结核分支杆菌弱毒株H37Ra减毒机制的初步探讨

目的:通过结核分支杆菌H37Rv和H37Ra蛋白质组分析,以期了解与H37Rv毒力相关的基因和H37Ra减毒机制.     

单克隆抗体ELISA双抗体夹心法检测支气管肺泡灌洗液结核杆菌抗原

利用抗结核分支杆菌ＭｃＡｂ和抗结核分支杆菌ＨＲＰ－ＭｃＡｂ经双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法，对１２８份支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬ）标本进行了检测。结果：痰菌阴性肺结核病人ＢＡＬ标本中结核分支杆菌抗原水平明显高于非结核肺部疾病组。对菌阴肺结核检出的敏感性为８４．１％，特异性为８２．４％，此法降低了利用多克隆抗体检测ＢＡＬ标本易出现的假阳性率。认为此法可作为结核病的辅助诊断方法。     

DNA序列分析与PCR—SSCP分析结核分支杆菌利福平敏感性的比较

目的 了解DNA序列分析与PCR—SSCP法分析利福平敏感性的价值。方法 应用DNA序列分析与PCR—SSCP法检测利福平敏感的结核分支杆菌临床分离株25株、耐药株41株的利福平耐药相关基因rpoB基因核心区域的突变情况。结果 25株利福平敏感株DNA序列分析未检测到rpoB基因突变，41株耐利福平株中38株发生突变，突变率为92．7％(38／41)；25株利福平敏感的结核分支杆菌菌株PCR—SSCP带型与对照H37Rv株相同，41株耐利福平结核分支杆菌菌株中38株SSCP带型不同于对照株，提示有突变存在。与DNA序列分析相比，PCR—SSCP检测准确率为93．9％(62／66)，敏感度为92．1％(35／38)；特异度是96．4％(27／28)。结论 DNA序列分析对判断结核分支杆菌耐利福平非常有价值；PCR—SSCP可用于利福平耐药结核分支杆菌的初步筛选。     

腺苷脱氨酶和聚合酶链反应对结核性胸膜炎的诊断价值

本对71例单纯性结核性胸膜炎、27例癌性胸腔积液和5例其他原因胸腔积液病例进行调查分析，结核性病例中胸水ADA≥21u／L的占53．52％，胸水ADA≥11u/L的占88．73％，胸水结核杆菌PCR的阳性率为35．21%；而癌性胸水ADA值均小于11u/L，PCR也都阴性。结果表明ADA对结核性胸水和恶性胸水具有鉴别诊断价值，PCR可在基因水平对结核性胸水作出特异诊断；两同时检测对结核性胸水的诊断以及与癌性胸水和其它胸水的鉴别诊断具有独特的实用价值。     

BCG基因的克隆与表达

本文应用变铅青链霉菌质粒PIJ486和宿主TK64系统,研究BCG DNA的克隆与表达。重组体的转化率为23.5％。提取85个阳性克隆质粒DNA,经电泳证明均插入BCG DNA片断,任选其中8个质粒DNA经BglⅡ酶切,插入片断大小平均3.43(1.99～4.70)kb。一个阳性克隆株S_(20)的表达产物为分子量16KD_a的细胞内蛋白质抗原。它与人型结核杆菌、牛型结核杆菌、BCG抗体呈阳性反应,斑点免疫试验特异性比PPD强。这一结果为进一步研究结核杆菌基因工程技术、研制更有效的结核病诊断、治疗、预防制剂提供了条件。     

全国结核病聚合酶链反应诊断技术应用专题学术研讨会纪要

全国结核病聚合酶链反应诊断技术应用专题学术研讨会纪要由中华结核和呼吸杂志编委会主办、解放军第三○九医院承办的“全国结核病聚合酶链反应（ＰＣＲ）诊断技术应用专题学术研讨会”于１９９５年７月５日～７日在北京召开。来自全国各地的有关专家就ＰＣＲ在结核病诊断...     

光敏生物素标记人型结核分支杆菌DNA探针的研究

用国产光敏生物素醋酸盐,对人型结核杆菌(MT)全染色体DNA进行光照标记,然后与不同菌种DNA进行斑点杂交反应和Southern转移杂交,以亲和素-碱性磷酸酶(A-Ap)系统显色。探针的敏感性为1.5ng。探针与MT和卡介苗(BCG)DNA杂交呈强阳性;与其它分支杆菌DNA杂交呈弱阳性,与大肠杆菌质粒pUC19DNA杂交呈阴性;但与链霉菌染色体及其质粒p1J486DNA杂交也呈弱阳性。该探针的敏感性和特异性与放射性同位素~(32)p标记的MT探针的结果完全一致,而且适于常规实验室推广应用。     

痰菌阴性L型菌阳性的60例肺结核病人的临床分析

为了解痰菌阴性(-)L型菌阳性( )肺结核病人的临床表现和特点，对204例痰涂片及培养均阴性的肺结核病人做痰标本L型菌分离培养，依据L型菌分离培养的结果分为60例L型菌( )组及144例L型菌(-)组，并将其主要症状、X线表现及治疗结果进行比较。结果204例痰菌阴性肺结核L型菌检出率为29．4％，L型菌( )组的干酪病灶和干酪空洞多于L型菌(-)组，L型菌(-)组病灶的显著吸率(病灶吸收≥50％)高于L型菌( )组。作者认为，L型菌的存在提示病变有活动性，结核病的治疗必须坚持合理的全程化疗，直至痰中消灭L型菌。     

人型结核杆菌H_(37)Ra的抗原决定簇的筛选及其初步鉴定

本文报导一种筛选人型结核杆菌H_(37)Ra的抗原决定簇的Western Blot分析技术。细菌培养滤液经15％SDS-PAGE电泳进行分离,然后电转移到硝酸纤维素薄膜上,应用鼠抗人型结核杆菌单克隆抗体进行免疫反应。通过免疫印染,一条能与单克隆抗体起强阳性反应的蛋白带被识别。应用蛋白质洗脱技术,这个蛋白质片段被提纯。经过SDS-PAGE电泳分析,这个含有抗原决定簇的蛋白质片段分子量为17500道尔顿,斑点免疫试验证实该片段具有生物学活性。本文提示,Western Blot分析技术是选择抗原决定簇的有用方法,为结核病的诊断提供了新的途径。