聚合酶链反应技术快速检测肺组织中结核杆菌的研究

聚合酶链反应技术快速检测肺组织中结核杆菌的研究庄玉辉，李宁，张小刚，李国利，吴雪琼，张玉芝有些结核病例在病理组织学上往往缺乏典型的结核肉芽肿和干酪样坏死，与结节病肉芽肿、肺部圆形病灶等组织切片不易鉴别，常常依赖于病原学检查。传统的病原学诊断方法敏感性...     

结核杆菌HSP65 DNA疫苗的初步研究

目的 构建以结核分枝杆菌热休克蛋白65000u基因为基础的核酸疫苗。方法 采用聚合酶链反应从结核杆菌H37Rv株基因中，扩增出HSP65的编码基因，经限制性核酸内切酶消化后，插入真核表达载体pcDNA3.1(－）的相应酶切位点，并将此重组质粒免疫动物。结果 重组质粒的插入基因经序列测定证实为结核分枝杆菌HSP65。DNA免疫小鼠体内产生特异性抗体。结论 以HSP65编码基因为基础的真核表达载体构建成功，并能引起特异性动物免疫反应，为进一步研究其在结核病防治中的作用奠定了基础。     

结核分支杆菌16000抗原基因在大肠杆菌中的高效表达及 …

目的 获得高效表达结核分支杆菌１６０００抗原的大肠杆菌工程菌,将培养物纯化后得到重组１６０００蛋白抗原纯品,并检测其免疫学特性。方法 用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法获得目的基因构建大肠杆菌高效表达株。聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ＿ＰＡＧＥ）分析重组蛋白抗原的相对分子质量大小及表达形式。ＤＥＡＥ及ＰＥＩ凝胶纯化重组蛋白。Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹及酶联免疫吸附测定法（ＥＬＩＳＡ）分析重组蛋白的免疫原性。结果 构     

支气管结核诊断治疗近况

支气管结核(ｂｒｏｎｃｈｉａｌｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ)临床并非少见,易与它病混淆。为加深对本病了解,复习了近年来国内外有关文献,就本病诊治近况做一简介。一、概况支气管结核又称支气管内膜结核(ｅｎｄｏｂｒｏｎｃｈｉａｌｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ,ＥＢＴＢ),是指发生在气管、支气管粘膜和粘膜下层的结核病。活动性肺结核中大约10%～40%伴有ＥＢＴＢ[1],而Ｌｅｅ等[2]报道2951例行常规纤维支气管镜(纤支镜)检者,121例(41%)为ＥＢＴＢ。一般认为女性发病是男性的2～3倍,中青年发病更常见,但老年ＥＢＴＢ有增加趋势。主支气管、两肺…     

16S-23SrDNA间隔区序列PCR扩增及探针杂交用于偶然分支杆菌暴发感染的研究

目的　从基因水平上确认福建省南平市注射后偶然分支杆菌暴发感染的致病菌,并建立PCR结合DNA探针杂交快速鉴定偶然分支杆菌的方案。方法 根据偶然分支杆菌16S-23S rDNA间隔区序列,设计合成一段寡核苷酸探针,采用PCR扩增、RFLP和DNA斑点杂交技术,对29株偶然分支杆菌临床分离株进行鉴定。结果 29株偶然分支杆菌临床分离株均被PCR扩增出一条约470bp的DNA条带,DNA探针杂交也出现特异的杂交斑点。结论 16S23SrDNA间隔区序列PCR扩增及DNA探针杂交在基因水平上确认引起此次注射后暴发感染的致病菌为偶然分支杆菌,该方法具有灵敏、特异的特点。     

结核病分子生物学研究进展

近半个世纪以来，以DNA双螺旋结构、DNA重组技术以及人类基因组学为标志的分子生物学的蓬勃发展，带动了整个生命科学乃至相关学科的发展，成为生物学的带头学科。分子生物学的理论与技术引进并渗透进结核病的多个领域，促进了结核病分子生物学的兴起与发展。近20年来，集中反映在以下5个方面取得了进展。     

16S-23S rDNA内转录间隔区序列寡核苷酸探针鉴定分支杆菌菌种的研究

目的研究以16S-23S rDNA内转录间隔区(intemal transcribed spacer,ITS)序列为靶基因设计分支杆菌菌种寡核苷酸探针,应用PCR-反向杂交技术快速鉴定分支杆菌菌种.方法应用PCR-反向杂交技术检测26种36株分支杆菌标准株,24株分支杆菌临床分离株.结果分支杆菌标准株和临床分离株经PCR扩增,依菌种不同可见一条约340bp～450bp范围DNA片段.探针特异性试验表明,21种寡核苷酸探针除草分支杆菌探针MPH与微黄分支杆菌亦杂交外,其余探针均为特异的.5株结核分支杆菌临床分离株鉴定为结核分支杆菌复合群,19株非结核分支杆菌临床分离株鉴定至种水平.结论 16S-23S rDNA ITS PCR-反向杂交鉴定分支杆菌菌种简便、快速、准确,具有较高应用价值.     

重视对结核分支杆菌L型的研究与检测

结核病细菌学常规检验方法检查的阳性率低。我国肺结核病痰标本涂片镜检的总体阳性率在3 0 %左右 ,培养检查法大体相当 (或略高 )还有 70 %左右是菌阴病例。而肺外结核则更低。这在实践中可能存在着假阴性 ,有时造成结核病诊断与鉴别诊断的困难 ,甚或漏诊与误诊。究其原因 ,一是传统的细菌学检验方法 ,尤其涂片镜检的敏感性低 ,一般痰标本每毫升含 5× 1 0 3 或以上抗酸杆菌才能被检测出 ,实际上有部分标本因检测方法敏感性问题造成假阴性 ;二是经培养证实确实存在着结核分支杆菌Ｌ型 ,在菌阴肺结核病标本中 ,结核分支杆菌Ｌ型阳性率约为 2 …