三明治构型大鼠原代肝细胞长期培养及功能测定

目的观察三明治构型大鼠原代肝细胞长期培养的形态学变化,并对其功能进行测定。方法采用改良原位两步法门静脉胶原酶灌注分离单肝细胞,台盼蓝拒染实验观察细胞活力,利用三明治培养构型培养成年大鼠原代肝细胞,倒置显微镜下连续观察肝细胞的形态学变化,定期收集培养细胞上清液,检测所培养肝细胞的分泌及生物转化功能,并与单层胶原培养肝细胞比较。结果平均每个鼠肝可获取(2～3)×108个肝细胞,存活率为(93±3)%;体外肝细胞培养第3天,细胞活力、清蛋白分泌功能恢复到最佳状态;三明治构型培养第7天,地西泮24h代谢量达到最高峰。三明治构型培养的肝细胞形成肝索样结构,并逐渐形成胆小管网络;在培养的21d内,清蛋白分泌、地西泮代谢始终维持较高的水平;肝细胞形态维持可达28d以上。结论三明治构型肝细胞培养体系更接近于肝细胞体内生长环境,肝细胞可在较长时间内保持良好的形态结构和功能。三明治构型不仅可以应用于肝细胞的基础研究,而且为肝细胞移植和生物人工肝治疗肝衰竭奠定了一定的基础。     

区域神经阻滞联合尼莫地平用于老年高血压患者膝关节置换术的临床疗效及安全性评价

目的 探讨区域神经阻滞联合尼莫地平用于老年高血压患者膝关节置换术的临床疗效及安全性。方法 选取2021年8月—2022年7月德阳市人民医院收治的148例拟行膝关节置换术的老年高血压患者,根据随机数字表法分为对照组（给予超声引导下区域神经阻滞,74例）、联合组（给予超声引导下区域神经阻滞+尼莫地平泵注,74例）。对比两组患者手术相关指标和不同时刻血流动力学指标。对比两组患者术中血流动力学异常和药物使用情况。对比两组患者不同时刻疼痛评分、应激反应指标、神经元特异性烯醇化酶（NSE）、同型半胱氨酸（Hcy）水平。对比两组患者药物相关不良反应。结果 两组患者手术时间、睁眼时间和拔除喉罩时间比较,差异均无统计学意义（P>0.05）。联合组丙泊酚和瑞芬太尼使用量少于对照组（P <0.05）。两组患者T0、T1、T2及T3时SBP、DBP、HR、MAP比较,结果：(1)不同时间点的SBP、DBP、HR、MAP比较,差异均有统计学意义（F=10.038、8.416、8.035和7.549,均P <0.05）;(2)两组患者SBP、DBP、HR、MAP比较,差异均有统计学意义（F=7....     

甲状腺手术麻醉方法探讨

目的：观察三种麻醉方法应用于甲状腺手术的麻醉效果,旨在寻找一种可以有效镇痛和调控神经循环功能的方法,以利临床应用。方法：60例甲状腺疾病患者随机分为A,B,C三组,每组20例。A组应用颈丛阻滞麻醉,B组颈丛阻滞加气管内全身麻醉,C组气管内全身麻醉。观察三组患者麻醉前后及术中和B,C两组拔管即刻的MAP,HR的变化。B、c两组全麻药用量,拔管时间及术后并发症等情况。结果：三组之间MAP、HR变化比较：T0、T5时点三组之间无差异显著性意义．T1、T2、T3和T4时点A、B两组和c组比较有差异显著性意义。组内比较A、B两组T1-4与110比较有差异显著性意义,C组T2与T0比较有差异显著性意义。B,C两组拔管即刻的MAP,HR比较无差异显著性意义,苏醒时间、麻醉药用量及术后并发症无差异显著性意义。结论甲状腺手术麻醉可根据病变程度适当选用颈丛神经阻滞或者气管内全麻,加上合理的药物调控和镇静均能满足手术要求,但颈丛联合全麻并不能减少麻醉用药和缩短麻醉苏醒时间,且易致高血压,心率增快及心血管事件发生,并不可取。     

超声引导下腹横平面阻滞联合喷他左辛在妇科腹腔镜手术中的麻醉效果研究

目的:评价超声引导下腹横平面阻滞联合喷他佐辛在妇科腹腔镜手术中的麻醉效果.方法:104例行妇科腹腔镜手术患者,按随机数表法分为两组.对照组52例,术前静脉注射0.4 mg/kg喷他佐辛;研究组52例,在对照组基础上行超声引导下腹横平面阻滞.于诱导前(T1)、插管后(T2)、拔管时(T3),观察患者生命体征变化,并对比两组手术相关指标及不良反应情况.结果:对照组T2、T3时收缩压、舒张压及心率均较T1高,差异有统计学意义(P<0.05);研究组苏醒、自主呼吸恢复及拔管时间、芬太尼使用量、拔管后1 h VAS评分、不良反应发生率均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论:超声引导下腹横平面阻滞联合喷他佐辛适用于妇科腹腔镜手术,有助于稳定患者生命体征,提高镇痛效果,促进其快速恢复,且安全性高.     

体外培养条件下肝细胞功能研究

目的 探讨一种新的细胞培养模型以使体外培养的肝细胞更好地恢复肝功能。方法 利用三明治构型培养肝细胞,观察体外肝细胞蛋白合成,生物转化及其mRNA表达并与传统单层胶原培养肝细胞相比较。结果 三明治构型培养肝细胞保持稳定的蛋白分泌功能并持续增长,且有良好的生物转化功能,而传统单层胶原培养肝细胞蛋白分泌功能微弱,7d后基本消失,肝细胞生物转化功能差。原位杂交显示三明治构型培养较单层胶原培养肝细胞具有更强的白蛋白、P450-bmRNA表达,结论 三明治构型培养肝细胞较传统单层胶原培养肝细胞具更强的白蛋白、P450-bmRNA表达。结论 三明治构型培养肝细胞较传统单层胶原培养肝细胞更类似体内肝细胞,可体外重建细胞极性。     

三明治构型培养肝细胞——一种潜在的生物人工肝单位

目的：探索一种新的生物人工肝单位。方法：双层胶原三明治构型培养肝细胞,并观察其形态分化的特点及蛋白合成功能,并与传统单层胶原培养肝细胞相比较。结果：三明治构型培养的肝细胞48h后形成肝板样结构,伴胆小管网络,肝细胞蛋白分泌功能稳定、持续增高,生存时间达2个月之久;而对照组基本没有形成肝板样结构,蛋白分泌功能差,7d后基本消失,细胞趋向死亡。结论：三明治构型培养的肝细胞在体外重建细胞极性,形态及功能更接近体内肝细胞,是一种潜在的生物人工肝单位。     

超声引导下腹横肌平面阻滞联合全身麻醉在腹腔镜结直肠癌根治术中的应用效果

目的 探讨超声引导下腹横肌平面阻滞联合全身麻醉在腹腔镜结直肠癌根治术中的临床应用效果。方法 选取2017年6月至2019年6月在德阳市人民医院行腹腔镜结直肠癌根治术的100例患者为研究对象。根据随机数字表分为对照组（n=50）和观察组（n=50）。对照组给予全身麻醉,观察组在此基础上联合超声引导下腹横肌平面阻滞,比较两组血流动力学、镇痛效果及不良反应等情况。结果 观察组切皮时、癌灶切除时及术毕时的平均动脉压（mean arterial pressure,MAP）、心率（heart rate,HR）、丙泊酚用量、舒芬太尼用量、呼之睁眼时间、拔气管时间、完全苏醒时间以及术后2 h、12 h、24 h、48 h、72 h的VAS评分均低于对照组（P<0.05）;术后24 h内镇痛泵按压次数、补救性镇痛次数亦低于对照组（P<0.001）,但镇痛满意率高于对照组（96.0% vs 82.0%,χ²=5.005,P=0.025）。两组患者不良反应发生率比较差异无统计学意义（10.0% vs 14.0%,χ²＝0.379,P＝0.538）。结论 超声引导下腹横肌平面阻滞联合全麻可有效改善腹腔镜结直肠癌根治术患者镇痛效果,稳定血流动力学,减少全麻用药量,安全性较好,值得临床推广应用。     

三明治构型原代大鼠肝细胞培养细胞极性重建及功能的研究

目的 研究三明治构型培养大鼠原代肝细胞的形态学变化、极性重建过程并对其功能进行测定.方法 改良原位两步法门静脉胶原酶灌注分离单肝细胞,三明治构型培养肝细胞,观察肝细胞的形态学变化,测定特异性膜区域蛋白的重新分布,检测白蛋白mRNA及肝细胞功能.结果 平均每个鼠肝可获取(2～3)×108个肝细胞,活率在93%±3%,纯度在96%±3%.培养6～8 h后,肝细胞排列成肝索样结构.3 d后,白蛋白mRNA表达明显增强.4 d后,DPPIV几乎完全集中在胆小管膜区.5 d后,胆小管完全连接成网络.形态维持达49 d以上.结论 三明治构型肝细胞培养体系更接近于肝细胞体内生长环境.肝细胞可在较长时间内保持良好的形态结构和功能.