离体大鼠心肌内质网应激模型构建条件的优化

目的： 探讨构建体外心肌内质网应激endoplasmic reticulum stress (ERS)模型的方法及实验条件。方法：应用Langendorrf 灌流装置制作大鼠心脏离体缺血/再灌注模型,采用PowerLab系统持续监测血流动力学参数,western-blot检测缺血（停止灌流）不同时间/再灌注120min后心肌ERS标志性分子糖调节蛋白（GRP）78的表达,并检测C/EBP同源蛋白(CHOP)的表达;逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测二者mRNA的表达;体外孵育心肌组织切片,分别应用不同浓度的衣霉素(tunicamycin, Tm)和二硫苏糖醇(Dithiothreitol,DTT)处理3h和6h,western-blot检测心肌GRP78及CHOP的表达。结果：与对照组相比,离体灌注心脏缺血40min /再灌注120min时,心肌GRP78表达最高（P <0.01）,CHOP蛋白、GRP78mRNA及CHOPmRNA表达均明显升高（P <0.01,P <0.05和P <0.05）同时,各项血流动力学参数受损（均P < 0.01）;Tm10μg/mL和DTT 2mmol/L孵育心肌组织切片3h时,GRP78表达较对照组显著升高（均P <0.001）,CHOP表达亦均明显升高（P <0.05和P <0.01）。结论：使用离体大鼠心脏缺血/再灌注和孵育心肌组织切片的方法,均可成功构建体外心肌ERS模型。     

超声造影引导下微波凝固治疗猪肾闭合性裂伤实验研究

目的 探讨超声造影引导下经皮微波凝固治疗猪肾闭合性裂伤的可行性及有效性.方法 活体小香猪6头,分别造成肾裂伤动物模型.微波治疗组5头,左右双肾各1个共10个出血灶.超声造影实时引导下对出血灶进行微波凝固治疗,选择功率50 W和60 W各凝固5个,作用时间为10 min.另1头猪单侧肾裂伤后,采用保守治疗作为对照.结果 超声造影定位准确,病理显示凝固灶均成功覆盖肾裂伤处.微波对肾裂伤凝固止血效果好,微波凝固治疗组术后出血得到有效控制,体征平稳.60 W组较50 W组凝固灶长径与宽径均明显增加(P＜0.05),长径增幅略大于宽径.结论 超声造影定位肾裂伤准确性高,微波凝固治疗可以成功凝固猪肾裂伤出血灶,效果确定,为今后临床应用于各种外伤性肾出血提供了动物实验信息.     

289株重症监护病房鲍曼不动杆菌耐药性分析

目的了解医院重症监护病房（ICU）鲍曼不动杆菌（ABA）对常用抗菌药物的耐药性,及耐药性的变化情况。方法采用纸片扩散（K-B）法检测本院ICU2008～2010年临床分离的289株鲍曼不动杆菌对11种抗菌药物的耐药性。结果 3年中11种抗菌药物中,头孢哌酮/舒巴坦和亚胺培南的耐药率分别从2008年的40.0%和46.7%上升到2010年的64.3%和82.6%。结论 ICU分离的ABA耐药性较高且呈上升趋势。     

冷循环微波消融脾组织的实验研究

目的:通过研究冷循环微波对猪淤血性肿大脾的消融作用,探讨猪脾组织微波消融的功率条件及安全性,为临床应用微波消融治疗脾肿大、脾亢、脾破裂提供实验依据.方法:6头小香猪建立淤血性脾肿大的动物模型.2450MHz冷循环微波电极行脾消融18个点,能量输出设为60W/600s、70W/600s、80W/600s三组,并测温;消融时观察脾局部的改变,消融后实测凝固区的长径、宽径,并计算体积.结果:冷循环微波在不同能量条件下消融灶的形态均为椭圆形,脾凝固区呈红褐色,表面干燥皱缩;出针后针道无活动性出血,由消融中心向外周依次分别为中央凝固性坏死灶、周围血栓性梗死灶和热能沉积导致血管、脾窦内皮受损累及整个脾脏.不同区域病理表现各异.实验中分别统计了不同能量状态下消融范围(最大长径、宽径和体积)和微波电极周围温度变化.结论:2450MHz冷循环微波电极高功率脾消融是安全的,该技术可在猪脾组织形成椭圆形消融坏死区,消融体积可随能量提高而增大.     

野黄芩苷诱导肿瘤细胞凋亡作用机制的研究进展

野黄芩苷可以改善心脑血管疾病患者的临床症状,而且具有提高机体免疫功能、抗炎、抗微生物和抗肿瘤等作用.本文就野黄芩苷诱导肿瘤细胞凋亡的可能机制作一综述.     

大鼠肾脏5/6切除microRN-483-3p的表达变化及机制

【摘要】 目的 探讨慢性肾脏疾病中microRNA-483-3p及其相关靶基因表达情况,明确过表达miR-483-3p的治疗效果。方法 大鼠分为对照组（假手术组,12只）,模型组（5/6肾切除组,12只）,miR-483-3p过表达组（5/6肾切除+ miR 483 3p Agomir,12只）3组。miR-483-3p Agomir给予60mg/kg尾静脉注射,每两周一次。末次术后8周处死大鼠。测定血生化指标,使用ELISA方法测血清中hs-CRP及24小时尿蛋白含量;采用RT-PCR方法进一步筛查出miR-483-3p的下游靶基因;用RT-PCR和Western Blot方法测定三组大鼠肾组织中miR-483-3p及其靶基因表达变化。同时RT-PCR方法测定miR-483-3p宿主基因TGF-2的表达变化。结果 与对照组相比,模型组BUN、Cr明显升高, TC及LDL-C亦显著升高。干预组较模型组BUN、Cr明显降低,血脂水平治疗前后无明显变化。hs-CRP及24小时尿蛋白定量在模型组明显升高,干预组显著降低。RT-PCR结果显示与对照组相比,模型组肾脏组织中CTGF和EGFR/PTEN表达显著升高,而TGF-β、DPC4/Smad4及AANAT无明显变化。干预组较模型组表达显著降低。模型组较对照组肾脏组织中IGF-2的表达明显升高,干预组肾脏组织IGF-2的表达较模型组表达显著降低。结论 慢性肾脏疾病,miR-483-3p表达增加,通过抑制其靶基因CTGF、PTEN的表达,可延缓肾脏纤维化过程。     

白细胞介素-18与多种病的关系

白细胞介素-18(IL-18)是具有多种生物学功能的新型细胞因子.它主要由上皮细胞、巨噬细胞、树突状细胞、成纤维细胞分泌.它能够强烈诱导γ干扰素的产生,增强Th1型免疫反应,促进自然杀伤细胞的活化,增强Fas介导的细胞毒作用,使其具有免疫调节,抗感染等生物学效应.随着对IL-18的深入研究,发现它与人类许多疾病密切相关,本文将对其发展情况做一综述.     

野黄芩苷对人脑胶质瘤U87细胞的增殖抑制作用及其机制

目的：探讨野黄芩苷（SCU）对人脑胶质瘤U87细胞的增殖抑制作用,并初步阐明其作用机制。方法：培养U87细胞,采用不同浓度（20、40和80 mg·L^-1） SCU处理U87细胞（野黄芩苷组）,同时设空白对照组。MTT法检测各组U87细胞存活率,倒置显微镜观察U87细胞的形态表现,Annexin Ⅴ/PI双染检测各组U87细胞凋亡率,Western blotting法检测各组U87细胞中bax和bcl-2蛋白表达水平。结果：MTT法,与空白对照组比较,20、40和80 mg·L^-1SCU组细胞存活率均明显降低（P<0.01）。倒置显微镜观察,与空白对照组比较,80 mg·L^-1SCU组细胞数明显减少,细胞体积变小,细胞间距变大;细胞出现皱缩、脱落,贴壁细胞轮廓模糊。Annexin Ⅴ/PI双染,与空白对照组比较,80 mg·L^-1SCU组细胞晚期凋亡率和总凋亡率均明显升高（P<0.01）。Western blotting法,与空白对照组比较,20、40和80 mg·L^-1 SCU组U87细胞中bcl-2蛋白水平降低,80 mg·L^-1SCU组差异有统计学意义（P<0.01）;与空白对照组比较,80 mg·L^-1 SCU组U87细胞中bax/bcl-2比值升高（P<0.01）。结论：SCU通过上调U87细胞中bax/bcl-2比值诱导细胞凋亡从而抑制肿瘤细胞的生长。     

基于超声引导下粗针活检全外显子测序技术鉴定甲状腺癌致病基因

目的 利用超声引导下粗针活检全外显子测序(WES)技术筛选甲状腺癌的致病基因以及其涉及的分子机制。方法 收集行超声引导下粗针活检的41例甲状腺癌组织样本,对其进行全外显子测序。接着筛选甲状腺癌致病基因,并对其进行富集分析。结果 共发现了81 536个变异位点,其中70 861个单核苷酸多态性(SNP),10 675个插入缺失标记(Indel)。突变频率TOP 10的基因包括MUC3A、GPRIN2、MUC6、CCDC187、OR9G1;OR9G9、HMCN2、MAP2K3、HLA-B、OR8G2P、PLIN4。另外,在41个样本中均发生变异的这90个基因主要富集的基因本体论(GO)terms包括组成型异染色质形成、高尔基体内腔、细胞外基质结构成分等,富集到的京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路包括细胞衰老、EB病毒感染、EGFR酪氨酸激酶抑制剂耐药性等。结论 筛选了90个甲状腺癌致病基因,且这些基因可能主要通过细胞衰老、EB病毒感染、EGFR酪氨酸激酶抑制剂耐药性等信号通路在甲状腺癌的发展中起作用。