三明治构型大鼠原代肝细胞长期培养及功能测定

目的观察三明治构型大鼠原代肝细胞长期培养的形态学变化,并对其功能进行测定。方法采用改良原位两步法门静脉胶原酶灌注分离单肝细胞,台盼蓝拒染实验观察细胞活力,利用三明治培养构型培养成年大鼠原代肝细胞,倒置显微镜下连续观察肝细胞的形态学变化,定期收集培养细胞上清液,检测所培养肝细胞的分泌及生物转化功能,并与单层胶原培养肝细胞比较。结果平均每个鼠肝可获取(2～3)×108个肝细胞,存活率为(93±3)%;体外肝细胞培养第3天,细胞活力、清蛋白分泌功能恢复到最佳状态;三明治构型培养第7天,地西泮24h代谢量达到最高峰。三明治构型培养的肝细胞形成肝索样结构,并逐渐形成胆小管网络;在培养的21d内,清蛋白分泌、地西泮代谢始终维持较高的水平;肝细胞形态维持可达28d以上。结论三明治构型肝细胞培养体系更接近于肝细胞体内生长环境,肝细胞可在较长时间内保持良好的形态结构和功能。三明治构型不仅可以应用于肝细胞的基础研究,而且为肝细胞移植和生物人工肝治疗肝衰竭奠定了一定的基础。     

区域神经阻滞联合尼莫地平用于老年高血压患者膝关节置换术的临床疗效及安全性评价

目的 探讨区域神经阻滞联合尼莫地平用于老年高血压患者膝关节置换术的临床疗效及安全性。方法 选取2021年8月—2022年7月德阳市人民医院收治的148例拟行膝关节置换术的老年高血压患者,根据随机数字表法分为对照组（给予超声引导下区域神经阻滞,74例）、联合组（给予超声引导下区域神经阻滞+尼莫地平泵注,74例）。对比两组患者手术相关指标和不同时刻血流动力学指标。对比两组患者术中血流动力学异常和药物使用情况。对比两组患者不同时刻疼痛评分、应激反应指标、神经元特异性烯醇化酶（NSE）、同型半胱氨酸（Hcy）水平。对比两组患者药物相关不良反应。结果 两组患者手术时间、睁眼时间和拔除喉罩时间比较,差异均无统计学意义（P>0.05）。联合组丙泊酚和瑞芬太尼使用量少于对照组（P <0.05）。两组患者T0、T1、T2及T3时SBP、DBP、HR、MAP比较,结果：(1)不同时间点的SBP、DBP、HR、MAP比较,差异均有统计学意义（F=10.038、8.416、8.035和7.549,均P <0.05）;(2)两组患者SBP、DBP、HR、MAP比较,差异均有统计学意义（F=7....     

丙泊酚与瑞芬太尼复合吸入麻醉在颅内动脉瘤夹闭术中的临床应用

目的探讨丙泊酚、瑞芬太尼复合吸入麻醉在颅内动脉瘤夹闭术中应用的临床意义。方法选择52例颅内动脉瘤行夹闭术的患者,采用丙泊酚、瑞芬太尼复合异氟醚或七氟醚,术中间断注射顺式阿曲库铵,并持续监测平均动脉压（MAP）、中心静脉压（CVP）、心率（HR）、心电图（ECG）、脉搏、血氧饱和度（SP02）和呼气末二氧化碳分压（PetC02）。结果52例手术全部实施控制性降压麻醉,51例实施动脉瘤颈夹闭术,1例实施动脉瘤包裹术。术毕13例手术室内拔除气管内导管,其余均未清醒带管回ICU或神经外科ICU。结论丙泊酚、瑞芬太尼复合吸入麻醉诱导迅速,维持平衡好,患者对气管导管耐受性好。适用于颅内动脉瘤夹闭术的麻醉。     

广东省惠州市惠阳区院前急救患者流行病学分析

目的了解惠州市惠阳区院前急救患者流行病特点。方法采用前瞻性资料收集的方法,对惠州市惠阳区2005年-2007年120受理出诊患者的性别、年龄、出诊的病种等进行调查并统计分析。结果本组资料3年120受理出诊的患者。男女比例1.6：1。高发年龄为中老年。创伤患者占第一位（31.2%）。5、6、7、8、1月份出诊患者最多。21∶00-5∶00为出诊高峰时间。结论加强院前急救网络建设,完善救援应急措施,可以提高院前急救的成功率。     

超声引导下腹横平面阻滞联合喷他左辛在妇科腹腔镜手术中的麻醉效果研究

目的:评价超声引导下腹横平面阻滞联合喷他佐辛在妇科腹腔镜手术中的麻醉效果.方法:104例行妇科腹腔镜手术患者,按随机数表法分为两组.对照组52例,术前静脉注射0.4 mg/kg喷他佐辛;研究组52例,在对照组基础上行超声引导下腹横平面阻滞.于诱导前(T1)、插管后(T2)、拔管时(T3),观察患者生命体征变化,并对比两组手术相关指标及不良反应情况.结果:对照组T2、T3时收缩压、舒张压及心率均较T1高,差异有统计学意义(P<0.05);研究组苏醒、自主呼吸恢复及拔管时间、芬太尼使用量、拔管后1 h VAS评分、不良反应发生率均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论:超声引导下腹横平面阻滞联合喷他佐辛适用于妇科腹腔镜手术,有助于稳定患者生命体征,提高镇痛效果,促进其快速恢复,且安全性高.     

长托宁治疗有机磷农药中毒的临床研究

目的 探讨长托宁在治疗有机磷农药中毒中的作用.方法 将急性有机磷农药中毒患者随机分为长托宁试验组和阿托品对照组,采用推荐剂量按轻、中、重组治疗,严密观察用药后M样症状、N样症状、中枢神经系统症状持续时间,阿托品和长托宁用量的总量和次数的变化以及阿托品化时间及治愈时间的变化.结果 长托宁试验组,重度患者M样症状与中枢神经系统症状消失时间明显缩短(P＜0.01),用药总量和用药次数明显减少(P＜0.01),阿托品化时间及治愈时间明显缩短(P＜0.01).结论 长托宁治疗有机磷农药中毒明显优于阿托品.     

体外肝细胞极性重建与cofilin的脱磷酸化

目的证实体外肝细胞极性重建过程中存在cofilin的脱磷酸化。方法利用三明治构型培养成鼠肝细胞,应用western免疫印迹法分别检测细胞裂解物中cofilin、P-cofilin水平,以单层胶原培养肝细胞作为对照。结果三明治构型培养肝细胞获得了细胞极性重建,培养96h和1周组与对照组相比P-cofilin水平明显下降。结论体外肝细胞极性重建过程中存在cofilin的脱磷酸化。     

不同麻醉药物对老年骨科手术患者术后认知功能的影响及其机制

目的：比较异氟烷、七氟烷两种吸入性麻醉药对老年骨科手术患者术后认知功能障碍（POCD）及血清S-100β蛋白、炎性因子表达水平的影响,分析探讨其与神经炎症的关系。方法：选择择期进行骨科手术的老年患者90例（其中行髋关节置换术患者42例,行骨折内固定术患者48例）,随机分为A、B两组,每组45例,全身诱导麻醉后分别以异氟烷、七氟烷维持麻醉。手术麻醉期间记录两组患者的手术时间、麻醉时间和苏醒时间;分别于手术麻醉前（T₀）和手术后6 h（T₁）,1 d（T₂）,3 d（T₃）,5 d（T₄）抽取两组患者外周静脉血,并采用MMSE评分法进行神经精神功能测试,计算POCD发生率;ELISA法检测血清中S-100β及炎性因子IL-1β、TNF-α、IL-6的浓度。结果：（1）两组手术时间、麻醉时间无明显差异（P>0.05）,A组术后苏醒时间明显长于B组（P<0.05）。（2）术前两组的MMSE评分、血清指标水平均无显著差异（P>0.05）;A组术后1 d和3 d时MMSE评分明显低于同组术前及B组对应时间点（P<0.05）,且术后5 d内POCD发生率明显高于B组（P<0.05）。（3）A组术后1 d和3 d时,血清S-100β、IL-1β及IL-6水平均明显高于同组术前及B组对应时间点（P<0.05）;两组术后6 h,1 d,3 d时TNF-α水平均显著高于术前（P<0.05）,且A组比B组升高程度更大（P<0.05）。结论：吸入性麻醉药异氟烷可引起老年患者POCD以及中枢神经特异蛋白S-100β、炎性因子表达增加,而七氟烷的影响不明显,其机制可能与老年患者中枢神经系统炎症有关。     

三明治构型原代大鼠肝细胞培养细胞极性重建及功能的研究

目的 研究三明治构型培养大鼠原代肝细胞的形态学变化、极性重建过程并对其功能进行测定.方法 改良原位两步法门静脉胶原酶灌注分离单肝细胞,三明治构型培养肝细胞,观察肝细胞的形态学变化,测定特异性膜区域蛋白的重新分布,检测白蛋白mRNA及肝细胞功能.结果 平均每个鼠肝可获取(2～3)×108个肝细胞,活率在93%±3%,纯度在96%±3%.培养6～8 h后,肝细胞排列成肝索样结构.3 d后,白蛋白mRNA表达明显增强.4 d后,DPPIV几乎完全集中在胆小管膜区.5 d后,胆小管完全连接成网络.形态维持达49 d以上.结论 三明治构型肝细胞培养体系更接近于肝细胞体内生长环境.肝细胞可在较长时间内保持良好的形态结构和功能.     

台盼蓝染色与FDA/PI双染色对检测肝细胞活率的评价

台盼蓝排除试验是最常用的检测细胞活率的方法,但有文献报道其并不能准确反映肝细胞的存活情况。分离的肝细胞在用于病人治疗前,必须有1个精确迅速的检测肝细胞活率的方法。我们采用FDA/PI(荧光二乙脂/碘丙啶)双染,应用流式细胞仪,可迅速精确地检测肝细胞活率。