院内感染的病原菌分布及耐药性分析

目的：了解医院临床分离菌的耐药情况，从而控制医院感染。方法：2002年1～6月仁济医院分离菌用Kirby—Bauer法进行药敏试验。结果:分离菌株825株，其中革兰阳性菌399株(48．36％)，革兰阴性菌426株(51．64％)。检出率较高的革兰阴性菌对氦苄西林-舒巴坦、头孢唑啉的耐药率最高，而对头孢哌酮-舒巴坦、亚胺培南的耐药率最低。金黄色葡萄球在菌种分布中占第一位，其对万古霉素、利福平和奈替米星耐药率为0，而对青霉素类、头孢类药物的耐药率较高。粪肠球菌的分离率位届第二，未出现对万古霉素耐药者，但对环阳沙星、红霉素，庆大霉素的耐药率相对较高。结论：为控制细菌的耐药性，必须加强抗菌药物的合理使用。     

耐万古霉素肠球菌表型检测及基因分型

目的 研究对万古霉素耐药或中介的肠球菌株的表型和基因型，以了解本院耐万古霉素肠球菌（VRE）的流行状况，指导临床合理用药。方法 收集200株临床分离的肠球菌株，用琼脂筛选法筛选VRE，并分别用E test和多重PCR检测和分析对万古霉素耐药或中介肠球菌株的表型和基因型。结果 共检出10株对万古霉素耐药或中介的肠球菌株，其中5株为天然耐万古霉素肠球菌。基因型分析的结果为1株van A型，4株van C1型，3株van C2型，2株基因型不明。结论 已发现5株VRE（1株VAN A型），提示临床上须合理使用抗生素，以防止VRE等多重耐药细菌的爆发流行。     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶检测及其耐药基因分析

目的了解大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的发生率,分析及研究其耐药性和耐药基因分型。方法用药敏纸片法对142株大肠埃希菌和79株肺炎克雷伯菌进行抗生素药物敏感试验,并对这2种菌株做ESBLs初筛和确证试验。对其中60株ESBLs阳性菌（大肠埃希菌29株,肺炎克雷伯菌31株）用聚合酶链反应（PCR）检测TEM、SHV、CTX-M3种基因并进行测序分型。结果142株大肠埃希菌和79株肺炎克雷伯菌中确证试验阳性率分别为56.3%和41.8%。产ESBLs菌对头孢类抗生素高度耐药,对庆大霉素、环内沙星的耐药率为71.3%-88.5%,对亚胺培南高度敏感（100.0%）,对头孢西丁、头孢哌酮-舒巴坦、哌拉西林-他唑巴坦等的敏感性在63.8%-92.0%。60株ESBLs阳性菌中,TEM、SHV、CTX-M3种基因检出率分别为58.3%、33.3%、66.7%。其中29株大肠埃希菌中,TEM基因检出率为75.8%,SHV基因检出率为0,CTX-M基因检出率为86.2%。31株肺炎克雷伯菌中,TEM基因检出率为41.9%,SHV基因检出率为64.5%,CTX-M基因检出率为48.4%。有35株（58.3%）菌株同时检测到2种以上基因型。序列分析证实TEM扩增产物均属于TEM-1基因,CTX-M扩增产物均属于CTX-M-3基因,而SHV扩增产物则分别属于SHV-1、SHV-5、SHV-11、SHV-12、SHV-28。结论大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产ESBLs的检出率较高,CTX-M-3、SHV-11和SHV-12是我院产ESBLs菌株的主要基因型。     

补充双歧三联活菌对结直肠癌术后患者免疫状况和炎性反应的影响

目的 探讨结直肠癌患者术前补充双歧三联活菌对术后免疫状况和炎性反应的影响.方法 60例患者入院后按随机数字表法分为治疗组和对照组.治疗组30例术前5 d起在常规肠内营养基础上口服双歧三联活菌：对照组30例术前肠道准备按传统方法进行.两组患者手术前3d和术后第1次自然排便（术后3～5 d）时分别留取粪便作肠道菌群分析,检测粪便SIgA;术前1 d和术后1、9 d进行免疫和炎性反应指标检测,并观察患者术后感染并发症发生情况.结果 术后治疗组患者双歧杆菌（B）/大肠杆菌（E）比值（2.01±0.36）较术前（26.53±4.22）明显下降（P＜0.05）,但仍大于1：对照组患者手术前后B/E比值（0.72±0.14和0.02±0.06）均明显低于治疗组（P＜0.05）.术前两组免疫和炎性反应指标检测结果差异无统计学意义（P＞0.05）.术后第1天,两组患者免疫球蛋白、淋巴细胞总数和粪便SIgA均下降,炎性因子均上升.术后第9天,两组患者血清IgG水平逐渐上升,但治疗组显著高于对照组（P＜0.05）,而血清IL-6和C反应蛋白水平显著低于对照组（P＜0.05）;粪便SIgA水平治疗组显著高于对照组（P＜0.05）.术后感染并发症发生率治疗组低于对照组（P＜0.05）,但术后其他并发症发生率及住院天数两组差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 术前常规肠内营养基础上补充双歧三联活菌能改善结直肠癌患者肠道菌群失调.益于术后重建肠道菌群平衡、提高机体免疫状况和保护肠黏膜屏障功能及减轻炎性反应.     

亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌外排泵机制研究

目的研究亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌(IRAB)耐药性与主动外排泵之间的关系,从而指导临床合理用药及控制院内感染。方法收集临床分离的IRAB 50株,亚胺培南敏感鲍曼不动杆菌(ISAB)30株。采用琼脂稀释法检测上述细菌对13种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC),加入外排泵抑制剂Phe-Arg-beta-Naphthylamide(PAβN)观察对亚胺培南MIC变化;脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株同源性;聚合酶链反应(PCR)检测adeB、adeR、adeS、adeJ、abeM基因。结果 50株IRAB中MIC50>128μg/mL的抗菌药物有阿米卡星、环丙沙星、哌拉西林-他唑巴坦、头孢哌酮、头孢西丁、四环素和复方磺胺甲口恶唑,MIC50在32～128μg/mL的抗菌药物有美罗培南、头孢哌酮-舒巴坦、头孢吡肟、头孢他啶、头孢曲松、头孢噻肟,MIC50<8μg/mL的抗菌药物有左氧氟沙星和多黏菌素B。对30株ISAB,MIC50<8μg/mL的药物有美罗培南、阿米卡星、头孢哌酮-舒巴坦、头孢他啶、头孢吡肟、多黏菌素B。加入抑制剂,33株IRAB(66%)对亚胺培南的MIC有4～32倍的降低,ISAB无明显变化。根据PFGE图谱可分为7型,A型为主要流行株。PCR扩增,IRAB的adeB、adeR、adeS、adeJ、abeM基因检出率均>80%,与ISAB相比,差异有统计学意义(P<0.01)。结论仁济医院IRAB存在播散流行,且有AdeABC、AdeIJK、AbeM等外排泵广泛存在。     

Vitek GPI卡鉴定凝固酶阴性葡萄球菌临床应用评估

凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)已成为医院感染的重要致病菌之一.本试验用Vitek GPI卡和API条来鉴定CNS,并与传统方法作对照,评估GPI卡鉴定CNS的准确率.结果显示,100株CNS菌株,Vitek GPI卡鉴定与传统方法比较,符合率为64%,API葡萄球菌鉴定系统与传统方法比较,符合率为93%.其中,GPI卡鉴定可信度在90～99%之间的菌株为65.4%(53/81),API系统鉴定可信度在90～ 99 %之间的菌株为58.3%.实验说明,Vitek GPI卡鉴定葡萄球菌虽快速,但与传统法比较,鉴定符合率较低,而API系统虽时间较长,但符合率高.     

不同培养基对血液透析用水细菌菌落检测比较

目的比较各种培养基在不同培养温度和时间条件下对血液透析用水的细菌检出率,探索临床上合适的透析用水细菌菌落检测方法。方法2012年1—12月随机采集上海交通大学医学院附属仁济医院血液净化中心透析用水样本共152份。分别接种在血培养基、胰蛋白酶大豆琼脂（TSA）、Reasoner’2A琼脂（R2A）和胰蛋白胨葡萄糖浸膏琼脂（TGEA）的4种培养基,分别在20℃、30℃和35℃培养48～168h。培养结束时对每个培养皿进行细菌菌落计数。结果血培养基组透析用水细菌菌落计数和细菌检出率最低,与TGEA和R2A相比差异具有统计学意义（P〈0．05和P〈0．01）。R2A在20℃环境下培养168h,细菌检出率较血培养35℃培养48h显著增加（67．1％vs43．4％,P〈0．01）。Bland．Ahman分析显示,R2A培养基20℃培养168h与TGEA培养基30℃培养120h两组细菌检出率具有较好的一致性。结论使用R2A或TGEA培养基较血培养基显著提高透析用水细菌菌落计数和细菌检出率。临床上适合选用R2A培养基20℃、168h或TGEA培养基30℃、120h方法对血液透析用水进行细菌菌落检测。     

磁微粒吖啶酯化学发光法检测AMH的性能评估及成年女性AMH参考区间的建立

目的 评价磁微粒吖啶酯化学发光法检测抗苗勒管激素(AMH)的性能,建立成年女性AMH的参考区间.方法 依据美国临床试验室标准化协会(CLSI)相关文件对磁微粒吖啶酯化学发光法检测AMH的性能(空白限、检测限、定量限、精密度,线性范围)进行评价.采用线性回归分析和相对偏移评估电化学发光法与磁微粒吖啶酯化学发光法检测AMH...     

降钙素原和C反应蛋白联合检测在新生儿感染性疾病诊断中的应用评估

目的 :探讨降钙素原(procalcitonin,PCT)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)联合检测对于各类新生儿感染性疾病的临床诊断价值。方法:选取我院同时进行PCT和CRP检测的新生儿,其中血流感染24例,肺炎27例(肺炎组),并选取排除血流感染和肺部感染的健康新生儿28例作为正常对照组。检测感染性疾病患儿和健康新生儿的PCT和CRP水平。通过诊断试验四格表分别计算灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值。结果:正常对照组的PCT和CRP水平分别为(0.48±0.01)ng/m L、(1.17±0.09)mg/L,血流感染组分别为(1.51±0.57)ng/m L、(8.98±2.64)mg/L,肺炎组分别为(0.87±0.27)ng/m L、(6.67±1.67)mg/L。后两组的PCT、CRP水平均明显高于正常对照组的检测结果,差异有统计学意义(P