造血干细胞衰老机制研究

造血干细胞(hematopoietic stem cell,HSC)具有自我更新功能和生成多个系列免疫造血细胞的多分化功能,终生维持机体造血。证据显示HSC会出现衰老,并与机体老龄化及各种损伤情况下出现造血系统应激能力下降有关。DNA损伤反应在诱导HSC衰老的各种机制中起重要作用。HSC发生衰老的机制的研究将对降低放化疗毒副作用,保护辐射等环境因素的损伤,了解白血病的干细胞起源及治疗逃逸机制提供有价值的科研资料,为药物筛选的靶点提供试验依据。     

白细胞介素6基因敲除对阿尔茨海默病5×FAD模型小鼠β淀粉样蛋白沉积和认知的影响

目的 探讨白细胞介素6(IL-6)基因敲除对阿尔茨海默病5×FAD转基因小鼠认知及脑组织病理变化的影响。方法 IL-6^+/-小鼠与5×FAD小鼠杂交,构建5×FAD;IL-6^-/-小鼠模型,并选用3、10月龄子代小鼠进行实验。采用行为学实验对小鼠的认知记忆功能进行分析;采用HE染色和β淀粉样蛋白(Aβ)免疫组织化学染色检测小鼠脑组织病理变化。结果 得到5×FAD;IL-6^-/-模型小鼠(3月龄n=20,10月龄n=5)及5×FAD同窝对照小鼠(3月龄n=26,10月龄n=24),子代小鼠数量符合孟德尔定律。新物体识别实验结果显示,与同月龄5×FAD小鼠相比,3月龄5×FAD;IL-6^-/-小鼠的探索指数显著升高,差异有统计学意义(q=3.890,P=0.002)。Morris水迷宫空间探索结果显示,与同月龄5×FAD小鼠相比,3月龄5×FAD;IL-6^-/-小鼠目标象限停留时间及穿台次数增加,差异有统计学意义(q=3.797,P=0.012;q=2.505,P=0.017)。免疫组织化学染色结果显示,IL-6基因敲除显著减少3、10月龄5×FAD小鼠海马(q=13.490,P=0.002;q=45.680,P<0.001)及皮层(q=16.830,P=0.001;q=14.180,P=0.001)的Aβ沉积,差异有统计学意义。结论 IL-6基因敲除可明显改善阿尔茨海默病5×FAD模型小鼠的空间记忆能力,减少小鼠大脑Aβ沉积。     

大剂量γ射线对小鼠造血功能损伤的比较研究

目的探讨大剂量电离辐射对IRM-2小鼠、C57BL/6 J小鼠造血功能损伤及恢复的比较。方法用137Csγ射线分别对IRM-2小鼠、ICR小鼠进行4.0Gy照射,照后9d,检测小鼠造血功能三项(脾指数、CFU-S、DNA)指标的变化;对IRM-2小鼠、C57BL/6 J小鼠进行6.0Gy照射,照后45d,检测小鼠外周血白细胞的变化及绝对值。结果 IRM-2小鼠4.0Gy照射后9 d造血功能三项指标均高于ICR小鼠,CFU-S、DNA差异有统计学意义(P0.001)。6.0Gy照射后45d WBC、RBC及HGB、HCT指标均高于C57BL/6 J小鼠,差异有统计学意义(P0.01)。结论受137Csγ射线大剂量及亚致死剂量照射后,IRM-2小鼠与C57BL/6 J小鼠及ICR小鼠比较,造血系统有较强的恢复功能。     

三种小鼠免疫细胞对辐射敏感性差异的比较

目的 对IRM-2、ICR、615三种小鼠胸腺(Th)、脾(SP)细胞照射后辐射敏感性的差异进行比较,探讨IRM-2小鼠的辐射抗性及免疫学机制。方法 用流式细胞仪检测外周血细胞分型,PA法(FITC-Annexin V和PI标记法)检测Th、SP细胞照射后凋亡率。结果 IRM-2小鼠CD4/CD8比值低于ICR、615小鼠;CD25/CD4高于615小鼠(P<0.05),低于ICR小鼠;SP细胞凋亡率0、1、4Gy低于ICR和615小鼠,差异有统计学意义(P<0.05);Th细胞凋亡率低于ICR和615小鼠,在4Gy照射组低于615小鼠(P<0.01)。结论 IRM-2小鼠的胸腺和脾细胞对辐射不敏感,辐照后Th、SP细胞凋亡率低于ICR和615小鼠。     

E838对环磷酰胺所致小鼠白细胞减少症的防治研究

目的 观察E838对环磷酰胺(Cy)所致IRM-2小鼠白细胞(WBC)减少症和造血功能的影响。方法 实验设对照组、E838低、中、高三个剂量组、阳性对照茜草双酯组,连续5d给药,从第3d注射给予Cy,连续3d,观察外周血白细胞、骨髓有核细胞数、内源性脾结节形成(CFU-S)、脾脏指数及胸腺指数的变化。结果 E838各组的外周血白细胞、骨髓有核细胞数与对照组相比有明显的增高,中、高剂量组与对照组比较,经统计学处理差异有显著性(P<0.01)。CFU-S与对照组比较差异有显著性(P<0.01)。脾脏指数及胸腺指数均高于对照组,高剂量组脾脏指数与对照组比较差异有显著性(P<0.05)。结论 E838有显著改善机体免疫功能和刺激骨髓造血功能的作用,能明显增加小鼠WBC的数量。     

cAMP反应元件结合蛋白在药物依赖形成中的作用

反复应用成瘾性药物引起中枢神经系统特定部位cAMP信号系统出现适应性改变 ,cAMP反应元件结合蛋白(cyclicAMPresponseelementbindingprotein ,CREB)是受cAMP调节的主要转录因子 ,在动物产生药物依赖时脑内CREB含量及磷酸化程度发生变化 ,与动物躯体依赖和精神依赖有关。确定CERB在药物依赖中的作用有益于阐明药物依赖分子机制及采取相应的防治措施     

Cks1表达对人食管癌EC9706细胞辐射敏感性的影响

目的 通过多种转染方法改变人食管癌细胞EC9706中Cks1的表达,探究Cks1的表达对细胞辐射敏感性的影响。方法 通过3种转染方式构建人食管癌EC9706细胞模型,分别为Cks1正义转染组（以亲本组和空载组为对照）、Cks1 RNAi组（以亲本组和阴性对照组为对照）和Rescue组（转染了抗Cks1 RNAi的突变载体,以亲本组和RNAi组作为对照）。Western blot法检测转染后EC9706细胞中Cks1蛋白的表达量;6 Gy γ射线照射转染后的EC9706细胞,MTT法和克隆形成实验检测EC9706辐射敏感性的变化。结果 Western blot检测结果表明,转染成功改变了Cks1的表达量。正义转染实验中,相对于亲本组和空载组,Cks1正义转染组Cks1表达量提高（t=17.10、14.95,P<0.05）;RNA干扰实验中,相对于亲本组和阴性对照组,RNAi组表达量降低（t=3.85、6.37,P<0.05）;Rescue实验中,Rescue组较RNAi组表达量明显回升（t=7.72,P<0.05）,接近亲本组的表达水平（P>0.05）。MTT实验结果表明,6 Gy γ射线照射后,Cks1正义转染组细胞的增殖能力显著高于亲本组（t=3.42、4.74、4.02,P<0.05）和空载组（t=3.39、4.44、4.37,P<0.05）。RNAi组细胞的增殖能力显著低于亲本组（t=7.33、8.27,P<0.05）和阴性对照组（t=6.98、7.34,P<0.05）。Rescue组细胞的增殖能力显著高于RNAi组（t=11.61、9.99,P<0.05）,与亲本组相近（P>0.05）。克隆形成实验结果表明,Cks1正义转染组细胞克隆形成能力显著高于亲本组（t=13.95,P<0.05）和空载组（t=14.72,P<0.05）,RNAi组细胞的克隆形成能力显著低于亲本组（t=20.14,P<0.05）和阴性对照组（t=10.01,P<0.05）,Rescue组细胞的克隆形成能力显著高于RNAi组（t=10.57,P<0.05）,与亲本组相近（P>0.05）。结论 Cks1的表达与食管癌细胞辐射敏感性密切相关,Cks1表达量越高,食管癌细胞辐射敏感性越低。     

p38抑制剂对辐射损伤小鼠中免疫细胞的作用

目的:探讨利用p38抑制剂SB203580(SB)抑制p38通路对6Gy受照小鼠免疫细胞辐射损伤的作用。方法:取雄性C57BL/6小鼠30只,随机分为对照组、照射组和SB组,每组10只。SB组和照射组小鼠接受以6Gy137Csγ射线的全身照射。SB组小鼠照射24h后腹腔注射SB(15mg/kg),每2d1次,共给药5次,其余2组小鼠腹腔注射对照溶液。小鼠受照10d后处死,取外周血计数,流式细胞仪检测CD4、CD8、B220表达,取骨髓细胞测定ROS水平。结果:照射组外周血白细胞(WBC)、CD8、B220细胞比例较对照组明显下降,骨髓ROS水平升高(P<0.01)。SB组外周血CD8比例较照射组上升,骨髓ROS水平下降(P<0.01)。结论:SB对小鼠6Gy照射后造血免疫损伤有一定的缓解作用,其机制可能与其降低照射后骨髓细胞ROS水平有关。     

CEAIgG—A5对食管癌Eca—109细胞株的体内杀伤效应

以癌胚抗原(CEA)抗体(IgG)作为抗癌药物平阳霉素(A_5)的载体,制备CEAIgG-A_5交联通过胎盘兰排斥试验,乳酸脱氢酶(LDH)释放试验及裸小鼠体内接种治疗,比较CEAIgG-A_5,A_5和CEAIgG对人食管癌细胞株Eca109细胞的体外、体内细胞杀伤作用,结果见到ECAIgG-A_5对Eca109培养细胞杀伤效应大于CEAIgG或A_5(P0.05-0.01);与对照组相比,CEAIgGA_5能明显抑制裸鼠体内Eca-109移植瘤生K,浸润程度降低并趋于高分化,其效应大于A_5,并且乳酸脱氢酶活性明显减弱。     

出血性脑卒中继发脑血管痉挛23例分析

目的探讨脑血管痉挛的病因、机制厦临床特点,为脑血管痉挛（CVS）的正确诊治提供方法。方法回顾性分析出血性卒中继发脑血管痉挛23例。结果①自发性蛛网膜下腔出血是CVS的常见病因,但脑出血所致CVS也是不客忽视的重要因素。②CVS发病机制复杂、临床特点及治疗方法具有多样性。结论详细了解患者神经症状和体征变化的特点,是厦时正确诊断和治疗CVS的临床基础,有助于减少和阻止致残、致死的发生。