.

Abstract：

Objective To investigate the surgical technique and clinical outcomes of reconstruction of the annulus and the intervalvular fibrous body during valve replacements. Methods Fifty-nine patients underwent reconstruction of the annulus or the intervalvular fibrous body during the valve replacement. Indications for the operation were small aortic annulus which may cause patient/prosthesis mismatch in 43, active infective endocarditis with the abscess in the periannulus tissue in 13, extensive calcification of the aortic annulus in 2 and an active bleeding complication of the aortic root after aortic and mitral valve replacement in 1. The reconstruction was done with fresh autologous pericardium. Results The aortic clamping time in reconstruction of the intervalvular fibrous body with double valve replacement was longer than that of the regular double valve replacement. Four patients died in the perioperative period, giving an overall in- hospital mortality of 6.7%. Postoperative complication were: re-sternotomy for bleeding in 2, Ⅲ degree A-V block in 2, respiratory dysfunction in 2, and acute renal failure in 2. Patients were followed up for 6 months by echocardiography study, and no periannular leakage was found. Conclusion Reconstruction of the annulus is an effective technique for patients with a small aortic annulus, extensive calcification of the interventricular fibrous body and active infective endocarditis with abscess. Although the operative procedure is challenging and taking more time, the technique is safe and reproducible.     

外科学标准化病人库的构建和管理

标准化病人是提高医学教育教学质量和评估水平的重要方法。本文介绍了第二军医大学长海医院在外科学标准化病人库构建和管理中的经验,以及在临床教学、技能培训和考核评估中的应用情况。     

高龄患者冠状动脉旁路移植术早期死亡危险因素分析

目的:比较高龄冠心病患者术后早期死亡的危险因素与非高龄患者的不同.方法:选择行单纯冠状动脉旁路移植手术患者820例,高龄组(年龄≥70岁)222例,对照组(年龄<70岁)598例.收集患者入院后的相关资料,危险因素分为术前变量、术中变量及术后变量,进行统计学分析.结果:影响高龄患者早期死亡的危险因素为:术前合并COPD(OR=7.653)、OPCAB(OR=6.785)、体外循环时间(OR=1.263).结论:对于高龄患者术前合并COPD及体外循环时间延长是高龄组患者术后早期死亡的独立危险因素:高龄患者更易从OPCAB中获益.     

二尖瓣成形术治疗中重度黏液样退行性二尖瓣关闭不全远期疗效的影响因素

目的 探讨并总结二尖瓣成形术治疗中、重度黏液样退行性二尖瓣关闭不全远期疗效的影响因素.方法 分析1993年1月至2008年1月261例因中、重度黏液样退行性二尖瓣关闭不全行二尖瓣成形术的患者临床资料和随访资料.结果 围术期死亡7例,生存254例,生存患者二尖瓣成形效果良好.230例随访≥36个月,平均(77.3±30.3)个月,随访率90.6％;24例失访.多因素Cox regression分析显示,年龄≥60岁、左心室射血分数＜0.50、同期行冠状动脉旁路移植术是术后远期死亡的独立危险因素;左心室射血分数＜0.50、心功能(NYHA)Ⅲ-Ⅳ级、前瓣叶脱垂是术后远期二尖瓣再次中、重度反流的独立危险因素,成形环或塑形带成形是术后远期二尖瓣再次中、重度反流的保护因素.结论 年龄≥60岁、左心室射血分数＜0.50、同期行冠状动脉旁路移植术、心功能分级Ⅲ-Ⅳ级、前瓣叶脱垂、成形环或塑形带成形等因素与中、重度黏液样退行性二尖瓣关闭不全患者二尖瓣成形术后远期不良事件密切相关.     

二尖瓣成形术中轻度功能性三尖瓣反流的处理

目的探讨中重度粘液样退行性二尖瓣关闭不全合并轻度功能性三尖瓣反流患者,二尖瓣成形术（mitralvalverepair,MVP）同期是否需行三尖瓣成形术（tricuspidvalvuloplasty,TVP）。方法根据MVP同期是否行TVP,将1993年1月至2008年3月第二军医大学附属长海医院胸心外科135例中重度粘液样退行性二尖瓣关闭不全合并轻度功能性三尖瓣反流患者分成MVP组（76例）和MVP＋TVP组（59例）,观察两组患者围术期病死率和三尖瓣反流的变化,比较两组患者术后远期生存率、三尖瓣中重度反流免除率;采用多因素Coxregression分析术后远期三尖瓣中重度反流的危险因素。结果（1）所有患者围术期均无死亡,术后在院期间复查超声心动图提示两组患者三尖瓣反流程度均为轻度或轻度以下;（2）MVP组患者术后5年、10年生存率分别为98．4％和95．0％;MVP＋TVP组患者术后5年、l0年生存率分别为100．0％和93．7％,两组患者术后远期生存率差异无统计学意义（P=0．311）,但术后远期三尖瓣中重度反流免除率差异有统计学意义（P=0．040）。多因素分析显示：术前存在肺动脉压〉30mmHg（95％CI：1．127,137．487,P=0．040）,心房颤动（95％CI：1．177,23．378,P=0．030）是术后远期三尖瓣中重度反流的独立危险因子。结论中重度粘液样退行性二尖瓣关闭不全患者合并轻度功能性三尖瓣反流,特别是术前存在肺动脉压〉30mmHg、心房颤动的患者,MVP同期应积极行TVP。     

RNA干扰血管内皮生长因子受体表达对人肺腺癌细胞的抑制作用

目的:观察人血管内皮生长因子受体(VEGFR)RNA干扰重组腺病毒(Ad-VEGFRshRNA)对人肺腺癌细胞株A549生长的抑制作用.方法:制备携带人VEGFR的RNA干扰重组腺病毒,转染A549细胞,通过荧光显微镜观察转染效率.应用Western印迹法检测A549细胞VEGFR蛋白的表达,MTT比色法测定活细胞数并绘制细胞生长曲线,细胞周期及集落形成试验测定细胞生长抑制情况.同时,制备裸鼠A549细胞移植瘤模型,观察肿瘤生长情况.结果:Western印迹法显示RNA干扰组VEGFR表达水平明显降低;细胞生长曲线表明,RNA干扰后细胞生长明显减缓;细胞周期及集落形成试验提示RNA干扰后肿瘤细胞生长受到明显抑制.裸鼠皮下移植瘤生长情况提示RNA干扰可以显著抑制肿瘤生长.结论:RNA干扰重组腺病毒Ad-VEGFRshRNA能有效抑制A549细胞中VEGFR的表达,并能抑制肿瘤生长.     

长链非编码RNA HIF1A-AS1对大鼠心肌缺血再灌注损伤的调控作用

目的 研究长链非编码RNA HIF1A-AS1对大鼠缺血再灌注损伤的调控作用,并初步探索其机制.方法 构建大鼠心肌缺血再灌注损伤和心肌细胞缺氧/复氧损伤模型,利用实时定量PCR检测HIF1A-AS1的表达.采用siRNA抑制心肌细胞HIF1A-AS1的表达并制备缺氧/复氧损伤模型,用MTT法检测心肌细胞生长活力,ELISA法检测培养液中乳酸脱氢酶的水平,蛋白质印迹法检测自噬相关蛋白Beclin-1的表达变化.结果 HIF1A-AS1在缺血再灌注大鼠心肌组织和缺氧/复氧损伤心肌细胞中表达上调.抑制HIF1A-AS1表达可保护心肌细胞,逆转缺氧/复氧刺激导致的心肌细胞生长活力降低、乳酸脱氢酶分泌水平增高、自噬标志蛋白Beclin-1表达增高现象.结论 抑制长链非编码RNA HIF1A-AS1,可能通过抑制心肌细胞的过度自噬抵抗缺血再灌注诱导的心肌损伤.     

胸壁肿瘤的诊断(附26例分析)

胸壁肿瘤较少见，约占全身骨及软组织肿瘤的5％～10%。其组织来源复杂，病理类型繁多，临床表现不一。1994年1月至2004年8月我院收26例胸壁肿瘤，现对其诊断进行回顾性分析。     

年龄对风湿性主动脉瓣置换术后患者生活质量影响的前瞻性研究

目的 研究年龄对风湿性主动脉瓣置换术后患者生活质量的影响.方法 采用前瞻性队列研究方法,将符合入选条件的2010年3月至2010年12月期间在长海医院接受主动脉瓣置换术的风湿性心脏病患者根据年龄分为3组;A组,＜45岁; B组,≥45岁且＜65岁;C组,≥65岁,每组14例.使用SF-36量表评估患者术前和术后不同时间(3、6、12个月)的生活质量.采用配对非参数Wilcoxon秩和检验分析3组术后与术前生活质量评分的变化;采用重复测量方法分析年龄对患者术后生活质量评分的影响.结果 (1)与术前相比,A、C两组术后3个月生理职能(RP)、总体健康(GH)、活力(VT)和精神健康(MH)等4个维度,以及术后6、12个月SF-36量表8个维度评分差异均有统计学意义(P＜0.05);B组术后3个月RP、GH、VT和社会职能(SF)等4个维度评分差异均有统计学意义(P＜0.05),术后6个月除MH外,余7个维度差异均有统计学意义(P＜0.05),术后12个月,8个维度评分差异均有统计学意义(P＜0.05).(2)各组之间比较,除A组GH评分趋势显著好于B、C两组(P=0.000)外,余7个维度评分差异均无统计学意义.结论 风湿性主动脉瓣置换术后患者生活质量有明显改善;年龄不是影响患者术后生活质量的危险因素,但对年轻患者及时行手术治疗更有利于其GH的恢复.