荧光原位杂交和常规细胞遗传学在慢性粒细胞白血病研究中的应用

目的：应用荧光原位杂交（FISH）和染色体核型分析技术,探讨慢性粒细胞白血病（CML）细胞遗传学特点与临床预后的相关性。方法：采用骨髓细胞直接法和（或）短期培养法制备染色体标本,采用热变性姬姆萨显带技术（RHG）进行染色体核型分析。荧光染色体原位杂交技术检测40例CML患者的BCR／ABL融合基因。回顾分析282例CML的临床及细胞遗传学资料。结果：常规细胞遗传学（CC）分析表明,282例患者中268例Ph染色体阳性,占95．04％;14例Ph染色体阴性,占4．96％。其中250例Ph阳性细胞为100％,占90．32％。12例Ph阳性细胞为30％～99％,占4．48％,核型显示正常与Ph嵌合状态。6例核型为复杂变异异位,占2．24％。41倒除Ph染色体外,还出现额外染色体异常,占15．30％,分别为双Ph,＋8,＋22,-Y,i（17q）等,其中28例为加速或急变患者,占68．29％。应用FISH技术检测,BCR／ABL融合基因阳性34例（舍14例Ph染色体阴性中的8例）,占85％;BCR／ABL阴性6例,占15％。结论：在常规细胞遗传学分析的基础上,选用分子遗传学FISH技术可以明显提高染色体异常的检出率及准确率。细胞遗传学对于CML的正确诊断、指导临床治疗、判断预后具有重要价值。     

内科学中血液系统疾病的教学体会

<正>血液病学是内科学的重要组成部分,也是一门专科性较强的临床学科,其疾病分类详细,内容丰富但较抽象。近年来血液病发病率呈逐年上升趋势,血液病学逐渐受到各级医院的重视,这也对医学院校的血液病学临床教学提出了更高的要求。因此,在医学生进入临床工作之前,就要激发他们对血液系统疾病学习和认识的兴趣,热爱血液病学临床工作,甚     

慢性淋巴细胞白血病患者的临床和分子遗传学研究

目的：探讨荧光原位杂交技术（fluorescence in situ hybridization,FISH）在检测慢性淋巴细胞白血病（chronic lymphocytic leukemia,CLL）中的应用及与患者临床指标和特征的相关性,并分析其判断患者预后的价值。方法：收集2013年6月—2020年10月初诊于南通大学附属医院CLL患者74例,男43例,女31例。收集患者相关的临床特征、实验室检查、骨髓涂片、免疫分型及FISH结果等资料。分析FISH检测的分子遗传学异常与患者的性别、年龄、临床Binet分期、Rai分期及相关实验室检查［如外周血淋巴细胞绝对值计数、血红蛋白、血小板、β2?微球蛋白（β2?microglobulin,β2?MG）、乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）水平］的相关性。结果：①CLL患者FISH检测至少具有1种分子遗传学异常者为56例,发生率为75.68%。②各种遗传学异常情况与患者性别、年龄无相关性（P > 0.05）,与外周血淋巴细胞绝对值计数、血红蛋白、血小板、β2?MG、LDH的表达水平无明显相关性（P > 0.05）。③就Binet分期而言,12号染色体三体（+12）仅在B期和C期患者中检出,在Binet分期中的分布差异具有统计学意义（χ2=4.696,P=0.041）;C期的生存时间明显短于A和B期（χ2=14.242,P=0.001）。就改良的Rai分期而言,ATM基因缺失仅在高危组检出,且此种分布差异具有统计学意义（χ2=5.40,P < 0.001）;低中危组的生存时间明显优于高危组（χ2=12.393,P < 0.001）;单纯del（13q）核型异常的CLL患者生存时间明显长于伴有其他核型异常及复杂核型的患者（χ2=8.138,P=0.017）。结论：CLL为惰性疾病,但其疾病进展和临床预后具有高度异质性。FISH检测结果联合疾病临床分期可更好地预测患者预后。     

地西他滨联合曲古抑菌素A对MDS细胞株SKM-1作用的体外研究

本研究探讨去甲基化制剂地西他滨（decitabine）和（或）组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A（TSA）对MDS—RAEB细胞株SKM—1的影响及作用机制．用台盼蓝拒染法研究药物对SKM—1细胞生长曲线的影响；用四氮唑蓝还原试验和流式细胞术观察药物对SKM—1细胞分化作用；用Annexin V—FITC标记药物作用后的细胞，了解其早期凋亡的情况；用RT—PCR研究药物作用前后细胞Fas，survivin和P15^INK4B。基因表达的变化。结果表明：decitabine和（或）TSA对SKM—1细胞生长有抑制作用，能促进SKM—1细胞分化，细胞表面CD14、CD11b表达增加，HLA—DR表达减少；decitabine和（或）TSA处理SKM—1细胞后，SKM—1细胞凋亡增加，细胞Fas和P15^INK4B mRNA表达增加，survivin mRNA表达减少。结论：decitabine和TSA均可以促进SKM—1细胞凋亡和分化，可能与Fas、P15^INK4B和survivin基因表达有关，二者联用有协同作用。     

专栏——分子生物学技术——环氧合酶2-1195G〉A基因多态性和肿瘤风险的meta分析

目的对环氧合酶2与肿瘤的关系做出更为准确的结论。方法通过检索相关文献,共收集了25个病例对照研究结果,包含9482例肿瘤患者,12206位正常个体。通过对以往的研究结果进行meta分析,使用OR值和95％可信区间（cI）衡量基因与肿瘤的关联强度。结果突变的基因型可以增加肿瘤的发病风险（AA／AGVSGG,OR=1．15,95％CI：1．02～1-31）。按照种群分层显示：突变的基因型增加亚洲人群的发病（AA／AGVSGG,OR=1．28,95％CI：1．12～1．46）。根据肿瘤类型分层,除了在食道癌和“其他”分组中之外,并未发现基因突变与肿瘤之间存在相关性。结论环氧合酶2—1195G〉A突变可能是肿瘤发生的潜在风险因素。     

OGG1 Ser326Cys多态性与结直肠癌发病风险的meta分析

目的对OGG1 Ser326Cys多态性与结直肠癌的关系做出更为准确的结论。方法通过对12篇文章采用meta分析评估OGG1 Ser326Cys多态性与结直肠癌发病率的关系。用合并比值比（OR）描述显性模型（Cys／CysvsSer／Ser;Ser／CysVSSer／Ser）,主导模型（SedCys＋Cys／CysvsSer／Ser）,隐性模型（Cys／CysVSSer／Cys＋Ser／Ser）。结果Cys／CysVSSer／Ser（OR=1．19,95％可信区间（CI）：0．92～1．53）、Ser／CysV8Ser／Ser（OR=1．04,95％CI=0．95-1．13）、SedCys＋Cys／CysVSSer／Ser（OR=1．06,95％CI=0．98～1．16）和Cys／CysVSSer／Cys＋Ser／Ser（OR=1．11．95％CI=0．90-1．38）无明显联系,此外,在分层分析中,所有基因型未见明显发病风险差异。结论meta分析表明OGG1 Ser326Cys多态性与结直肠癌总发病率无联系。     

再生障碍性贫血患者的血清抑制造血活性和诱导凋亡活性及逆转对策

目的探讨再生障碍性贫血（再障）患者血清抑制造血活性和诱导凋亡活性及其逆转对策。方法应用甲基纤维素体外培养法、电镜、流式细胞术观察39例再障患者血清体外抑制正常人骨髓造血祖细胞增殖及促进正常人造血细胞凋亡的作用,并用不同浓度的造血细胞因子组合影响患者血清抑制造血活性和诱导凋亡活性。结果12例重型再障（SAA）和27例非重型再障（NSAA）患者血清在体外均可明显抑制正常人骨髓红系祖细胞和粒一单系祖细胞的增殖,患者血清作用后的集落细胞中有较多细胞呈现凋亡形态学改变,凋亡率明显高于对照组。SAA患者血清集落形成抑制活性和诱导凋亡活性均强于NSAA患者血清;培养体系中加入一定浓度的造血细胞因子,集落细胞产率可不同程度的恢复,集落细胞的凋亡率可不同程度的降低。结论再障患者血清具有抑制造血活性和诱导造血细胞凋亡活性,造血细胞因子可不同程度地减弱其两种活性。     

再生障碍性贫血患者血清对脐血CD34~+细胞凋亡的影响

多项研究证实,再生障碍性贫血(AA)患者骨髓造血干细胞的数量减少与其过度凋亡有关,我们在过去的研究中曾证实,AA患者血清可诱导CD34~+细胞凋亡~([1]).Akt,又称蛋白激酶B(PKB),与多种细胞活动、物质代谢调节,尤其是与抑制细胞凋亡、促进细胞生存有密切关系~([2]),而Akt磷酸化后被激活是其发挥各种生物效应的重要前提.