不同抗癌药物对乳癌MCF-7细胞增殖及端粒酶活性的影响

目的 研究乳癌细胞MCF－7在不同抗癌药物存在的情况下端粒酶活性的变化规律，方法 运用细胞记数、台盼莅临 色和MTT法测定细胞增殖能力及其活性，同进用TRAP法测定细胞端粒酶活性。观察细胞在不同情况下端粒酶活性变化及其影响因素。结果 在无药物存在时，细胞增殖与端粒酶活性增加呈正相关（r=0.901）。阿霉素、紫杉醇和顺铂都能有效抑制细胞生长，以剂量依赖方式和时间依赖方式降低端粒酶活性，这种降低也活性细胞减少密切相关。结论 阿霉素、紫杉醇和顺铂抑MCF－7细胞生长，其机制可能与降低端粒酶活性及细胞活性有关。     

羟基磷灰石／魔芋葡甘聚糖复合材料的制备和表征

目的：制备羟基磷灰石／魔芋葡甘聚糖复合材料，分析两者间的结合机制以及羟基磷灰石和魔芋葡廿聚糖复合性能最佳时的工艺条件。方法：实验于2007-03／06在昆明理工大学组织工程支架与多孔催化载体实验室完成。通过共沉淀法制备羟基磷灰石（hydroxyapatite，HAP）／魔芋葡甘聚糖（konjac glucomannan，KGM）复合材料。对不同pH样品进行X射线衍射仪物棚分析。KBr压片法制样，傅里叶转换红外光谱仪测定样品的傅里叶转换红外光谱。样品表面喷金后，用扫描电镜观察样品的形貌和微观结构及进行电子能谱分析。结果：复合材料中的无机相为部分碳酸根取代的呈弱结晶状态的HAP，KGM分子链上乙酰基中的羰基是HAP的成核位点。pH值是影响HAP和KGM间交互作用的关键因素，HAP和KGM的原料比对复合性能有明显影响。当pH=9．0和10．7、原料比为w（HAP／KGM）=30／70时，HAP和KGM复合良好。结论：实验制备的HAP／KGM复合材料是一种潜在的骨组织工程支架材料，pH值和HAP／KGM原料比是影响HAP和KGM复合性能的重要影响因素。     

三七总皂甙对兔血管平滑肌细胞核因子κappaB和细胞周期的影响

目的观察三七总皂甙对兔VSMC生长增殖、细胞周期和NF-κB活性的影响 ,以探讨其药理机理。方法胎牛血清刺激体外培养的兔VSMC使其快速增殖生长 ,加入不同浓度的三七总皂甙作用一定时间后 ,通过MTT法测定三七总皂甙对VSMC生长的抑制率、流式细胞技术测定细胞周期和NF -κB活性的影响。结果三七总皂甙能明显抑制胎牛血清刺激的VSMC的增殖 (IC50 为14.8μg/ml)。三七总皂甙还以浓度依赖方式减少S期细胞 ,阻滞细胞于G0/G1 期 ,并下调NF-κB活性 ,与对照组相比具有显著差异 (P<0.01)。结论三七总皂甙能显著抑制VSMC的增殖生长 ,其抗动脉粥样硬化的作用机理之一可能是通过调控VSMC的NF-κB活性来实现的     

ATP酶、乳酸脱氢酶活性作为冷藏鱼肉变质的指标

据测定,在鱼体内ATP酶和乳酸脱氢酶都具有较高的活性,但死后肌肉ATP酶活性与ATP降解相关,ATP的降解导致尸僵的发生,乳酸脱氢酶是糖酵解过程中的关键酶,而且普遍存在于各种动物细胞中。这表明在鱼组织中可能出现的许多酶作为鱼肉的质量控制指标是有潜在应用价值的。据报道,曾有人通过测定鱼肉组织中的酶活性来鉴别新鲜鱼和冷冻     

真核表达质粒pcDNA3.1(+)-DNFGFR1在小鼠BMSCs中的表达及意义

目的探讨含有基因成纤维细胞生长因子受体1显性负性分子(DN FGFR1)的真核表达质粒pcDNA3.1(+)-DNFGFR1转染骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)后的表达及意义。方法体外分离培养C57/BL小鼠BMSCs,应用综合贴壁的方法纯化BMSCs。由阳离子脂质体介导将pcDNA3.1(+)-DNFGFR1转入BMSCs中,用RT-PCR法检测DNFGFR1mRNA的表达。结果小鼠BMSCs原代培养24h后见细胞贴壁伴有伸展现象,细胞核清晰,10d左右细胞密度明显增加,细胞形成单层,融合率达80%,综合贴壁培养使BMSCs更纯。转染组条带灰度值与β-actin比值(3.8)明显高于未转染组(0.5)。结论 pcDNA3.1(+)-DNFGFR1质粒能被导入BMSCs并得到表达,为研究FGFR1的功能奠定了实验基础。     

紫杉醇对乳腺癌MCF-7细胞端粒酶、凋亡及p53/bcl-2表达影响的研究

目的 观察紫杉醇对MCF-7细胞端粒酶活性、凋亡及其p53/bcl-2表达的影响，以了解紫杉醇的抗癌机理。方法 运用体外细胞培养、端粒酶重复序列扩增-酶联免疫吸附法（TRAPELISA）及流式细胞技术观察、分析不同浓度的紫杉醇作用72h的MCF-7细胞。结果 紫杉醇能以浓度依赖方式下凋端粒酶活性并诱导细胞凋亡，使其bcl-2基因的表达显著降低，而P53基因的表达则增强。端粒酶活性下调与细胞凋亡及其P53/bcl-2基因表达有关。结论 紫杉醇能下调端粒酶活性、诱导细胞凋亡、降低bcl-2的表达和增强p53的表达，这可能是紫杉醇抗癌作用的重要机理之一。     

原发性肺动脉高血压治疗的研究进展

原发性肺动脉高血压(primary pulmonary hypertension,PPH)是常发生于30岁～40岁之间的女性,且对这些患者而言是发病率及死亡率均很高的一种进行性加重疾病。但直到最近,仅有少数病人得到有效治疗。然而,近年在细胞及分子生物学方面取得的成就,极大地增加了人们对该病的认识,为该病的治疗提出了许多思路和方法。本文拟对上述最新研究结果综述如下:     

人骨髓胚胎样干细胞向多核肌纤维诱导分化的研究

目的: 比较骨髓来源的胚胎样干细胞(ELSCs)与间充质干细胞(MSCs)的体外成肌分化能力。方法:采用胚胎干细胞扩增用的无血清Knockout-DMEM培养基在明胶包被过的培养瓶中培养人骨髓单个核细胞以分离ELSCs,传统方法从相同骨髓中分离MSCs,倒置相差显微镜下观察细胞形态特征,采用免疫荧光染色鉴定多潜能抗原标志的表达。成肌分化液分别培养ELSCs和MSCs,采用免疫染色法检测肌纤维特异性抗原标志肌球蛋白重链(MHC)、成肌素(myogenin)和MyoD蛋白的表达, RT-PCR检测MHC、myogenin和MyoD mRNA的表达,计算MHC阳性肌纤维的比例以比较ELSCs与MSCs的体外成肌分化能力。结果:无血清培养基可从骨髓中分离到弱表达多潜能抗原标志Oct-4、Nanog-3和Sox-2的ELSCs,体积较小,形态纤细均一,在形态方面不同于相同骨髓来源的MSCs,后者不表达多潜能抗原标志。在成肌分化液中培养,ELSCs和MSCs均可被诱导为在蛋白和mRNA水平表达MHC和myogenin的多核肌纤维,但诱导培养10 d时,ELSCs的MHC蛋白阳性肌纤维的比例为(25.7±4.1)%,MSCs为(15.8±7.6)%,ELSCs的成肌分化能力明显高于MSCs(P<0.05)。 结论:骨髓ELSCs能被诱导为多核肌纤维,并具有比来自相同骨髓的MSCs更强的成肌分化能力,ELSCs是肌病治疗更理想的种子细胞。     

一种从骨髓中分离胚胎样干细胞的技术方法

目的建立从成体骨髓中分离胚胎样干细胞的技术方法。方法采用密度梯度离心法从成体骨髓中分离单个核细胞,运用胚胎干细胞扩增用的无血清knockout-DMEM培养基在明胶包被过的培养瓶中扩增培养,光学显微镜下观察细胞形态特征,分别采用免疫荧光染色和RT-PCR方法鉴定多潜能干细胞标志的表达。结果采用无血清培养基在明胶包被过的培养瓶中培养的方法,可从成体骨髓中分离到贴壁生长的细胞,这些细胞与传统方法分离到的间充质干细胞相比体积更小、形态纤细均一,传代后均匀分布生长,不易老化,而且这些细胞弱表达多潜能抗原标志Oct-4、Nanog-3和Sox-2。结论采用扩增胚胎干细胞的技术方法可以从成体骨髓中分离到表达部分多潜能干细胞标志的胚胎样干细胞。