PaP3噬菌体53×103蛋白编码基因的确定

目的确认PaP3噬菌体53×103蛋白的编码基因.方法用PEG沉淀结合CsCl梯度密度离心分离、纯化噬菌体颗粒,通过SDS-PAGE电泳分析该噬菌体的结构性蛋白带,转印PVDF膜后,对53×103蛋白进行N-端氨基酸测序,进而从PaP3全基因组的252个ORFs中确认该蛋白质的编码基因及其对应的氨基酸序列.结果PaP3噬菌体的结构性蛋白共发现有8个,其中53×103蛋白是由ORF29893编码的.53×103蛋白编码基因全长1 524 bp,G c=54.92%,编码508个氨基酸.该蛋白分子质量为53.7×103,等电点(PI)为7.207.结论53×103蛋白是由噬菌体基因组中0RF29893编码的,共由508个氨基酸组成.该蛋白可能是一种结构性蛋白.     

体外转录法制备SARS冠状病毒RNA片段

目的通过体外转录获得SARS冠状病毒RNA片段,为建立RT-PCR和荧光定量PCR诊断方法提供阳性对照.方法根据GenBank登录SARS冠状病毒Tor2株基因组序列,选择基因组中18138-18327nt作为目的扩增序列,并将其分解为首尾重叠的3个片段,人工合成对应的单链DNA序列,通过退火延伸获得全长dsDNA片段,PCR扩增该片段后,连接至载体pMD18T上,筛选含目的插入片段的阳性重组质粒pMD 18T-SARS,用BamH Ⅰ和HindⅢ切出目的片段,连接至线性化表达性质粒pGEM上;筛选阳性重组质粒pGEM-SARS,测序鉴定后,经HindⅢ酶切线性化,用T7 RNA聚合酶进行体外转录,得到含SARS冠状病毒目的序列的RNA片段,转录产物经电泳观察后,用RT-PCR验证.结果获得含SARS冠状病毒目的基因序列的RNA片段.结论该RNA片段可用于SARS冠状病毒RT-PCR和荧光定量RT-PCR诊断方法的阳性对照.     

老年人急性肠梗阻68例临床分析

目的为了提高对老年人急性肠梗阻的认识。方法回顾分析我院近十年手术治疗的68例老年人急性肠梗阻病人。结果68例均经手术治疗,其中治愈或好转出院63例,死亡5例。结论老年人急性肠梗阻具多伴有各种慢性疾患。因此,在重视围手术期和并存疾病处理的同时积极手术探查,手术应简单、有效。     

耻骨上前列腺切除术后的处理

目的探讨耻骨上前列腺切除术后不同处理方法对术后出血和膀胱痉挛的影响。方法将尿管气囊放置于膀胱内（Ⅰ）和前列腺窝内（Ⅱ）的两组病例，随机分为不镇痛和尿管气囊不早期放水（A）组、镇痛和尿管气囊不早期放水（B）组、不镇痛而尿管气囊早期放水（C）组以及镇痛和尿管气囊早期放水（D）组，观察术后出血和膀胱痉挛的情况。结果血尿时间A、D、B组（或C组）之间差异有显著意义（P〈0.05）；72h内膀胱痉挛发生率A、C与B、D组之间差异有显著意义（P〈0．05）；72h后膀胱痉挛发生率A、B与C、D组之间差异有显著意义（P〈0．05）；膀胱痉挛天数A、B、C、D组之间差异有显著意义（P〈0．05）。结论镇痛和尿管气囊早期放水联合应用，能更有效地降低术后出血和膀胱痉挛的发生率，减少并发症，提高手术疗效。     

铜绿假单胞菌噬菌体PaP3基因组测序

目的 对新分离的铜绿假单胞菌dsDNA溶原性噬菌体PaP3进行基因组测序。方法 用CsCl梯度离心纯化噬菌体PaP3颗粒，撮噬菌体基因组DNA，建立shot-gun随机文库，从文库中随机挑取克隆进行测序并完成序列组装，同时通过限制性内切酶图谱结合酶切片段的变性、复性实验分析基因组末端。结果 共进行了778条序列的测定与拼接，测序量达到13.5倍覆盖率，得到一条长为44249bp的重叠群，此重叠群错误率为9.46ERR/10KB，测序结果和酶切图谱分析表明该PaP3基因组是一44249kp长的线笥平端dsDNA分子。其碱基组成为A＝24.24%，G＝26.18%，T＝23.63%，C＝25.94%；稀有碱基＝0；A＋T＝47.87%，C＋G＝52.13%。结论 噬菌体PaP3基因组是由44249bp组成的线性平端双链DNA分子。测序完成为生物信息学分析和功能基因研究奠定了基础。     

铜绿假单胞菌噬菌体PaP3基因组的初步注释

目的 对已完成测序的铜绿假单胞菌噬菌体PaP3基因组进行初步注释。方法 利用生物信息学软件和网上工具对噬菌体PaP3进行开发阅读框（Open reading frame,ORFs）检索；编码序列鉴定；对公共数据库进行BLAST查询，分析基因的可能功能；对存在高度同源性序列的推定蛋白进行多重序列比对和系统发生树分析。结果 利用生物信息学软件在PaP3基因组中检索到252个大于100bp的ORFs，其中有699个ORFs可确认为推定基因；核苷酸对核苷酸的BLASTn分析未发现有意义的同源性核苷酸序列；核苷酸对蛋白质的BLASTx分析共发现了4个在公共数据库中有高度同源性序列的ORFs，根据其同源性蛋白的功能推定ORF13052－14761编码产物为引物酶／解旋酶，ORF40280－41728编码产物为末端酶大亚单位，ORF41728－42225编码产物为溶菌酶，ORF16912－18549编码产物为DNA聚合酶；绘制出了上述这四种蛋白的系统发生树。结论 噬菌体PaP3具有252个大于100bp的ORFs，其中69个为推定基因，有4个推定基因的功能被确认为分别编码引物酶／解旋酶，末端酶大亚单位，溶菌酶及DNA聚合酶。     

2420份血培养结果及菌株耐药状况分析

目的 总结我院5年来血标本的培养结果及药敏状况，以期对临床合理使用抗生素有所帮助。方法 细菌培养及鉴定采用BECTEC 9050全自动血培养仪以及API细菌鉴定系统按照《全国临床检验操作规程》进行，药敏试验采用K－B法，按照NCCLS（美国检验标准化委员会）规定判断敏感耐药。结果 5年共计血培养标本2420份，检出细菌244株，阳性检出率10．0％，在所检出的阳性菌中，革兰阳性菌146株，革兰阴性菌90株，酵母样真菌8株。结论 主要菌群对红霉素、青霉素、苯唑西林、氨苄西林、头孢唑林、阿莫西林／棒酸、复方新诺明耐药严重，耐药率均在62．0％以上，提示临床医师应高度重视合理使用抗生素。     

丹参酮ⅡA磺酸钠注射液引起不良反应原因分析

目的：分析丹参酮ⅡA磺酸钠注射液引起不良反应（ADR）的原因。方法：综述文献报道中应用丹参酮ⅡA磺酸钠注射液的不良反应病例,按患者年龄、性别、原患疾病、给药途径以及临床表现等进行统计、分析。结果：丹参酮ⅡA磺酸钠注射液的ADR报告中,女性出现ADR的例数多于男性,临床表现多以皮疹为主,其次为寒战、发热、胸闷、头痛等。结论：医护人员应重视丹参酮ⅡA磺酸钠注射液的不良反应,严格按适应证用药。     

结肠癌肝转移灶人PRL-3基因的扩增与克隆

目的 从人结肠癌肝转移病灶标本中提取染色体RNA,聚合酶链反应（PCR）扩增及克隆人PRL-3基因。方法 收集人结肠癌肝转移标本,提取总RNA,逆转录为cDNA,PCR扩增PRL-3序列,A-T克隆于pMD-18T载体中,转化大肠杆菌JM109株,提取质粒,对重组质粒进行酶切与测序鉴定。结果 通过酶切、PCR与测序3种方法证实所获得的基因片断为PRL-3基因。结论 克隆到序列正确的人源性PRL-3基因,为实现PRL-3基因的高效表达及制备相应抗体奠定了基础。     

我院零差率药物使用调查与分析

目的：分析我院价格零差率药物的使用情况。方法：数据来源于我院2007年和2008年药物的销售使用情况。结果：实施基本药物零差率后,使用零差率基本药物品种数为275种,两年优惠金额442万元,零差率药物的销售金额构成比为40％,门诊零差率药物的使用高于急诊和病房,门诊就诊人均享受优惠金额11．0～13．6元。结论：实行基本药物零差率后,百姓获得了实惠,零差率药物的使用与门诊、急诊及病房,中、西药使用,不同科室就医有关。