VEGF165的载体构建、表达及其生物学活性

目的:构建血管内皮生长因子(VEGF)165原核表达载体,在大肠杆菌中表达,获得重组VEGF165,并通过细胞和鸡胚尿囊膜试验鉴定其生物学活性.方法: 本实验室保存的T-VEGF165质粒,经BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切,将其克隆至原核表达载体pET28a( )中,获得含人VEGF165全序列基因的表达载体pET28a( )-VEGF165,将其转化至大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达,对表达产物进行纯化,获得VEGF165蛋白.通过体外促进HUVEC细胞增殖及鸡胚尿囊膜血管增生实验鉴定其生物学活性.结果:成功构建了VEGF165蛋白的原核表达载体,表达纯化了VEGF165蛋白,经过细胞增殖试验及鸡胚尿囊膜血管增生实验,证明该蛋白具有良好的促进血管内皮细胞增殖的生物学活性.结论:成功地获得了人VEGF165重组蛋白,并证实了该蛋白具有促进血管内皮细胞增殖活性.     

心钠素基因多态性与缺血性脑卒中发生的相关性

近年来，关于缺血性脑卒中的相关基因的研究很多，如肾素血管紧张素基因、凝血／纤溶基因、血小板膜受体基因、心钠素基因等等。有研究报道，从大鼠的动物实验开始到人群的对照研究，论述了心钠素基因的多态性和缺血性脑卒中发生的相关关系。对G664A、G1837A和T2238C研究结果表明，不同人群中，心钠素基因位点的突变与脑卒中发生的关系不同。本研究拟对缺血性脑卒中患者和非缺血性脑卒中人群的心钠素基因含G1837A和T2238C位点的基因片段进行多态性分析，探讨其与我国人群缺血性脑卒中发生的相关性。     

滋阴化痰方通过调控外泌体对小鼠胃癌的干预作用

目的:观察滋阴化痰方调控外泌体对小鼠胃癌皮下瘤的干预作用。方法:取对数生长期的第4代人胃癌细胞株MGC-803细胞,按随机数字表法分为外泌体对照组和低、高剂量组,低、高剂量组分别加入25、100 μg/ml的滋阴化痰方进行干预,48 h后提取各组MGC-803细胞分泌的外泌体。将20只BALB/c雄性小鼠按随机数字表法...     

大肠癌血瘀证与非血瘀证患者肿瘤组织血管新生标记物、HIF-1α和VEGF表达的差异性

目的通过检测大肠癌血瘀证与非血瘀证患者肿瘤组织的血管新生标记物、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达情况,分析大肠癌血瘀证与肿瘤血管新生之间的关系。方法将116例(均为回顾性病例)临床大肠癌患者分为血瘀证组与非血瘀证组,采用免疫组织化学技术检测肿瘤组织中的血管新生肿瘤标记和HIF-1α和VEGF的阳性表达情况,结合临床分期分析大肠癌血瘀证与非血瘀证患者上述指标表达的差异性。结果①大肠癌血瘀证与非血瘀证患者的临床分期以Ⅱa期和Ⅲb期为主,差异无统计学意义(P0.05);②大肠癌血瘀证与非血瘀证患者肿瘤组织血管CD34的阳性表达差异有统计学意义(P0.001),CK-7、CK-20、CEA、CDX-2、p53、Ki-67、神经S-100、淋巴管D2-40的阳性表达差异无统计学意义(P0.05);③大肠癌血瘀证患者肿瘤组织HIF-1α和VEGF的阳性表达高于大肠癌非血瘀证患者(P0.001)。结论大肠癌血瘀证患者肿瘤血管CD34、HIF-1α和VEGF的阳性表达明显高于非血瘀证患者,提示大肠癌血瘀证与肿瘤血管新生密切相关。     

缬沙坦联合依那普利治疗充血性心力衰竭的临床研究

目的探讨依那普利、缬沙坦二者联合治疗对充血性心力衰竭(CHF)的疗效及其对肾素、血管紧张素及醛固酮系统(RAAS)的影响。方法将48例心力衰竭患者按照纽约心脏病协会分级(NYHA-FC)心功能Ⅱ~Ⅳ级,随机分为对照组(22例),予依那普利5mg,每日2次;治疗组(26例),予缬沙坦80mg,每日1次和依那普利5mg,每日2次;治疗约4个月;观察治疗前后的左室功能、血浆肾素活性(PRA)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及醛固酮(ALD)水平的变化。结果两组病人治疗后心功能(NYHA分级)均有改善;两组治疗前后相比,左室射血分数(LVEF)值均显著提高(P<0.01),左室舒张末期内径(LVIDd)缩短(P<0.01);治疗组较对照组LVEF,LVIDd改善更显著;对照组治疗后PRA、AngⅡ、ALD水平无变化,治疗组AngⅡ水平升高(P<0.05),ALD水平降低(P<0.01);两组患者治疗后血尿素氮、肌酐水平均无显著变化。结论缬沙坦和依那普利联合治疗无论从改善左室功能及抑制左室重构均优于单独用药。     

苦黄注射液治疗黄疸型病毒性肝炎32例的疗效观察

苦黄注射液是治疗黄疽型病毒性肝炎的国家级新药、我院于1993－03～05应用江苏常熟制药厂生产的苦黄注射液治疗32例黄胆型病毒性肝炎，取得满意疗效。1材料与方法1．1研究对象：选自1993－03～05住院患者。根据1990－05上海第六届全国病毒性肝炎会议讨论修订诊断标准确诊的急性     

MALAT1、COX-2、β-catenin、MMP-3、MMP-9等基因在结直肠癌发生发展中的意义

 目的 探讨人肺腺癌转移相关转录因子1（MALAT1）、环氧合酶-2（COX-2）、β-连环素（β-catenin）、基质金属蛋白酶（MMP）-3、MMP-9等基因在结直肠癌发生发展中的意义。 方法 收集新鲜结直肠癌组织标本及其对应癌旁组织标本各30例,采用实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）方法检测MALAT1、COX-2、β-catenin、MMP-3、MMP-9的mRNA表达水平,并与患者性别、年龄、癌胚抗原(CEA)、细胞免疫因子（CD4和CD8）、临床分期、肿瘤侵袭转移程度等进行相关性分析。 结果 MALAT1、COX-2、β-catenin、MMP-9在癌组织和癌旁组织中的表达差异均有统计学意义（P<0.05）,MMP-3则无统计学意义（P>0.05）。MALAT1、COX-2、MMP-9和β-catenin在癌组织中的表达量分别是癌旁组织表达量的2.22倍、1.86倍、2.16倍、0.58倍 (P<0.01)。MALAT1（癌/癌旁）的表达差异与β-catenin（癌/癌旁）的表达差异呈负相关（r＝-0.346,P=0.030）,MMP-9（癌/癌旁）的表达差异与β-catenin（癌/癌旁）的表达差异则呈正相关(r=0.312,P=0.047)。COX-2（癌/癌旁）与MMP-9（癌/癌旁）在男女患者之间的差异均有统计学意义（P=0.047;P=0.018）;COX-2（癌/癌旁）在CEA上升与未见改变的患者之间的差异也有统计学意义（P=0.021）。结论 MALAT1、COX-2、MMP-9、β-catenin在结直肠癌的发生发展中有重要意义,而MMP-3无重要参考价值;MALAT1和β-catenin的负相关性及MMP-9和β-catenin的正相关性说明其在结直肠癌的发生发展中存在一定的相互作用关系;COX-2（癌/癌旁）和MMP-9（癌/癌旁）在男女患者中的差异提示二者影响男女患结直肠癌的概率;检测COX-2可在一定程度上辅助肿瘤标志物CEA对结直肠癌的诊断。     

急性散发性病毒性肝炎120例

急性散发性病毒性肝炎１２０例上海市南汇县传染病医院（２０１３００）陈晓玲，季青，朱根娣我院自１９９３年６月～１９９４年６月共收治急性散发性病毒性肝炎５０８例，其中病毒血清学阳性者３９６例，小儿１２０例，占３０．３％。现将小儿病例分析如下。临床资料１２...     

免疫滴金技术检测肾综合征出血热特异性抗体的研究

[目的 ]　为探索一种更为简便、快速、特异、灵敏的肾综合征出血热 (HFRS)抗体的检测方法。　 [方法 ]　45 8例HFRS病人血清同时采用免疫滴金法 (CGIDA)与酶联免疫吸附法 (ELISA)对比检测特异性免疫球蛋M抗体 (抗HFRS -IgM )、间接免疫荧光法 (IFAT)对比检测特异性免疫球蛋G抗体 (抗HFRS -IgG) ,并以 2 0例发热待查、48例病毒性肝炎血清作对照。对 15 2例肾综合征出血热病人作肝功能检查。　 [结果 ]　 45 8例HFRS病人血清 ,以CGIDA法检测抗HFRS -IgM ,阳性 3 5 8例 ,与ELISA法作结果评价时 ,CGIDA灵敏度 79.9% ,特异度 10 0 % ;以CGIDA法检测抗HFRS-IgG ,阳性 3 86例 ,与IFAT法作结果评价时 ,CGIDA灵敏度 91.5 % ,特异度 10 0 %。 15 2例肝功能检查发现 86例ALT升高 ,占 5 6.6% ,胆红素升高者 3 3例 ,占 2 8.3 %。　 [结论 ]　CGIDA法检测HFRS特异性抗体分别与ELISA法及IFAT法对照 ,均有简便、快速、特异、灵敏之优点 ,检测抗HFRS -IgM ,CGIDA法敏感性差于ELISA法 ,但特异性较高 ;检测抗HFRS -IgG ,CGIDA法的灵敏度高于IFAT法。肝功能检查表明 ,肾综合征出血热并发肝损害发生率较高 ,临床表现轻 ,大多在多尿期恢复正常