肝脏移植中门静脉机化血栓的诊断

目的探讨肝脏移植中门静脉机化血栓的诊断。方法2005年1月至2006年1月期间我院271例肝脏移植中32例存在门静脉机化血栓患者,术前做彩超、CT加三维血管成像(CTA)检查,术中彩超寻找、选择可用于门静脉重建的曲张血管,监测重建后门静脉血流速度。结果32例中既往有外科或介入治疗史23例,占71.8%。血栓分级Ⅰ级14例;Ⅱ级11例;Ⅲ级1例;Ⅳ级6例。术前确诊28例,确诊率为87.5%。术中彩超检查20例,门静脉重建后在超声监测下结扎分流侧支17例,结扎侧支前门静脉血流速度平均为(30.13±16.41)cm/s,结扎侧支后门静脉血流速度平均为(46.36±19.82)cm/s。结论对既往有外科治疗史患者应警惕门静脉机化血栓的可能。CT、CTA对门静脉系统整体评估有重要意义,术中彩超对门静脉的合理重建帮助很大。     

基于国家专利数据库的中药复方外治湿疹用药规律研究

目的 分析外治湿疹的中药复方专利用药规律,为中药新药的研发提供参考。方法 检索数据库建库至2022年4月10日国家知识产权局专利数据库中关于外治湿疹的中药复方专利,录入Excel 2019进行选录,借助SPSS Modeler 18.0软件、SPSS Statistics 25.0软件进行可视化分析、关联规则分析、聚类分析和关联规则网状图展示。结果 通过筛选共纳入中药复方专利142项,涉及中药445味。单味中药苦参71次(50.00%)、黄柏53次(37.32%)、蛇床子51次(35.92%)为出现频率最高的前三味中药。中药功效以清热药、祛风湿药、活血化瘀药为主。药性以平、寒、温为主,药味以苦味、辛味、甘味为主,主要归属于肝、肺、胃经。高置信度关联规则有“苦参-地肤子,白鲜皮、苦参-黄柏,白鲜皮、苦参-百部”等。聚类分析得到7类“苍术、牡丹皮、地肤子”、“防风、白芷、紫草”等。结论 中药复方专利外治湿疹有规律可循,以清热除湿、祛风止痒为基本原则,符合中医药治疗湿疹的理论基础。     

src抑制的蛋白激酶C底物调控内皮细胞分泌TNF-α

目的 探讨src抑制的蛋白激酶C底物(SSeCKS)对脂多糖(LPS)诱导大鼠肺微血管内皮细胞(PMVEC)分泌肿瘤坏死因子(TNF)-α的影响.方法 体外培养Wistar大鼠PMVEC,按随机数字表法分组(n=4),10 mg/L LPS刺激1h、3h、6h、12h、24 h或0.1 mg/L、1 mg/L、10 mg/L LPS刺激24 h;蛋白激酶C抑制剂(BIM)预处理0.5h或50 nmol/L SSeCKS-siRNA转染PMVEC 48 h后再加入10 mg/L LPS孵育24 h,酶联免疫吸附法检测细胞培养液上清TNF-α量(ng/L).采用SPSS10.0软件进行分析,组间比较采用单因素方差分析,以P＜ 0.05为差异具有统计学意义.结果 0.1、1、10 mg/L LPS刺激PMVEC 24 h后的,TNF-α分泌量分别为(253.70±23.55)、(327.88±37.25)、(403.20±36.22) ng/L,均高于未刺激组(82.28±22.56) ng/L(均P =0.000);10 mg/L LPS刺激PMVEC后,TNF-α分泌量于1h升高(170.11±49.22) ng/L,6h达峰值(404.82±13.78) ng/L,刺激24 h后仍维持高水平(395.67±36.23) ng/L,分别与未刺激组(84.60±23.61) ng,/L比较:P=0.001,0.000,0.000;BIM预处理PMVEC后再给予LPS刺激,TNF-α分泌量(200.44±27.39) ng/L较LPS单独刺激(402.28±31.07) ng/L显著较少(P=0.000);与LPS单独刺激比较(407.28±32.64) ng/L,SSeCKS-siRNA抑制SSeCKS表达后,LPS对PMVEC分泌TNF-α的诱导效应(195.20±13.28)ng/L也显著下降(P=0.000).结论 下调SSeCKS表达和蛋白激酶C活性可抑制LPS对PMVEC分泌TNF-α的诱导效应,从而减轻PMVEC的炎症反应.     

靶向大鼠Caveolin-1基因的短发夹RNA表达载体的构建

目的构建靶向大鼠caveolin-1基因的shRNA表达载体。方法化学合成靶向caveolin-1的单核苷酸链,经退火成双链。将退火得到的双链DNA克隆至表达载体pLL3.7中得到重组质粒,经限制性内切酶酶切、DNA测序进行鉴定。结果通过限制性内切酶酶切、DNA测序证实,成功构建大鼠pLL3.7-cav-1表达载体。结论成功构建了靶向大鼠caveolin-1的shRNA表达载体,为以后进行caveolin-1与ALI/ARDS的相关研究奠定了基础。     

原位肝移植术后血管并发症的超声诊断价值

目的评价彩色多普勒血流显像（color Doppler Flow Imaging,CDFI）技术对原位肝移植（Orthotopic Liver Transplantation,OLT）术后血管并发症的诊断价值。方法732例肝移植受者术后常规进行CDFI血流监测,对可疑血管并发症患者进行血管造影、螺旋CT及手术探查。结果CDFI检测出血管并发症61例,经血管造影、螺旋CT或手术确诊血管并发症53例,包括：肝动脉狭窄14例,肝动脉栓塞12例,肝动脉假性动脉瘤4例,门静脉狭窄12例,门静脉栓塞8例,流出道梗阻3例。结论彩色多普勒血流显像技术在肝移植后血管并发症的诊断中具有重要作用。     

开玄泄浊方对阳虚型银屑病大鼠外周血Th细胞平衡及相关细胞因子表达的影响

目的：探究开玄泄浊方对阳虚型银屑病大鼠外周血辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞（Treg）平衡及相关细胞因子表达的影响。方法：将72只大鼠随机分为空白对照组（16只）、模型组（56只）。所有大鼠背部脱毛后,空白对照组大鼠外涂凡士林,模型组大鼠予5%咪喹莫特乳膏外用+大黄灌胃建立阳虚型银屑病SD大鼠模型。将50只造模成功大鼠随机分为模型对照组、雷公藤多苷片组和开玄泄浊方低、中、高剂量组,每组10只。各组大鼠予以相应药物灌胃干预,1次/d,连续7 d。观察并记录大鼠背部皮损银屑病面积与严重性指数（PASI）评分,流式细胞仪检测外周血Th17/Treg比例,ELISA法检测白介素-17(IL-17)、转化生长因子β(TGF-β)水平,并取背部皮肤行病理组织切片观察。结果：与模型对照组比较,雷公藤多苷片组和开玄泄浊方低、中、高剂量组PASI评分、Th17/Treg比例、IL-17水平下降（P<0.05）,TGF-β水平上升,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论：开玄泄浊方治疗阳虚型银屑病的机制可能与调节Th17/Treg比例及相关因子的表达有关。     

婴儿双歧杆菌介导的双自杀基因CD/UPRT对鼠黑色素瘤细胞的杀伤效应

目的探讨尿嘧啶磷酸核糖转移酶(UPRT)基因对胞嘧啶脱氨酶/5-氟胞嘧啶(CD/5-FC)自杀基因系统抗瘤作用的增强效应。方法PCR扩增大肠杆菌UPRT基因,构建原核表达质粒pGEX-UPRT;以电穿孔法将该质粒转入婴儿双歧杆菌,筛选阳性重组菌并鉴定;采用MTT法检测表达的UPRT可否与CD产生抗瘤协同作用。结果重组婴儿双歧杆菌可以正确表达UPRT。体外MTT检测显示CD UPRT组细胞存活率明显低于对照组(P<0.01),且可使B16-F10鼠黑色素瘤细胞对5-FC杀伤敏感性(IC50=0.015μmol.ml-1)显著提高,是CD组(IC50=0.127μmol.ml-1)的8.5倍。结论婴儿双歧杆菌联合转导UP-RT基因可显著增强CD/5-FC自杀基因系统对鼠黑色素瘤细胞B16-F10的杀伤作用。     

肝移植术后胆道铸型综合征103例治疗体会

目的总结治疗肝移植术后胆道铸型综合征（BCS）的经验。方法回顾性分析103例肝移植术后BCS病人的治疗方法及转归。术后〈3个月病人出现较重梗阻症状或合并有胆道感染时，以PTBD外引流管置换T型管。术后≥3个月病人，行纤维胆道镜治疗。BC取出后，对有吻合口以上胆道上皮坏死者，以支撑管支撑3～6个月。病人按照病变程度分成单纯BC组、中度坏死（累及肝门部及以下胆道上皮）BC组、重度坏死（累及肝内外各级胆管）BC组，统计各组在治疗前后1周的肝功酶指标（GPT、GGT、ALP、TB、DB），用SPSS11．5软件行统计学分析。结果经过治疗后，单纯BC组32例，在随访过程中，未发现再有BC出现，各项肝功酶均在正常范围。中度坏死BC组53例，经支撑管支撑3～6个月后，治疗前后各项肝功指标有显著性差异（P〈0．05）。重度坏死BC组18例，9例因经济原因未能再次移植死于多脏器衰竭，1例死于急性梗阻性化脓性胆管炎。8例接受了再次肝移植。其中4例围手术期死于多脏器衰竭，3例行再次肝移植后恢复正常未再有BCS存在，1例出现再次肝移植后BCS，行三次肝移植未再发现BCS存在。结论BCS大多可通过纤维胆道镜取BC和后续的支撑管支撑治疗而解除梗阻症状，明显改善BCS病人的生活质量，降低BCS的再次移植率。BC合并肝内外胆管弥漫坏死者应尽早再次移植。     

Caveolin-1在脂多糖致大鼠肺微血管内皮细胞损伤中作用的初探

目的 观察脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对大鼠肺微血管内皮细胞(rat pulmonary microvascular endothelial cell,RPMVEC)小窝蛋白-1(caveolin-1,Cav-1)表达的影响.方法 体外培养RPMVEC,分别采用RT-PCR、原位杂交及免疫荧光检测Cav-1 mRNA及蛋白的表达,原位杂交检测LPS和蛋白激酶C(PKC)抑制剂双吲哚基顺丁烯二酰亚胺(bis-indolylmaleimide,BIM)对Cav-1 mRNA表达的影响.结果 RT-PCR和原位杂交同步检测出RPMVEC表达Cav-1基因;免疫荧光检测出RPMVEC表达Cav-1蛋白;LPS以浓度依赖方式诱导Car-1 mRNA表达增加:0.1、1、10 mg/L LPS分别孵育RPMVEC 6 h后,Cav-1 mRNA表达量随其浓度增加逐渐升高,与正常组比较差异均有统计学意义(P＜0.05);10mg/LLPS刺激RPMVEC不同时间(1h、2h、3h、6 h)后,RPMVEC中Cav-1 mRNA表达水平呈动态变化:1 h开始上升,2h达峰值,之后逐渐下降,但至6h仍高于正常水平(P＜0.05);10 μmol/L BIM预孵育RPMVEC 1 h后,可显著下调10 mg/L LPS对Cav-1 mRNA表达的诱导效应(P＜0.05).结论 RPMVEC表达Cav-1,LPS上调RPMVEC Cav-1基因转录,PKC信号通路参与LPS对RPMVEC Cav-1基因转录的调控.