金粉蕨素对溶血性磷脂酰胆碱损伤血管内皮依赖性舒张功能的保护作用及机制

为了观察金粉蕨素对溶血性磷脂酰胆碱损伤血管内皮依赖性舒张功能的保护作用及机制 ,采用离体血管环张力实验法 ,用金粉蕨素和溶血性磷脂酰胆碱共同孵育血管环 ,发现乙酰胆碱诱导的血管舒张百分比由损伤时的 16 .1%± 3.5 %上升到 42 .1%± 8.0 %。一氧化氮合酶抑制剂N -硝基 -L -精氨酸和环氧酶抑制剂吲哚美辛可阻断金粉蕨素的保护作用。此外 ,在培养的人脐静脉内皮细胞上 ,采用DGKC法测定乳酸脱氢酶 ,观察到金粉蕨素使内皮细胞乳酸脱氢酶含量由溶血性磷脂酰胆碱损伤时的 115 .3± 48.3IU/L下降到 30 .8± 5 .4IU/L。同样 ,N -硝基 -L -精氨酸和吲哚美辛可阻断金粉蕨素的保护作用 ,使乳酸脱氢酶释放分别恢复到 91.3± 2 7.6IU/L和 10 4.5± 15 .7IU/L。结果提示 :金粉蕨素保护血管内皮依赖性舒张功能可能与促进内皮细胞释放一氧化氮和前列环素有关。     

垫状卷柏化学成分研究

垫状卷柏Selaginella pulvinata Hoor et Grev.为卷柏科卷柏属植物,广布于四川,云南,西藏,广西,广东,江西,湖北,河北和河北等地,民间生用治经闭,跌打损伤,腹痛和哮喘,炒炭用治吐血,便血 ,尿血和脱肛等^[1],其化学成分未见报道。     

四逆散对蛋氨酸-胆碱缺乏饮食诱导的小鼠非酒精性脂肪肝炎的研究

目的 研究四逆散对蛋氨酸-胆碱缺乏（methionine-choline-deficient,MCD）饮食诱导的小鼠非酒精性脂肪肝炎的作用及机制。方法 通过MCD饮食诱导小鼠非酒精性脂肪肝炎模型,并同时预防性给药普罗布考及四逆散4周,HE染色观察各组小鼠肝组织病理改变;检测小鼠血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、门冬氨酸氨基转移酶（AST）、三酰甘油（TG）、含量以及肝脏组织TG、丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活力。结果 四逆散高剂量组小鼠血清ALT、AST均有下降,血清中TG含量升高,且肝脏TG含量降低;病理观察显示四逆散高剂量组小鼠肝细胞内脂肪空泡减少,炎性细胞浸润减少;同时肝组织SOD活力增加,MDA含量降低。结论 高剂量四逆散对MCD饮食诱导的小鼠非酒精性脂肪肝炎有预防作用,其主要通过调节血清和肝脏TG的分布,增加肝组织抗氧化能力,减少体内过氧化物损害来实现。     

双烟酸姜黄素酯纳米粒与双烟酸姜黄素酯体内转运动力学特性研究

目的 提高双烟酸姜黄素酯的生物利用度，考察双烟酸姜黄素酯是否代谢为姜黄素。方法 以新西兰家兔为试验对象，采用口服给予双烟酸姜黄素酯纳米粒与双烟酸姜黄素酯原料药后，在不同时间点采血，HPLC测定血中双烟酸姜黄素酯、姜黄素等成分含量，计算体内药物转运动力学参数AUC，比较两者的差别。结果 采用统计矩法中的零阶矩法计算AUC，原料药的AUC平均值为（354.835±8.660）μg·L^-1·h，而纳米粒的AUC平均值为（883.335±16.37）μg·L^-1·h。纳米粒的AUC是原料药AUC的2.486倍。可知纳米粒与原料药相比显著提高了生物利用度；血中未检测到姜黄素。结论 双烟酸姜黄素酯制成纳米粒可显著提高双烟酸姜黄素酯的生物利用度；双烟酸姜黄素酯在体内没有代谢为姜黄素。     

Daxx与雄激素受体结合的功能片段筛选

目的体外筛选出能与雄激素受体具有相互作用的Daxx结构域。方法应用聚合酶链反应扩增Daxx四个不同功能结构域,分别连接到带有GST标记的原核表达质粒pGEX-6p-1中,构建Daxx四个功能结构域的原核表达载体。经测序鉴定转化E Coli.BL21DE3菌株,经氨苄青霉素筛选并扩增阳性克隆,用IPTG诱导蛋白表达后纯化蛋白,采用GST pu ll-down体外筛选出与雄激素受体具有相互作用的Daxx功能结构域。结果 Daxx不同功能结构域的四个原核表达载体pGEX-6p-1/Daxx/DM1-240、pGEX-6p-1/Daxx/DM241-501、pGEX-6p-1/Daxx/DM502-625和pGEX-6p-1/Daxx/DM626-740经琼脂糖凝胶电泳和DNA测序分析,证实插入质粒的片段大小正确,无读码框移位和突变。IPTG诱导后蛋白表达具有明显差异性,表达蛋白与预期表达蛋白质分子量大小相当。纯化蛋白进行GST pu ll-down实验结果显示Daxx与雄激素受体具有相互作用。结论 Daxx通过第626-740位氨基酸序列与雄激素受体相互结合。     

尼曼-匹克C1型类似蛋白1介导依泽替米贝对RAW264.7细胞脂质蓄积的抑制作用

目的观察肠道胆固醇吸收抑制剂依泽替米贝(ezetimibe)对RAW264.7细胞源性荷脂细胞脂质蓄积的影响并对其机制进行初步探讨。方法采用油红O染色、高效液相色谱法检测细胞内脂滴数量和细胞内脂质含量,Western blot对NPC1L1(Niemann-Pick type C1Like-1)进行定性和半定量检测。结果RAW264.7细胞中有NPC1L1蛋白表达。不同浓度(0、0.003、0.01和0.03mol.L-1)依泽替米贝预先孵育RAW264.7细胞24h或最佳浓度(0.03mol.L-1)预先孵育不同时间(0、6、12和24h)后,换50mg.L-1oxLDL继续孵育24h,结果显示不同浓度ezetimibe预先孵育后,细胞内脂滴数量与面积随着浓度的增加而逐渐减少;Ezetimibe预先孵育可减少细胞内脂质蓄积,并呈浓度和时间依赖性。其中0.03mol.L-1ezetimibe预先孵育24h组作用最明显,CE百分比较oxLDL单独孵育组减少了约47%±0.1%。结论小鼠源性巨噬细胞RAW264.7中存在NPC1L1蛋白表达;依泽替米贝能够减少RAW264.7细胞中NPC1L1蛋白表达;依泽替米贝抑制RAW264.7细胞中脂质蓄积。     

醛酮还原酶超家族的研究进展

醛糖还原酶是多元醇通路的限速酶,此酶的激活被认为与糖尿病慢性并发症有关。本文主要就醛糖还原酶的基本结构、代谢特点及醛糖还原酶类似蛋白酶1的最新研究进展与糖尿病慢性并发症的关系予以综述。     

心血管疾病中细胞胀亡的理论研究

目的:寻找细胞胀亡的标志性蛋白质,以求建立标记胀亡细胞的有效方法,揭示心血管疾病中细胞胀亡的病理过程与意义。资料来源:检索Medline1996-01/2005-12与细胞胀亡相关的文献,检索词为“oncosis”,并限定文章语言种类为英文。同时检索中国期刊全文数据库1996-01/2005-12有关细胞胀亡的文章,检索词为“细胞胀亡、心血管疾病”,限定文章语言种类为中文。资料选择:对资料进行初审,选取包括细胞胀亡研究进展和/或心血管疾病中细胞胀亡研究方向的相关文献,筛除明显不随机或无对照组的试验研究,对剩余文献查找全文。排除标准:重复性研究和综述类文章。资料提炼:共收集到122篇关于细胞胀亡的研究文章,其中26篇为综述类文章,与心血管疾病关系密切的文献也有26篇,其他文献主要体现了细胞胀亡在心血管外的系统的发现和鉴别,并且文献中区分细胞胀亡和细胞凋亡的方法多重复。排除标准:重复性研究。资料综合:符合标准文章20篇。细胞胀亡是细胞的死亡方式之一,常出现在心血管病变部位。细胞胀亡不同于凋亡的形态学特征主要是病变早期细胞胞体肿胀,胞膜完整性破坏等,但仍难于与凋亡细胞相鉴别,需寻找标志性蛋白质加以区分。参与细胞胀亡的信号分子包括丝裂原激活蛋白激酶和解耦联蛋白等。结论:尽管目前尚缺乏鉴别细胞胀亡的有效方法,限制了细胞胀亡在心血管疾病中病理意义的揭示,但通过信号通路研究,有望找到细胞胀亡的标志性蛋白;有利于心血管疾病防治建立崭新的靶点。     

心血管疾病中细胞胀亡的理论研究

目的：寻找细胞胀亡的标志性蛋白质，以求建立标记胀亡细胞的有效方法，揭示心血管疾病中细胞胀亡的病理过程与意义。 资料来源：检索Medline1996-01／2005-12与细胞胀亡相关的文献，检索词为“oncosis”，并限定文章语言种类为英文。同时检索中国期刊全文数据库1996—01／2005-12有关细胞胀亡的文章，检索词为“细胞胀亡、心血管疾病”，限定文章语言种类为中文。 资料选择：对资料进行初审，选取包括细胞胀亡研究进展和／或心血管疾病中细胞胀亡研究方向的相关文献，筛除明显不随机或无对照组的试验研究，对剩余文献查找全文。排除标准：重复性研究和综述类文章。资料提炼：共收集到122篇关于细胞胀亡的研究文章，其中26篇为综述类文章，与心血管疾病关系密切的文献也有26篇，其他文献主要体现了细胞胀亡在心血管外的系统的发现和鉴别，并且文献中区分细胞胀亡和细胞凋亡的方法多重复。排除标准：重复性研究。 资料综合：符合标准文章20篇。细胞胀亡是细胞的死亡方式之一，常出现在心血管病变部位。细胞胀亡不同于凋亡的形态学特征主要是病变早期细胞胞体肿胀，胞膜完整性破坏等，但仍难于与凋亡细胞相鉴别，需寻找标志性蛋白质加以区分。参与细胞胀亡的信号分子包括丝裂原激活蛋白激酶和解耦联蛋白等。 结论：尽管目前尚缺乏鉴别细胞胀亡的有效方法，限制了细胞胀亡在心血管疾病中病理意义的揭示，但通过信号通路研究，有望找到细胞胀亡的标志性蛋白；有利于心血管疾病防治建立崭新的靶点。     

3T3-L1脂肪细胞与胰岛素抵抗脂肪细胞miRNAs表达谱的差异性分析

目的探讨正常3T3-L1脂肪细胞和胰岛素抵抗(IR)脂肪细胞微小RNA(miRNAs)的差异性表达,并进行初步分析。方法采用高糖(25 mmol/L葡萄糖)/高胰岛素液(1μmol/L)处理3T3-L1脂肪细胞24h,通过葡萄糖摄取实验判断IR脂肪细胞模型的建立;接着通过miRNA芯片技术,检测脂肪细胞和IR脂肪细胞中miRNAs的表达,并对其分析;随后借助生物信息学方法,对显著变化的2个miRNAs(miR-320和miR-21)寻找并筛检其可能调控的靶基因。结果共获得79个IR相关miRNAs(29个低表达,50个高表达,其中miR-320显著上调,miR-21显著下调),且筛选出与IR或糖尿病相关的靶基因共13个。结论获得了3T3-L1脂肪细胞和IR脂肪细胞miRNAs的差异性表达谱,为进一步研究这些miRNAs在IR和糖尿病的发病机制中的作用奠定了基础。