RNA干涉和基因沉寂

RNA干涉是新近认识到的一种自然现象，但已被作为一种研究基因功能的有效工具，广泛运用于植物、真菌、线虫、果蝇以及哺乳动物。随着人们对RNA干涉机制认识的不断深入，RNA干涉技术将不断完善并应用到更为广阔的领域，为人类揭示生物界功能基因组功能的奥秘作出突出贡献，同时为人们探索基因治疗提供新的思路。     

2008年北京市HIV-1耐药株传播调查

目的 了解2008年北京市未经抗病毒治疗HIV-1感染者中耐药株传播水平,为耐药监测和临床抗病毒治疗工作提供本底资料.方法 参照WHO提出的HIV耐药警戒线调查方法(HIV drug resistance threshold survey,HIVDR-TS)指导方案,收集6个月内检测发现的60～70名小于25岁的感染者血浆样本,检测HIV-1 pol区亚型及耐药基因型,并计算耐药株检出率、评价传播水平.结果 61份符合要求的样本共获得50个有效pol区序列.感染途径以同性传播为主,占62%;亚型分布以B(42%)、CRF01_AE(28%)、CRF07_BC(26%)3种为主.出现1例针对PI类药物的耐药突变株,检出率为2%(1/50);出现1例针对NRTI类药物的耐药突变株,检出率为2%(1/50);未出现针对NNRTI类药物的耐药突变株,检出率为0.蛋白酶(PR)区和逆转录酶(RT)区的耐药突变株检出率均为2%,均属于低度传播范围(<5%).结论 北京市未经抗病毒治疗HIV-1感染者中出现PR和RT区的耐药突变株,传播水平尚处于低流行状态,现有的抗病毒治疗方案是可行的,治疗前尚不需要进行大规模耐药性检测.     

高氧对新生大鼠肺细胞周期调节基因表达的影响

目的　探讨高氧对新生大鼠肺内细胞周期调节基因 (p2 1WAF/CIP1 )表达的影响。方法　采用Spraque -Dawley新生大鼠95 %氧暴露建立高氧肺损伤模型。应用RT PCR技术检测肺组织p2 1WAF/CIP1 mRNA水平 ,凝胶电泳条带用成像系统照相定量分析结果 ,分别计算PCR产物条带与 β actincDNA条带光密度值的比值 ,作为p2 1WAF/CIP1 基因的相对表达量。结果　新生大鼠暴露于95 %氧浓度环境中 12、2 4、48、72、96h肺组织中p2 1WAF/CIP1 mRNA表达显著增加 ,2 4h后新生大鼠肺p2 1WAF/CIP1 mRNA虽略有下降 ,但一直维持在高表达状态 ,与空气对照组相比差异有显著意义 (同一时间点的高氧组与空气对照组比较的t、P分别如下 :t=6.498　P <0 .0 0 1;t=2 7.2 0 0　P <0 .0 0 0 1;t=10 .164　P <0 .0 0 1;t=10 .481　P <0 .0 0 1;t =6.496　P <0 .0 0 1)。结论　在高浓度供氧下通过上调p2 1WAF/CIP1 基因的表达 ,阻断G0 /G1 期的肺泡上皮细胞向S期的转换 ,抑制肺泡上皮细胞生长和增殖 ,从而导致肺生长发育受阻和肺损伤。因此促进肺泡上皮细胞的生长可能成为治疗慢性肺病患儿的一种新途径。     

中国艾滋病病毒耐药监测回顾与展望

<正>截至2021年底,全球有3 840万存活的HIV感染者,约75%的感染者接受ART[1]。HIV耐药在1989年首次被报道[2],是导致ART失败的重要原因[3]。我国免费ART在2002年开启[4],HIV耐药监测随后在2003年开展,耐药监测为ART的可持续发展、保证艾滋病防治效果提供了科学支撑。1中国HIV耐药监测实验室网络的组建在我国HIV耐药监测实验室网络组建之前,     

我国HIV-1 CRF55_01B感染者抗病毒治疗前耐药分析

目的:了解我国HIV-1 CRF55_01B感染者抗病毒治疗前对蛋白酶类抑制剂(PI)、核苷类逆转录酶抑制剂(NRTIs)、非核苷类逆转录酶抑制剂(NNRTIs)、整合酶抑制剂(INSTIs)的耐药程度以及耐药株的传播关系。方法:对2018年全国抗病毒治疗前HIV耐药监测中CRF55_01B重组亚型感染者的血浆样本提取...     

中国2007-2009年HIV-1耐药基因型检测质量评估结果

目的对2007-2009年统一发放至各省,针对艾滋病病毒Ⅰ型(HIV-1)蛋白酶和反转录酶基因的耐药突变基因型外部质控品的检测结果,进行分析和检测技术能力评价。方法对3年共5次由各省提交的,应用实验室自建方法(In house)、Viroseq(雅培公司,Abbott)和TruGene(西门子公司,Siemens)检测系统获得的耐药基因型数据进行综合分析。质控盘由6份血浆(HIV-1B及B/C重组毒株)组成,覆盖病毒的蛋白酶和反转录酶基因区的野生型和耐药突变型。每份序列与共享序列比较,使用扣分制对各实验室的结果进行评价。结果除3家核心实验室外,累计有19个省23家省市级疾病预防控制中心(CDC)或医院自愿参加,共提交了95份结果,其中3家实验室使用ViroSeq检测系统;提交了9份结果;1家使用TruGene检测系统;提交了1份结果;其余85份使用in-house检测系统。考核品总的序列阳性率(获得合格序列率)为97.7%,其中的低载量(1 000拷贝/mL)样本均得到阳性结果;根据累计提交的序列结果看,耐药位点判读的完全一致率为78.9%(75/95),序列编辑分析的一致率也有76.8%(73/95)。参加能力验证的省市级实验室由2007年的15家增加到2009年下半年的23家,合格率(001PT)由73.3%上升到(004PT)95.2%,3次以上优秀的实验室有13家。结论目前的检测方法均可成功扩增中国主要亚型流行毒株。所有检测结果在各实验室间的一致性均较高,因此基因型耐药检测技术是可靠的,但各实验室检测能力也存在差异。我国具备耐药基因型检测能力的实验室数量不断增加,检测水平逐年提高。     

云南省140例HIV／AIDS患者抗病毒治疗效果和耐药检测分析

[目的]观察接受中国现行一线艾滋病抗病毒药物治疗的HIV／AIDS患者,在治疗1年内免疫学应答、病毒载量抑制效果,以及耐药性产生的情况。[方法]入组既往未接受过抗病毒治疗的HIV／AIDS患者140例,观察治疗0月、6月、12月CD41淋巴细胞计数（CD4）、病毒载量（vL）,对治疗后VL〉1000拷贝／ml的患者进行耐药检测。[结果]入纽患者治疗前的CD4平均值为164个／μl,在治疗6个月和12个月分别上升至327个／μl和377个／μl。基线VL〈1000拷贝／ml的患者比例为2．1％,治疗6个月和12个月后,分别上升至94．7％和94．4％。基线样本的耐药性检测未发现主要耐药突变位点。治疗6个月时有7例患者VL〉1000拷贝／ml,耐药检测未发现耐药突变位点。治疗12个月时有7例VL〉1000拷贝／ml,其中3例同时出现了对核苷类药物和非核苷类药物不同程度的耐药。[结论]云南省使用现行一线抗病毒治疗方案取得了良好的治疗效果。抗病毒治疗1年时,2．4％的患者出现了抗HIV药物耐药。出现耐药时需要及时更换抗病毒治疗方案,避免耐药位点的累积导致交叉耐药,保障抗病毒治疗疗效。     

2017-2019年广西钦州市部分新报告HIV/AIDS感染者病毒亚型及细胞嗜性研究

  目的   了解2017 — 2019年广西壮族自治区（广西）钦州市新报告人类免疫缺陷病毒（HIV）感染者/艾滋病患者（AIDS）中病毒基因亚型、耐药及细胞嗜性情况。   方法   选取2017 — 2019年钦州市部分新报告HIV/AIDS,检测CD4+T淋巴细胞数量,并对HIV的pol、env基因区进行扩增、测序,构建系统进化树判定基因亚型。 利用斯坦福耐药数据库判定新报告感染者的耐药情况,利用Geno2pheno判定嗜性,并采用非参数Wilcoxon或Kruskal-Wallis检验分析不同亚型、不同嗜性之间CD4+T淋巴细胞数量的差异。   结果   764例新报告感染者中,CRF01_AE、CRF08_BC、CRF07_BC分别占比50.1%（383/764）、31.2%（238/764）、10.9%（83/764）。CRF01_AE中第1簇（Cluster1）、第2簇（Cluster2）分别占18.3%（70/383）、72.3%（277/383）。 48例新报告感染者发生治疗前耐药,耐药率为6.3%;CD4+T淋巴细胞数量<200个/μL的占51.4%;CRF01_AE、CRF08_BC与CRF07_BC 3种基因型之间CD4+T淋巴细胞中位数M（P₂₅,P₇₅）分别为205（41,303）、238（105,336）、308（179,394）且计数水平不全相等（P<0.0001）;辅助受体利用预测有108例为CXCR4（X4）,656例为CCR5（R5）;X4嗜性的CD4+T淋巴细胞数量显著低于R5嗜性的CD4+T淋巴细胞数量。   结论   2017 — 2019年钦州市新报告HIV/AIDS中存在多种病毒亚型,耐药水平较高,病毒嗜性预测分析将有助于采取针对性的防治措施。     

新疆部分艾滋病病人抗病毒治疗效果和耐药变异分析

目的观察接受中国现行一线抗病毒药物治疗的艾滋病病人,在治疗1年内免疫功能恢复、病毒抑制效果,以及耐药性产生和发展情况。方法采用Logistic回归分析病毒抑制失败和耐药发生的相关因素。结果共调查156例病人,基线病毒载量<1 000拷贝/ml的病人比例为5.1%,治疗6和12个月后,分别上升到71.1%和70.8%;病人治疗前的CD4细胞数平均值为191个/μl,在治疗6个月和12个月分别达到324个/ml和327个/ml。基线样本的耐药性检测未发现主要耐药突变,治疗6个月有5例(5.2%,5/97)出现耐药突变,治疗12个月后增加到12例(10.6%,12/113),其中7例对核苷类和非核苷类反转录酶抑制剂均有不同程度的耐药。治疗12个月,病毒抑制失败的相关因素是:近1个月内有漏服史(调整OR值:AOR=12.6,P=0.0002)、基线CD4细胞数在100个/μl以下(AOR=6.6,P=0.0026),均为耐药发生的危险因素;而静脉吸毒以外的途径感染则是减少耐药发生的相关因素(AOR=0.2,P=0.0244)。结论大多数艾滋病病人在抗病毒治疗一年内病毒复制得到有效抑制,CD4细胞水平明显升高,但是耐药突变率也在不断升高,需采取有效措施防止耐药的发生,保证抗病毒治疗效果。