丙型肝炎病毒抗体检测试剂在高危人群中的应用评价

目的 对研制的丙型肝炎病毒（HCV）抗体检测试剂（双抗原夹心法）在高危人群中的应用进行评价,并与间接法进行比较。方法 收集河北省固安县丙型肝炎高发地区A村38份、B村47份,共85份样品,采用研制的抗-HCV检测试剂（双抗原夹心法）及间接法同时测定样品抗-HCV,对检测结果不符的样品用HCV-RIBA补充试剂进行确认。结果 85份样品中,间接法检测阳性76份（89．41％）,阴性9份;双抗原夹心法检出阳性73份（85．88％）,阴性12份。有3份间接法检测弱阳性,而双抗原夹心法检测为阴性,经HCV-RIBA补充试剂确认2份为阴性,1份仅1条带阳性,再经病毒核酸定量检测为（1．2～4．8）×10^2copies／ml,HCVRNA测定为阴性。结论 研制的双抗原夹心法抗-HCV检测试剂的灵敏度与间接法相同,特异性优于间接法。     

血清转换样本丙型肝炎病毒核酸、核心抗原及抗体检测对比研究

目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)核心抗原酶联免疫诊断试剂检测早期HCV感染“窗口期”样本的可行性。方法用新研制的丙型肝炎病毒核心抗原(HCV-cAg)酶联免疫诊断试剂检测11份系列血浆转换样本的抗-HCV、HCV-cAg、HCV RNA,并与病毒核酸及抗体检测方法做对比研究。结果HCV-cAg较抗-HCV检出提前14~51d,平均32.7d;HCV RNA较抗-HCV检出提前19~51d,平均36.0d。结论HCV-cAg酶联免疫诊断试剂可用于HCV早期感染“窗口期”样本的检测,降低输血风险度。     

HIV－1整合酶蛋白(p31)的表达、纯化及其在血清学诊断中的应用

在大肠杆菌中，利用pET－3c表达载体，高效表达了具有全长序列的HIV－1整合酶蛋白（p31）。表达产物主要以包涵体的形式存在，用1mo1/LNaCl溶解包涵体可部分地溶解p31蛋白，溶解上清中p31蛋白具有很高的纯度。本文进一步描述了一种在变性条件下重组蛋白的纯化方法，即将包涵体用8mol/L尿素溶解，先后经过S－Sepharose Fast Flow与Sephacryl-300柱层析，可将重组产物纯化到电泳纯。纯化蛋白以1μg/ml包被ELISA板，分析正常人及HIV－1阳性个体的血清，结果重组p31与检测的所有41份阳性血清均可发生特异反应，而与36份正常血清则不起反应，表明纯化的重组蛋白可用于检测血清中的抗HIV－1抗体。     

用单克隆抗体进一步探讨人和猪的SRBC受体

<正> 在前文中,我们采用常规方法制备的抗人或猪SRBC受体的抗血清,比较了人和猪SRBC受体的免疫学活性和PAGE图谱,发现两者性质极为相似。这一现象后来也为郑德先证实。两种受体究竟是否确实相似,相似程度又如何,以相应的单克隆抗体研究,应能得到进一步的了解。本文报道用中国医学科学院基础医学研究所免疫室赵玉兰赠予的抗猪SRBC受体单克隆抗体(腹水)和OKT 11(Ortho PharmaceuticalCorp.)分别对人和猪外周血淋巴细胞和胸腺细胞进行E-玫瑰花抑制试验和间接免疫荧光法染色并比较两者的异同。     

高效原核融合表达载体（pBVIL1）的构建及在HCV抗原表达中的应用

在对作为试剂抗原的研究中,为尽量减少抗原中无关片段可能引起的非特异性反应,常需采用以特异性抗原表位为主的小分子肽。但有时为了增加抗原的覆盖面以提高检测的灵敏度,又需用含有多个抗原表位的融合抗原〔１,２〕。用人工合成肽成本较高,且肽与肽间的化学连接难以达到定向和得到稳定的产物。若能进行小分子肽基因的重组表达,并进而将其相互连接融合表达最为理想。为实现上述目的,我们构建了表达载体pBVIL１。此载体是我们在以前克隆的表达质粒〔３〕pBV２２０／IL－１β的基础上而构建的。即在相当原质粒中的IL－１β基因中,…     

基于结核分枝杆菌多表位抗原的诊断试剂研制及临床评价

目的:基于结核分枝杆菌多表位抗原研制的新型结核免疫诊断试剂进行临床评价,评价其灵敏度和特异性,探讨其应用价值。方法:采用建立的间接ELISA方法,分别检测结核病和肺部其他疾病及健康人群血清样品。结果:508份肺结核患者样品中,检出阳性433份,灵敏度85.23%(433/508),健康人523份中,检出阳性49份,特异性90.63%(49/523)。结论:研制的新型的结核抗体免疫诊断试剂灵敏度高,特异性强,可用于结核感染的大规模筛查试验。     

抗HCV国家参考品及高质量丙肝诊断试剂的研究

丙型肝炎病毒(HCV)于1989年刚刚被发现,它的基因为一条正链RNA分子,在我国人群中的感染率为3.2％。丙型肝炎通过血液传播,慢性化率很高,目前尚无预防疫苗,也无特效治疗药物。阻断其传播的最有效途径为用丙肝试剂筛查供血员和血液制品,为诊断丙型肝炎则需要进行基因检测和对初筛结果进行确证。     

多型别HCV-E1复合表位抗原研究

目的 设计多型别HCV-E1表位复合免疫原,通过免疫小鼠,探讨其在丙型肝炎治疗性疫苗与诊断试剂研究中的应用.方法 分析比较HCV-E1包膜糖蛋白B细胞表位序列,选取几个代表性基因型的中和性优势抗原表位,再结合泛DR辅助性T细胞表位(PADRE),构建含有不同HCV型别E1表位抗原基因和通用T辅助细胞表位基因的原核表达质粒.结果 成功构建了含有HCV 1a、1b、2a、3a、4a和6a等基因型E1中和性表位以及通用T辅助细胞表位的质粒pBVIL1/E1s-PADRE,该质粒转化大肠杆菌后获得的工程菌,通过诱导培养可以高效表达重组多型别HCV-E1表位复合抗原,所获得的多型别HCV-E1表位复合免疫原可在BALB/c小鼠体内诱发强烈的体液免疫反应,ELISA检测抗体水平可达到1:12 800.结论 新构建的HCV-E1表位复合免疫原具有很好的免疫原性,为进一步研究HCV疫苗奠定了基础.